趙玉洋，王鑫，袁媛*，蔣超，金艷，黃璐琦

(1.道地藥材國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心，北京 100700；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 300193)

·綜述·

雜交鹿茸及其鑒別研究進(jìn)展△

趙玉洋1，王鑫2，袁媛1*，蔣超1，金艷1，黃璐琦1

(1.道地藥材國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心，北京 100700；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 300193)

鹿茸是鹿科動(dòng)物雄鹿未骨化的幼角，其營(yíng)養(yǎng)成分豐富，屬貴重藥材?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》規(guī)定，鹿茸基原為梅花鹿或馬鹿，但目前市場(chǎng)上出現(xiàn)了一些雜交鹿茸，按照《中華人民共和國(guó)藥典》方法很難對(duì)其進(jìn)行鑒別，且目前對(duì)雜種優(yōu)勢(shì)與藥材質(zhì)量的研究鮮少報(bào)道。本文通過對(duì)目前鹿的雜交品種、雜交品種性狀及產(chǎn)茸情況、成分、核型及遺傳鑒定等研究現(xiàn)狀進(jìn)行梳理，旨在為雜交鹿茸的鑒定及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究提供參考。

鹿茸；雜交；馬鹿；梅花鹿

鹿茸屬于貴重藥材，同時(shí)也是良好的滋補(bǔ)圣品，千百年來受到醫(yī)者的重視，最早作為藥用記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》[1]規(guī)定，鹿茸的基原是鹿科動(dòng)物梅花鹿CervusnipponTemminck或馬鹿CervuselaphusLinnaeus的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角，前者習(xí)稱“花鹿茸”，后者習(xí)稱“馬鹿茸”。

雜交優(yōu)勢(shì)在家畜中被普遍認(rèn)可，在提高畜牧生產(chǎn)力方面被國(guó)內(nèi)外廣泛利用。早在20世紀(jì)50年代，我國(guó)就成功地進(jìn)行了梅花鹿和馬鹿的雜交，雜交鹿表現(xiàn)出明顯的雜種優(yōu)勢(shì)，普遍適應(yīng)性強(qiáng)、耐粗飼、抗病力強(qiáng)、性成熟早、生長(zhǎng)發(fā)育快。但對(duì)于藥材來說，有關(guān)雜種優(yōu)勢(shì)是否對(duì)鹿茸質(zhì)量和臨床療效造成影響尚未得到關(guān)注。本文通過對(duì)目前鹿的雜交品種、雜交品種性狀及產(chǎn)茸情況、成分、核型及遺傳鑒定等研究現(xiàn)狀進(jìn)行了梳理，旨在為雜交鹿茸的鑒定及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究提供參考。

1 鹿的雜交品種概述

目前，可以稱之為“鹿”類的動(dòng)物都屬于脊索動(dòng)物門哺乳綱偶蹄目下的鹿科、麝科和鼷鹿科。鹿科和麝科都具有重要的醫(yī)學(xué)、經(jīng)濟(jì)學(xué)和科學(xué)價(jià)值。鹿茸的來源以鹿科動(dòng)物為主。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界共有鹿科動(dòng)物約16屬52種。我國(guó)約有其中的10屬19種，是世界上具有種類最多且有特有屬種的國(guó)家[2]。鹿科分為4亞科：鹿亞科(真鹿亞科)、麂亞科、獐亞科、空齒鹿亞科(美洲鹿亞科)，其中鹿亞科鹿屬(Cervus)是鹿茸的主要來源。

目前，國(guó)內(nèi)雜交鹿茸可依據(jù)親本來源分成以下幾種：1)梅花鹿與馬鹿雜交后代(花·馬雜交)，母本來源包括：東北梅花鹿(Cervusnippondybowskii)[3-7]、長(zhǎng)白山梅花鹿(Cervusnippon)[8]、雙陽(yáng)梅花鹿(Cervusnippon)[9]、日本梅花鹿(Cervusnipponnippon)[10]等，父本來源包括：東北馬鹿(Cervuselaphusxanthopygus)[3-4]、天山馬鹿(Cervuselaphussongaricus)[5]、塔里木馬鹿(Cervuselaphusyarkandensis)[7-8]等；2)馬鹿與馬鹿雜交后代(馬·馬雜交)，母本來源包括東北馬鹿(Cervuselaphusxanthopygus)[6-7]、天山馬鹿(Cervuselaphussongaricus)[6]、甘肅馬鹿(Cervuselaphuskansuensis)[7]、塔里木馬鹿(Cervuselaphusyarkandensis)[11]、北美馬鹿(Cervuscanadensis)[12]等，父本來源包括：天山馬鹿(Cervuselaphussongaricus)[7]、塔里木馬鹿(Cervuselaphusyarkandensis)[5]、克什米爾馬鹿(Cervuselaphushanglu)[12]、阿爾泰馬鹿(Cervuscanadensisasiaticus)[12]等；3)水鹿與馬鹿或梅花鹿雜交[13-14]，母本來源水鹿(Cervusunicolor)，父本來源包括：新疆馬鹿(Cervuselaphus)、歐洲馬鹿(Cervuselaphus)和梅花鹿(Cervusnippon)；4)麋鹿和馬鹿雜交[15-16]，母本來源麋鹿(Elaphurusdavidianus)，父本來源馬鹿(Cervuselaphus)；5)斑鹿和馬鹿雜交[12]，母本來源斑鹿(Cervusaxis)，父本來源東北馬鹿(Cervuselaphusxanthopygus)和馬鹿(Cervuselaphus)。

另外，還有以馴鹿為母本、雙陽(yáng)梅花鹿為父本繁育的F1代，再與天山馬鹿進(jìn)行雜交的品種[17]。而一些雜交品種后代出現(xiàn)不育的現(xiàn)象，如白唇鹿(Gervusalbirostris)和梅花鹿(Cervusnippon)的雜交后代[18]。

2 雜交鹿的性狀特征及產(chǎn)茸情況

馬鹿和梅花鹿雜交[3，19]后代F1的形態(tài)外貌具有其雙親的特征，體型介于雙親中間態(tài)，前額平寬，口角寬大，下唇較短，頸粗短，髭毛較長(zhǎng)，被毛暗赤褐色，體軀兩側(cè)被毛似母本具有梅花鹿樣的白色斑點(diǎn)，臀斑淺黃色，邊緣無黑毛，尾尖白色，無梅花鹿的黑尾尖。F1代產(chǎn)茸性能好，表現(xiàn)為2～11歲(n=577)期間，鮮茸單產(chǎn)達(dá)3.670 kg，比母本的2.230 kg高64.1%，比父本的3.460 kg高6.1%，雜種優(yōu)勢(shì)率為29%。

馬鹿和馬鹿雜交[19-20]后代F1體型明顯大于母本，被毛栗灰色，頭、頸、四肢外側(cè)的被毛呈灰黑色(“三灰”與東北馬鹿的“三黃”成明顯對(duì)照)，臀斑較小，呈淺黃白色，間有一簇簇白毛，其邊緣至脊背有明顯黑帶，髭毛和髯毛明顯，呈灰黑色，茸型接近父本，茸毛粗。F1代(2～10歲)標(biāo)準(zhǔn)三杈鋸茸鮮重平均單產(chǎn)為5.064 kg，比母本的3.308 kg提高53.1%，比父本天山馬鹿的5.082 kg僅低0.4%，雜種優(yōu)勢(shì)率為20.72%。雜交鹿茸的角基距、角基圍、茸長(zhǎng)、鮮茸重皆優(yōu)于純種，二杠茸的角基圍、主干長(zhǎng)、眉枝長(zhǎng)約為純種的2倍[21]。各雜交品種在產(chǎn)茸性能上都體現(xiàn)出了良好的雜交優(yōu)勢(shì)。

3 雜交鹿茸的成分分析

鹿茸主要成分有糖類、脂類、蛋白質(zhì)、氨基酸、多肽類、無機(jī)元素、含N化合物、甾類、維生素、脂肪酸類等[22]。梅花鹿和馬鹿的F1代[5，23-26]中常規(guī)成分(水份、干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、能量、水溶性物質(zhì)、醇溶性物質(zhì))、生化成分含量(膽固醇、核糖核酸、氨基已糖)與親本相近，鹿茸中含有的粗蛋白、Ca、P、Na、Fe、Ba、Sr、谷氨酸及甘氨酸等成分與其品質(zhì)特征密切相關(guān)。根據(jù)無機(jī)元素含量的主成分分析，可將梅花鹿茸與馬鹿茸和雜交品種予以區(qū)分，但馬鹿茸和雜交品種仍聚類在一起尚不能區(qū)分，有待進(jìn)一步的研究[27]。

馬·馬F1代[5]鹿茸粗蛋白質(zhì)、能量、必需氨基酸、水溶性物質(zhì)以及Fe、Mn、Co等微量元素含量明顯高于母本東北馬鹿茸，但膽固醇含量明顯低于母本。馬鹿茸二元雜交和三元雜交[28]的水分、粗蛋白、礦物質(zhì)含量和硫酸軟骨素含量豐富，且三元雜交的氨基酸、激素含量?jī)?yōu)于天山馬鹿原種和二元雜交。值得關(guān)注的是，與促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān)的谷丙轉(zhuǎn)氨酶在二元雜交中的活性高于原種和三元雜交，而與誘發(fā)和促進(jìn)機(jī)體衰老的黃嘌呤氧化酶的活性則極顯著，低于原種、三元雜交，這可能與二元雜交在遺傳上具有很強(qiáng)的雜交優(yōu)勢(shì)有關(guān)。

從成分方面的研究結(jié)果可以看出，雜交品種成分與親本在含量上略有差異，且雜交后粗蛋白、礦物質(zhì)、氨基酸等含量均優(yōu)于親本，這體現(xiàn)了一定的雜交優(yōu)勢(shì)。雖然，馬鹿的雜交后代可以通過谷丙轉(zhuǎn)氨酶等活性差異與其親本進(jìn)行區(qū)分，但這種方法可重復(fù)性差、難以應(yīng)用。

4 核型與遺傳鑒定

馬鹿與梅花鹿[4-5]F1代染色體組型：染色體總臂數(shù)NF=70，X是核型中最大的頂端著絲粒染色體，Y則是最小的亞中著絲粒染色體；二倍染色體數(shù)為67條，包括1對(duì)性染色體和65條常染色體。Senn等[10]利用mtDNA標(biāo)記和微衛(wèi)星位點(diǎn)并計(jì)算每個(gè)位點(diǎn)的雜交分?jǐn)?shù)Q來區(qū)分梅花鹿、馬鹿及其雜交品種(0=梅花鹿，1=馬鹿)，結(jié)果表明，雜種的Q值位于0.05～0.95，而親本梅花鹿的Q值位于0.01～0.05、馬鹿的Q值位于0.95～0.99。孟浩[29]通過研究梅花鹿、馬鹿以及其F1代X染色體上不同位點(diǎn)的表達(dá)基因發(fā)現(xiàn)，馬鹿和F1代中的PGK1基因均出現(xiàn)X染色體等位基因表達(dá)，且通過劑量補(bǔ)償效應(yīng)分析發(fā)現(xiàn)，存在X染色體失活逃逸現(xiàn)象；同時(shí)F1代中的BTK與G6PD基因間也存在劑量補(bǔ)償效應(yīng)，推測(cè)其主要受到親本梅花鹿對(duì)應(yīng)基因表達(dá)的影響，推測(cè)梅花鹿與馬鹿雜交后F1代的X染色體來源為梅花鹿。

水鹿和馬鹿F1代二倍染色體數(shù)為62[13]。Slate等[30]通過歐洲馬鹿和麋鹿種間雜交獲得鹿基因組的初步連鎖圖。Tate等[15]對(duì)水鹿和歐洲馬鹿的雜交群體進(jìn)行了遺傳分析，發(fā)現(xiàn)物種之間的連鎖分析將基因座置于4個(gè)連鎖群中，確定了相鄰基因座和基因順序。上述研究為雜交鹿茸分子鑒定方法的建立提供了一定的理論依據(jù)。

5 展望

中國(guó)作為鹿茸來源大國(guó)，鹿類的品種選育研究幾乎走在了世界的前端，雜交品種十分豐富。因《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的正品鹿茸來源為梅花鹿或馬鹿，雜交大多圍繞梅花鹿、馬鹿種間及其亞種間展開。目前對(duì)于雜交品種的存活、產(chǎn)茸情況及化學(xué)成分已有較多研究，從農(nóng)業(yè)生產(chǎn)角度來看，雜交品種具有更高的存活率，且能提高鹿茸的產(chǎn)茸量，體現(xiàn)了雜種優(yōu)勢(shì)，具有廣泛的發(fā)展前景。從基因組學(xué)和表觀遺傳學(xué)的角度來看，雜種優(yōu)勢(shì)來自父、母本基因組等位基因之間的相互作用，從而改變有關(guān)基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，促進(jìn)生長(zhǎng)，提高抗逆性和適應(yīng)性。

鹿茸是傳統(tǒng)的中藥材，有著極高的藥用價(jià)值，通過雜交方式可以擴(kuò)大藥源，從一定程度上解決藥源短缺的問題，進(jìn)而促進(jìn)鹿茸的利用與開發(fā)。但從中藥的角度來看，對(duì)于雜交鹿茸的鑒定、質(zhì)量評(píng)價(jià)、藥理作用及安全性評(píng)價(jià)幾乎沒有報(bào)道。另一方面，動(dòng)物雜種優(yōu)勢(shì)產(chǎn)生的分子遺傳機(jī)理研究目前也主要側(cè)重于性狀表現(xiàn)，對(duì)其他指標(biāo)影響的機(jī)制研究也未得到關(guān)注及重視。雜種優(yōu)勢(shì)在提高鹿茸產(chǎn)量的同時(shí)是否對(duì)其質(zhì)量造成影響尚沒有明確的結(jié)論，未來需要提供更多的數(shù)據(jù)為鹿雜交品種作為新藥源提供理論依據(jù)。

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ResearchProgressonHybridDeerAntlerandItsIdentification

ZHAOYuyang1，WANGXin2，YUANYuan*，JIANGChao1，JINYan1，HUANGLuqi1

(1.NationalResourceCenterforChineseMateriaMedica，ChinaAcademyofChineseMedicalSciences，Beijing100700，China；2.TianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine，Tianjin300193，China)

Deer antler is the not ossificated young deer animal bucks，and valuable medicinal herbs with rich nutrients.Chinese Pharmacopoeia provides deer antler base for red deer or sika deer，but there are some hybrid deer on the market，according to pharmacopoeia method it is difficult to identify，and the current heterosis and the quality of herbs are rarely reported.This article deals with the current deer hybrid varieties，hybrid varieties traits，production conditions，composition，karyotype，genetic identification and other research which aims to provide reference for the identification and quality evaluation of hybrid deer antler.

Deer antler；hybrid；red deer；sika deer

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.12.025

中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)藥“一帶一路”合作專項(xiàng)(ZZ10-018-01)；中醫(yī)藥行業(yè)科研專項(xiàng)(20147003)

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袁媛，研究員，研究方向：中藥鑒定與分子生藥學(xué)研究；Tel：(010)64097649,E-mail：y_yuan0732@163.com

2017-05-25)