馬全意

類風(fēng)濕因子的臨床檢驗(yàn)方法分析

馬全意

目的分析類風(fēng)濕因子(RF)的臨床檢驗(yàn)方法.方法30例類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者, 采用乳膠凝集反應(yīng)法、濁度散射比濁法以及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)血清RF水平, 觀察其檢測(cè)效果.結(jié)果乳膠凝集反應(yīng)法檢測(cè)陽(yáng)性15例, 陰性15例, 陽(yáng)性率為50.00%;濁度散射比濁法檢測(cè)陽(yáng)性22例, 陰性8例,陽(yáng)性率為73.33%;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)陽(yáng)性24例, 陰性6例, 陽(yáng)性率為80.00%.三種檢測(cè)方法均為陽(yáng)性患者15例.結(jié)論RF在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷中具有非常重要的臨床價(jià)值, 三種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),在檢驗(yàn)中可采取聯(lián)合應(yīng)用的方式提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性.

類風(fēng)濕因子;類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎;檢測(cè)方法

RF檢驗(yàn)是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷的一個(gè)重要指標(biāo).但在早期診斷中, 其缺乏特異性, 且其敏感度較低.當(dāng)前臨床檢驗(yàn)技術(shù)在不斷完善和進(jìn)步, RF的檢驗(yàn)方法也出現(xiàn)了很多, 這些方法適用性有所不同, 同時(shí)其自身也有不同的特點(diǎn), 因此需要對(duì)其建立科學(xué)的認(rèn)識(shí), 從而更好地加以利用[1-3].本文分析RF的臨床檢驗(yàn)方法, 報(bào)告如下.

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院2015年10月～2016年10月收治的30例類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者, 其中男7例, 女23例, 年齡22～58歲, 平均年齡(38.6±10.7)歲.患者經(jīng)檢查均確診為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎, 且所有患者均排除嚴(yán)重肝腎疾病、心血管疾病以及其他影響研究的基礎(chǔ)性疾病.患者的分離血清在-20℃環(huán)境中冷凍保存.

1.2 方法

1.2.1 乳膠凝集反應(yīng) 凝集反應(yīng)一般是IgM型類風(fēng)濕因子(IgM-RF)多價(jià)性的交聯(lián)乳膠顆粒和紅細(xì)胞表面的免疫球蛋白分子產(chǎn)生較為明顯的凝集物, 在56℃的條件下30 nin滅活,將待測(cè)血清用濃度為0.1 mol/L的甘氨酸緩沖鹽水進(jìn)行1∶20的稀釋處理, 1 ml生理鹽水中加入0.05 ml血清.取1滴稀釋血清, 加入RF試劑1滴, 將其放入反應(yīng)板中, 搖動(dòng)3 min,充分搖勻后, 在直射光下觀察.這種方式臨床上主要應(yīng)用于IgM-RF的檢測(cè), 具有良好的臨床應(yīng)用效果[2].

1.2.2 濁度散射比濁法 該方法主要利用待測(cè)血清中包被的免疫球蛋白分子與類風(fēng)濕因子乳膠顆粒所形成的免疫混合物, 檢測(cè)反應(yīng)體系中免疫復(fù)合物的濁度, 檢測(cè)時(shí)主要的工具為激光比色杯[3].將適量靜脈血溫育, 離心取上清液, 分杯待用, 檢測(cè)中主波長(zhǎng)為540 nm, 副波長(zhǎng)為800 nm, 比色杯的光徑為 1 cm, 試劑及樣本比例為 200 μl核對(duì) 100 μl, 標(biāo)本 10 μl,孵育時(shí)間為5 min.

1.2.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 該檢測(cè)方式是將人與動(dòng)物的免疫球蛋白分子共價(jià)和化學(xué)交聯(lián), 在固相介質(zhì)的微孔酶標(biāo)板上吸附, 后加入適量待測(cè)血漿, 經(jīng)PBS漂洗24 h, 后用蒸餾水浸泡1 h將瓊脂凝膠片浸泡在酶底下物溶液中著色若著色成功再用生理鹽水浸泡, 顏色不退則證明具有酶活性.檢測(cè)中固相化的免疫球蛋白分子會(huì)十分充分地與血清中的類風(fēng)濕因子融合在一起, 待完全融合后應(yīng)加入酶標(biāo)抗免疫球蛋白的抗體、IgA抗體和IgM抗體, 從而完成IgG-RF、IgA-RF和IgM-RF的檢測(cè).

1.3 觀察指標(biāo) 在乳膠凝集反應(yīng)法檢測(cè)中, 3 min內(nèi)出現(xiàn)凝集現(xiàn)象, 判定為陽(yáng)性;在濁度散射比濁法檢測(cè)中, 若檢測(cè)數(shù)值在30 IU/ml時(shí), 判定為陽(yáng)性;在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)中, 指標(biāo)正常范圍為:IgM-RF為0～16 IU/ml, IgA-RF為0～20 IU/ml, IgG-RF為0～70 IU/ml, 若檢測(cè)結(jié)果不在上述范圍可判定為陽(yáng)性[4].

2 結(jié)果

30例患者的血清標(biāo)本RF結(jié)果為:乳膠凝集反應(yīng)法檢測(cè)陽(yáng)性15例, 陰性15例, 陽(yáng)性率為50.00%;濁度散射比濁法檢測(cè)陽(yáng)性22例, 陰性8例, 陽(yáng)性率為73.33%;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)陽(yáng)性24例, 陰性6例, 陽(yáng)性率為80.00%.三種檢測(cè)方法均為陽(yáng)性患者15例.

3 討論

RF是一種將變性免疫球蛋白因子作為靶抗原的自身抗體, 其無(wú)顯著的種屬特異性.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者以及50%左右的健康人體內(nèi)均會(huì)產(chǎn)生類風(fēng)濕因子B細(xì)胞克隆, 其在某些病理因素的影響下, 能夠合成較多的RF[5-8].RF與天然的免疫球蛋白分子結(jié)合能力相對(duì)較弱, 但容易與免疫復(fù)合物中的免疫球蛋白或聚合免疫球蛋白發(fā)生反應(yīng).對(duì)RF進(jìn)行科學(xué)的臨床檢驗(yàn)對(duì)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的確診有著非常重要意義.類風(fēng)濕檢測(cè)的方法具有多樣性, 常見的有乳膠凝集反應(yīng)、濁度散射比濁法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn), 上述三種方式可檢測(cè)不同類型的RF, 同時(shí)也可進(jìn)行定量檢測(cè), 具有十分積極的臨床意義.

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血清中高效價(jià)的RF并存在明顯的關(guān)節(jié)功能受限, 則患者的預(yù)后較差, 沒有接受治療的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者RF陽(yáng)性率較高, 膠乳法滴度通常在1∶160以上.臨床研究表明, 免疫球蛋白R(shí)F與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的滑膜炎、血管炎等均有著十分密切的聯(lián)系.除了類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者外, RF也常見于硬皮病和系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)中, 其也是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活動(dòng)性的重要指標(biāo)之一.在非風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者中, RF的陽(yáng)性率與患者年齡呈正相關(guān), 但此類人群日后極少發(fā)生類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[6,9].

本文主要分析的三種方法臨床特點(diǎn)各不相同, 其優(yōu)勢(shì)與不足也存在著一定的差異, 但就臨床療效的角度看, RF檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)存在較大差異, 而產(chǎn)生這一現(xiàn)象的主要原因是實(shí)驗(yàn)室中RF檢驗(yàn)方法存在較大差異, 因此, 在檢測(cè)結(jié)果上也無(wú)法達(dá)到完全一致或十分接近, 即使采用相同的檢測(cè)方法但不同實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)RF滴度的方法也不具有可比性[10-12].RF陰性與陽(yáng)性的分界點(diǎn)也不是十分清晰, 分界點(diǎn)確定的決定性因素不同實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中所使用的血清.但是無(wú)論是哪種方法的檢測(cè)結(jié)果, 其都有著不可忽視的作用及意義, 對(duì)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療也有一定促進(jìn)作用.

總之, 在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷中, RF具有積極的臨床作用.在三種檢測(cè)方法中酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法的陽(yáng)性率最高,其敏感性較強(qiáng).三種檢測(cè)方法各有優(yōu)缺點(diǎn), 在臨床檢驗(yàn)過程中應(yīng)結(jié)合三種方法, 互為補(bǔ)充, 進(jìn)而可有效提高RA診斷的特異性, 提高臨床診斷的準(zhǔn)確率.

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2017-09-28]