李燕鴻 綜述 張連生 審校

(甘肅省血液病重點(diǎn)實驗室，蘭州大學(xué)第二醫(yī)院，蘭州 730030)

急性白血病多藥耐藥免疫逆轉(zhuǎn)策略研究進(jìn)展①

李燕鴻 綜述 張連生 審校

(甘肅省血液病重點(diǎn)實驗室，蘭州大學(xué)第二醫(yī)院，蘭州 730030)

白血病治療的目的是清除白血病克隆重建正常骨髓造血。目前，化療已成為白血病最主要的治療方式，但復(fù)發(fā)率較高?？鼓[瘤藥物療效受到三個方面因素的限制：①到達(dá)靶細(xì)胞的化療藥藥物代謝動力學(xué)特征；②對體內(nèi)正常細(xì)胞和組織的殺傷；③腫瘤細(xì)胞對化療藥物的耐藥性。后者是治療白血病面臨的主要問題。用一種化療藥物作用腫瘤細(xì)胞后，腫瘤細(xì)胞不但會對該藥產(chǎn)生耐藥，同時有可能對其他結(jié)構(gòu)和分子靶點(diǎn)不同的多種藥物產(chǎn)生耐藥，稱之為多藥耐藥(Multidrug resistance,MDR)[1]。MDR仍然是導(dǎo)致血液腫瘤化療失敗和患者死亡的最主要原因之一。近年來，免疫治療作為逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的方法之一，因其副作用小，應(yīng)用前景廣等優(yōu)勢引起了國內(nèi)外研究者的廣泛關(guān)注。

腫瘤細(xì)胞多藥耐藥主要機(jī)制是由通過外排泵降低細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度起作用。白血病經(jīng)典的耐藥機(jī)制主要涉及ATP 結(jié)合盒(ATP Binding Cassette)膜載體蛋白家族。主要包括ABCB1(P-糖蛋白)和ABCC1(MDR相關(guān)蛋白)，還有一個核質(zhì)分之轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白——肺耐藥蛋白(Lung resistance protein,LRP)[2]。

1 急性白血病多藥耐藥蛋白

1.1ABCB1蛋白(P-glycoprotein,P-gp) ABCB1蛋白是位于第7號染色體上由abcb1基因編碼的糖化蛋白，P-gp為研究最廣泛的ATP依賴的“外排泵”[3]。它是1976年Juliano等[4]在中國倉鼠卵巢細(xì)胞株的胞膜上發(fā)現(xiàn)的一種分子大小為170 kD的跨膜蛋白及p170。這種蛋白是ATP結(jié)合家族的一員，是能量依賴性藥物轉(zhuǎn)運(yùn)泵，能將疏水親脂性藥物泵出細(xì)胞外，而導(dǎo)致細(xì)胞耐藥。部分藥物在未進(jìn)入細(xì)胞之前，在胞膜上與p170結(jié)合，而無法進(jìn)入細(xì)胞。P-gp 既可增加藥物排出，又可降低藥物流入。P-gp易使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生經(jīng)典MDR藥物多為天然的相對分子質(zhì)量較大的親脂性藥物如阿霉素、柔紅霉素、放線菌素、長春堿類、紫杉醇類、替尼泊苷和依托泊苷等抗腫瘤藥物[5]。有研究顯示，ABCB1蛋白可能參與炎癥過程中的免疫應(yīng)答反應(yīng)[6]。ABCB1蛋白在一些免疫系統(tǒng)細(xì)胞中表達(dá)，并且和一些細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)，如：IL-2、IL-4和IFN-γ[7，8]。ABCB1蛋白的表達(dá)對腫瘤化療療效起著重要作用：①ABCB1在幾類腫瘤中高表達(dá)顯示出明顯的耐藥性；②化療后的耐藥伴隨著ABCB1蛋白的水平的增高；③在某些腫瘤中ABCB1蛋白水平用于預(yù)測預(yù)后[9]

1.2ABCC1(多藥耐藥相關(guān)蛋白-MRP1) ABCC1(Multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)也是ATP依賴的轉(zhuǎn)膜蛋白，由位于16號染色體p13上abccc1基因編碼[10]。ABCC1蛋白是第一個發(fā)現(xiàn)的ABCC亞家族成員，大小為190 kD[11]，幾乎分布于所有組織中。它轉(zhuǎn)運(yùn)疏水陰離子和還原型谷胱甘肽共軛的有機(jī)陰離子、葡萄糖苷酸以及硫酸鹽等。ABCC1的生理功能是排除正常代謝產(chǎn)物和外源有毒物質(zhì)如化療藥，是目前與白血病耐藥關(guān)系最為密切的耐藥通道之一。研究表明：MRP1介導(dǎo)多種急性白血病常用藥物耐藥轉(zhuǎn)運(yùn)，包括長春堿、長春新堿、依托泊苷、甲氨蝶呤、阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、伊達(dá)比星、米托蒽醌、環(huán)磷酰胺以及亞砷酸鹽等[12]。

ABCC1介導(dǎo)的多藥耐藥機(jī)制可能是ABCC1識別并轉(zhuǎn)運(yùn)與谷胱甘肽(Glutathione,GSH)偶合的底物，這種共轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制被相關(guān)研究證實，顯示當(dāng)GSH缺失或合成受到抑制時，ABCC1降低了對相關(guān)底物的轉(zhuǎn)運(yùn)作用[13]。臨床研究亦發(fā)現(xiàn)：在AML患者中，MRP1的高表達(dá)與白血病耐藥及復(fù)發(fā)有密切關(guān)系。同時，還有些研究顯示ABCC1的表達(dá)和白血病的耐藥沒有相關(guān)性，這可能是因為有些腫瘤共同表達(dá)ABCB1和ABCC1，而白血病也表達(dá)多重耐藥蛋白，這些蛋白共同引起了白血病MDR。

1.3肺耐藥相關(guān)蛋白(Lung resistance protein,LRP) 是在具有MDR的肺癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的，基因lrp位于16號染色體P11上，編碼分子大小為110 kD的非糖類蛋白質(zhì)。LRP是細(xì)胞穹窿體的主要蛋白成分，它可能由兩種機(jī)制引起MDR：一是通過核靶點(diǎn)屏蔽機(jī)制使以細(xì)胞核為靶點(diǎn)的藥物不能通過和進(jìn)入細(xì)胞核而引起耐藥；二是它可使胞質(zhì)中藥物進(jìn)入運(yùn)輸囊泡，并通過胞吐作用排出細(xì)胞外[14]。研究表明：在一些實體瘤中LRP的過度表達(dá)和一些化療藥的耐藥有關(guān)，如阿霉素、長春新堿、依托泊苷、紫杉酚等。而在血液惡性腫瘤中，病情的惡性程度和MDR表型有著正相關(guān)性，LRP在兒童急淋中高表達(dá)[15]。在AML、MM以及彌漫大B淋巴瘤中LRP的表達(dá)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的MDR，并且患者的平均壽命也相應(yīng)縮短[16]。LRP的表達(dá)和MDR的關(guān)系一直存在爭議，最新研究強(qiáng)調(diào)LRP可能是通過胞外生長因子PI3K/AKT信號調(diào)節(jié)MDR[17]。在血液腫瘤中，Raf和AKT通過刺激細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡和加速惡性克隆來引起MDR的產(chǎn)生[18]。

2 免疫機(jī)制逆轉(zhuǎn)多藥耐藥

大部分化療藥不能消滅多藥耐藥腫瘤細(xì)胞，而腫瘤細(xì)胞的免疫耐受和對化療藥物的多藥耐藥機(jī)理不相關(guān)，故可以將免疫療法和化療藥相結(jié)合用于治療多藥耐藥腫瘤。免疫化療法是聯(lián)合細(xì)胞毒素劑和免疫治療，使其發(fā)揮各自最佳的治療效果。免疫化療法主要用于傳統(tǒng)化療藥治療效果不佳的惡性腫瘤，包括血液惡性腫瘤、淋巴瘤和白血病等。以B細(xì)胞為靶點(diǎn)的CD20單抗(利妥昔單抗)聯(lián)合細(xì)胞毒藥物氟達(dá)拉濱和環(huán)磷酰胺用于治療慢性淋巴細(xì)胞白血病[19]。還有人將抗CD52單抗(阿倫單抗)聯(lián)合氟達(dá)拉濱和環(huán)磷酰胺以及利妥昔單抗用于慢性淋巴細(xì)胞白血病的治療。一些化療藥物在特殊條件下能增強(qiáng)抗腫瘤免疫，主要通過增加腫瘤細(xì)胞的免疫原性，降低免疫紊亂，或者誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡從而提高抗腫瘤免疫(主要通過激活抗原遞呈細(xì)胞)。蒽環(huán)類藥物阿霉素和伊達(dá)比星等誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)了樹突狀細(xì)胞對腫瘤相關(guān)抗原的攝取，促使DC細(xì)胞的成熟，提高抗原遞呈能力，激活了抗捕獲腫瘤抗原的原位免疫效應(yīng)。大部分化療藥物由于腫瘤耐藥的原因達(dá)不到細(xì)胞毒的藥效劑量，但通過聯(lián)合免疫細(xì)胞能夠增強(qiáng)抗腫瘤免疫效應(yīng)來殺死MDR腫瘤細(xì)胞[20]。為了提高免疫化療治療MDR腫瘤的療效，首先要選用能提高抗腫瘤免疫作用的細(xì)胞毒藥，其次要用能減低腫瘤相關(guān)免疫紊亂的化療藥物。本文主要通過細(xì)胞因子、特異性抗體、免疫細(xì)胞及免疫抑制劑等對多藥耐藥逆轉(zhuǎn)的研究進(jìn)行綜述。

2.1細(xì)胞因子 近年來，逆轉(zhuǎn)多藥耐藥已經(jīng)成為腫瘤化療一個新的研究方向，細(xì)胞因子逆轉(zhuǎn)多藥耐藥已引起國內(nèi)外科學(xué)家的高度關(guān)注。研究表明，很多細(xì)胞因子都能起到多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用，從而明顯提高了腫瘤臨床治療效果。將TNF-α、IFN-γ、IL-2加入到結(jié)腸癌細(xì)胞株中培養(yǎng)，mdr1基因表達(dá)下調(diào)，癌細(xì)胞對長春新堿和阿霉素的敏感性也增強(qiáng)[21]。賈慶瑞等[22]以IL-2與化療藥物合用治療急性白血病患者，與單用化療藥物患者相比，白血病細(xì)胞P-gp及LRP表達(dá)減低，可以顯著增強(qiáng)化療效果。平寶紅等[23]實驗證實，IFN-α能提高K562/AO2細(xì)胞內(nèi)藥物的濃度，恢復(fù)化療藥物的細(xì)胞殺傷作用，但對P-糖蛋白及多藥耐藥基因1及其mRNA的表達(dá)沒有明顯影響，這一研究表明IFN-α能增強(qiáng)化療藥物對耐藥腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。

2.2特異性抗體 MDR的表達(dá)已經(jīng)成為急性髓系白血病治療過程中非常棘手的難題，針對MDR抗原表位制備特異識別的單克隆抗體，應(yīng)用于臨床還有待進(jìn)一步的研究。Mizukoshi等[24]報道的一項Ⅰ期臨床試驗中，12例肝癌患者接受MRP3衍生蛋白治療(因其能夠激活MRP3特異性T細(xì)胞，起到抗原-抗體的免疫反應(yīng))，其中9例達(dá)到病情穩(wěn)定，中位生存時間為14個月，均未見嚴(yán)重不良反應(yīng)。

90%以上急性髓系白血病表達(dá)CD33，吉妥單抗(Gemtuzumab ozogamicin,GO)為抗腫瘤藥物Calicheamicin和人抗鼠CD33單克隆抗體的偶聯(lián)物，用于AML的治療。體外實驗顯示：多藥耐藥蛋白P-gp將Calicheamicin從AML細(xì)胞株中泵出體外，而GO與CD33抗原結(jié)合后，形成的細(xì)胞表面復(fù)合物可被靶細(xì)胞迅速內(nèi)吞，被靶細(xì)胞內(nèi)吞的偶聯(lián)物的雙功能鏈隨即在胞內(nèi)酸性條件下斷裂，水解釋放CLM，而高親脂性的CLM可進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)產(chǎn)生細(xì)胞毒效應(yīng)，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡[25]。然而，由于GO的連接器的不穩(wěn)定導(dǎo)致細(xì)胞毒素的脫靶或藥物傳送區(qū)域限制的原因，臨床療效的有限以及出現(xiàn)少數(shù)的不良事件導(dǎo)致GO的退市。針對GO的缺點(diǎn)，SGN-CD33A明顯的改進(jìn)了偶聯(lián)技術(shù)，使用能精確負(fù)載相同藥載量單抗的偶聯(lián)物(Antibody-drug conjugate,ADC)。它通過可分裂的蛋白酶二肽將抗CD33抗體mAb和Pyrrolobenzodiazepine(PBD)連接，PBD能和DNA交聯(lián)，引起DNA的損傷導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯和細(xì)胞凋亡，有望引起藥物吸收的最大化并且提高藥物的細(xì)胞毒性。臨床前研究顯示：無論是在MDR陰性或陽性的AML細(xì)胞株和AML小鼠模型中，SGN-33A均有高效的裂解和殺傷活性[26]。

另外CD147為細(xì)胞表面糖蛋白，在腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長，并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥。CD44是主要的透明質(zhì)酸受體，也具有多效性，介導(dǎo)細(xì)胞的黏附、增殖、分化、遷移以及多藥耐藥等，是涉及到腫瘤發(fā)病機(jī)理的細(xì)胞外基質(zhì)主要元素，靶向CD44和CD147的抗體能使MDR細(xì)胞對細(xì)胞毒藥物更敏感[27]。

2.3免疫細(xì)胞

2.3.1DC-CIK 樹突狀細(xì)胞(Dendritic cells,DC)是專職抗原遞呈細(xì)胞，能有效地捕獲、加工處理和遞呈抗原，誘導(dǎo)抗原特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞反應(yīng)(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)。 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(Cytokine induced killer cell,CIK)是同時具有T淋巴細(xì)胞抗瘤活性和NK細(xì)胞非主要組織相容性復(fù)合體(Major histocompatibility complex,MHC)限制性的殺瘤的特點(diǎn)，其增殖能力強(qiáng)、殺瘤活性高、殺瘤活性廣譜，依靠其細(xì)胞毒性和分泌的細(xì)胞因子發(fā)揮其抗腫瘤的作用[28]。DC和CIK兩者的作用機(jī)制高度互補(bǔ)，聯(lián)合應(yīng)用提高了急性白血病的治療效果，并且對白血病多藥耐藥有明顯的逆轉(zhuǎn)作用。

蘇榮英等[29]以P-gp為經(jīng)典耐藥機(jī)制作為切入點(diǎn)，將DC-CIK與白血病多藥耐藥株(K562/ADR)細(xì)胞共培養(yǎng)，結(jié)果表明，DC-CIK對P-gp高表達(dá)的K562/ADR耐藥細(xì)胞株具有特異性的細(xì)胞毒作用，有效提高了細(xì)胞內(nèi)的ADR含量，下調(diào)了P-gp和MDR1的表達(dá)。DC-CIK細(xì)胞較CIK細(xì)胞更能提高多藥耐藥細(xì)胞對阿霉素的敏感性，抑制其增殖，證明了免疫效應(yīng)細(xì)胞體外逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的作用。有研究顯示，DC細(xì)胞可以通過競爭性抑制P-gp上ATP位點(diǎn)，影響其ATP泵功能，使化療藥物外排減少。DC-CIK在培養(yǎng)過程中分泌細(xì)胞因子如α-INF、TNF-α、IL-2 等，這些細(xì)胞因子可通過改變細(xì)胞膜的脂質(zhì)組成或影響P-gp的活性來增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對化療的敏感性，這些細(xì)胞因子還具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用[30]。另外還有研究顯示，免疫效應(yīng)細(xì)胞可以損傷MDR細(xì)胞的細(xì)胞膜，導(dǎo)致藥物外排泵受到破壞，P-gp的表達(dá)下調(diào)，使耐藥腫瘤細(xì)胞內(nèi)化療藥物濃度增高，從而逆轉(zhuǎn)MDR。

有研究表明，免疫效應(yīng)細(xì)胞通過釋放的穿孔素等物質(zhì)損傷耐藥靶細(xì)胞膜，破壞藥物外排泵，使P-gp表達(dá)發(fā)生下調(diào)，細(xì)胞內(nèi)化療藥物的積累增加，逆轉(zhuǎn)靶細(xì)胞的耐藥性。研究者發(fā)現(xiàn)免疫效應(yīng)細(xì)胞對耐藥腫瘤細(xì)胞的殺傷力明顯高于其藥物敏感株，考慮可能是由于MDR腫瘤細(xì)胞耐藥蛋白的過度表達(dá)增強(qiáng)了靶細(xì)胞的免疫原性，因而易于成為免疫效應(yīng)細(xì)胞攻擊的靶點(diǎn)，從而產(chǎn)生破壞耐藥蛋白的功能[31]。

2.3.2CAR-T細(xì)胞 嵌合抗原受體(Chimeric antigen receptor,CAR)療法作為免疫治療的新領(lǐng)域獲得了令人鼓舞的結(jié)果℃AR-T是通過基因工程技術(shù)將腫瘤相關(guān)抗原(Tumor-associated antigen,TAA)結(jié)合區(qū)域、鉸鏈區(qū)域、跨膜區(qū)域和胞內(nèi)信號區(qū)域結(jié)合為一體，利用該融合基因修飾的T細(xì)胞。它既能夠特異識別并結(jié)合抗原，又具備T細(xì)胞殺傷能力。基于CAR-T的設(shè)計原理，CAR-T在腫瘤的免疫治療中擁有很多獨(dú)特的優(yōu)勢：首先CAR-T細(xì)胞以非HLA分子限制的模式識別腫瘤抗原，這使得T細(xì)胞繞過抗原提呈細(xì)胞的抗原遞呈，克服了腫瘤細(xì)胞HLA分子表達(dá)下調(diào)的免疫逃逸直接殺傷腫瘤細(xì)胞；其次，CAR-T可以特異識別蛋白、糖類以及脂類抗原，擴(kuò)大了作用靶點(diǎn)范圍；同時，應(yīng)用廣泛活化后的CAR-T 細(xì)胞能夠分泌很多細(xì)胞因子來對抗免疫抑制的腫瘤微環(huán)境，提高T細(xì)胞的抗腫瘤效應(yīng)[32]。

目前，抗CD19的CAR-T已經(jīng)在B淋巴細(xì)胞白血病中有顯著的療效，如Maude等[33]應(yīng)用CAR-T細(xì)胞治療30例復(fù)發(fā)/難治急性淋巴細(xì)胞白血病患兒，其中90%(27例)完全緩解，持續(xù)緩解6個月的無事件生存率為67%，即使干細(xì)胞移植失敗的患者亦可持續(xù)緩解達(dá)24個月℃AR-T也有根治AML的潛力，但多數(shù)AML細(xì)胞與造血干細(xì)胞或祖細(xì)胞有共同抗原，限制了其應(yīng)用。Kenderian等[34]臨床前研究報道了CART33 細(xì)胞單獨(dú)或聯(lián)合化療藥有良好的抗AML細(xì)胞效應(yīng)。尤其是CD123與癌細(xì)胞的抗凋亡有關(guān)，能夠增加癌細(xì)胞的擴(kuò)增，同時也是不良預(yù)后的危險因素，可能成為治愈AML的一個潛在靶點(diǎn)。

細(xì)胞內(nèi)蛋白WT1在多種急慢性白血病和實體瘤細(xì)胞中過表達(dá)。Rafiq等[35]使用ESK1 TCRm作為CAR，能特異殺傷WT1-HLA-A*02:01陽性的多種腫瘤細(xì)胞，提示CAR-T細(xì)胞免疫可靶向腫瘤細(xì)胞內(nèi)蛋白抗原，這為白血病多藥耐藥蛋白靶向治療提供新的思路?？梢栽O(shè)計靶向P-gp、MRP或LRP蛋白的CAR-T細(xì)胞，為逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥提供更有力的手段。

2.4免疫抑制劑-環(huán)孢菌素A 環(huán)孢菌素A(Cyclosporine A,CsA)是最早用于耐藥逆轉(zhuǎn)研究，且在體外實驗效果最好的經(jīng)典藥物之一。目前比較公認(rèn)的CsA逆轉(zhuǎn)MDR的機(jī)制是：CsA作為一種高度親脂類藥物，它與抗腫瘤藥物競爭P糖蛋白的結(jié)合位點(diǎn)，抑制P-gp將抗腫瘤藥物的外排作用，提高細(xì)胞內(nèi)抗腫瘤藥物濃度而逆轉(zhuǎn)耐藥[36]。CsA可下調(diào)mdr1的表達(dá)來降低p170的表達(dá)進(jìn)而逆轉(zhuǎn)MDR，其作用可能與CsA抑制蛋白激酶D(PKC)活性有關(guān)。提示CsA可能通過抑制PKC活性，降低P170磷酸化來降低其泵藥物功能。同時，CsA作為免疫抑制劑廣泛應(yīng)用于血液系統(tǒng)疾病的治療，CsA的免疫抑制作用是通過胞漿受體或細(xì)胞因子編碼基因轉(zhuǎn)錄所需的重要的核蛋白的相互作用來實現(xiàn)對T細(xì)胞活化的早期階段的抑制℃sA的逆轉(zhuǎn)耐藥作用可能是與mdr1基因轉(zhuǎn)錄過程中所需核蛋白相互作用有關(guān)。故CsA作為免疫抑制劑在治療血液腫瘤過程中可能發(fā)揮更為重要的作用。其免疫抑制作用和逆轉(zhuǎn)多藥耐藥作用兩者之間是否存在關(guān)聯(lián)有待于深入的研究和探討。

3 總結(jié)

免疫治療有望成為逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥有力手段，許多免疫療法在ALL中治療取得了較理想的療效，而多數(shù)AML細(xì)胞與造血干細(xì)胞或祖細(xì)胞有共同抗原，免疫治療AML還面臨著巨大挑戰(zhàn)。理論上，針對白血病多藥耐藥干細(xì)胞的免疫治療將有望治愈白血病。MDR基因的表達(dá)可以作為多藥耐藥腫瘤免疫治療的潛在靶點(diǎn)。在將來，免疫療法將根據(jù)患者的遺傳學(xué)危險分層和免疫表型等因素制定個體化治療方案，細(xì)胞治療的時機(jī)、劑量、次數(shù)、抗腫瘤效應(yīng)的調(diào)控、有效評估系統(tǒng)的界定也是必須考慮的因素。同時，CsA在治療血液病中除發(fā)揮免疫抑制作用外也具有逆轉(zhuǎn)耐藥的功能，兩者之間是否存在一定的內(nèi)在聯(lián)系還有待于進(jìn)一步的探索。此外，細(xì)胞免疫治療與造血干細(xì)胞移植以及化療藥物的聯(lián)合等問題均需要大量的臨床前研究及多中心的大樣本臨床試驗進(jìn)一步研究。隨著對MDR機(jī)制的研究和對抗腫瘤免疫治療的指導(dǎo)原則的理解，白血病多藥耐藥的個體化治療以及聯(lián)合治療方案的實施將得到快速發(fā)展。本文對急性白血病多藥耐藥的免疫治療現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述，為免疫治療大規(guī)模應(yīng)用于血液系統(tǒng)惡性腫瘤的多藥耐藥逆轉(zhuǎn)提供新的思路和方向。

[1] Li W,Zhang H,Assaraf YG,etal.Overcoming ABC transporter-mediated multidrug resistance:molecular mechanisms and novel therapeutic drug strategies[J].Drug Resist Updat,2016,27:14-29.

[2] Huang W,Mao Y,Zhan Y,etal.Prognostic implications of survivin and lung resistance protein in advanced non-small cell lung cancer treated with platinum-based chemotherapy[J].Oncol Lett,2016,11(1):723-730.

[3] Aller SG,Yu J,Ward A,etal.Structure of P-glycoprotein reveals a molecular basis for poly-specific drug binding[J].Science,2009,323:1718-1722.

[4] Juliano RL,Ling V.A surface glycoprotein modulating drug permeability in chinese hamster ovary cell mutants[J].Biochimica et Biophysica Acta,1976,455:152-162.

[5] Zhao D,Jiang Y,Dong X,etal.Arsenic trioxide reduces drug resistance to adriamycin in leukemic K562/A02 cells via multiple mechanisms[J].Biomed Pharmacother,2011,65(5):354-358.

[6] Cario E.P-glycoprotein multidrug transporter in inflammatory bowel diseases:More questions than answers[J].World J Gastroenterol,2017,23(9):1513-1520.

[7] Lima DB,Valente RC,Capella MAM.Ouabain-induced alterations in ABCB1 of mesenteric lymph nodes and thymocytes of rats and mice[J].Oncol Lett,2016,12(6):5275-5280.

[8] Liu W,Li H,Zhang D,etal.Effects of the multidrug resistance-1 gene on drug resistance in primary immune thrombocytopenia[J].Autoimmunity,2016,49(7):486-495.

[9] Mahjoubi,Frouzandeh,Akbari F,etal.Multidrug resistance-associated protein 1 predicts relapse in iranian childhood acute lymphoblastic leukemia[J].Asian Pac J Cancer Prev,2012,13(5)：2285-2289.

[10] Van Der Deen M,De Vries EG,Timens W,etal.ATP-binding cassette(ABC)transporters in normal and pathological lung[J].Respir Res,2005,6:59.

[11] Cole SP.Targeting multidrug resistance protein 1(MRP1,ABCC1):past,present,and future[J].Ann Rev Pharmacol Toxicol，2014,54:95-117.

[12] He SM,Li R,Kanwar JR,etal.Structural and functional properties of human multidrug resistance protein 1(MRP1 /ABCC1)[J].Curr Med Chem,2011,18(3):439-481.

[13] Gordillo GM,Biswas A,Khanna S,etal.Multidrug resistance-associated protein-1(MRP-1)-dependent glutathione disulfide(GSSG)efflux as a critical survival factor for oxidant-enriched tumorigenic endothelial cells[J].J Biol Chem,2016,291(19):10089-10103.

[14] Lotsch D,Steiner E,Holzmann K,etal.Major vault protein supports glioblastoma survival and migration by upregulating the EGFR/PI3K signalling axis[J].Oncotarget,2013,4(11):1904-1918.

[15] Bhatia P,Masih S,Varma N,etal.High expression of lung resistance protein mRNA at diagnosis predicts poor early response to induction chemotherapy in childhood acute lymphoblastic leukemia[J].Asian Pac J Cancer Prev,2015,16(15):6663-6668.

[16] Filipts M.Mechanism of cancer:Multidrug resistance[J].Drug Discov Today,2004,1(2):229-234.

[17] Wang H,Jia XH,Chen JR,etal.Osthole shows the potential to overcome P-glycoprotein mediated multidrug resistance in human myelogenous leukemia K562/ADM cells by inhibiting the PI3K/Akt signaling pathway[J].Oncol Reports,2016,35(6):3659-3668.

[18] de Moraes AC,Maranho CK,Rauber GS,etal.Importance of detecting multidrug resistance proteins in acute leukemia prognosis and therapy[J].J Clin Lab Anal,2013,27:62-71.

[19] Thompson PA,Tam CS,O′Brien SM,etal.Fludarabine,cyclophosphamide,and rituximab treatment achieves long-term disease-free survival in IGHV-mutated chronic lymphocytic leukemia[J].Blood,2016,127(3):303-309.

[20] Tyler J,Curiel MD.MPH.Immunotherapy:A useful strategy to help combat multidrug resistance[J].Drug Resist Updat,2012,15(0):106-113.

[21] Walther W,Stein U,Fichtner I,etal.Mdr1 promoter-driven tumor necrosis factor-alpha expression for a chemotherapy-controllable combined in vivo gene therapy and chemotherapy of tumors[J].Cancer Gene Ther,2000,7:893-900.

[22] 賈慶瑞,葛祥花,隋金財.白細(xì)胞介素-2逆轉(zhuǎn)急性白血病細(xì)胞多藥耐藥的臨床研究[J].白血病·淋巴瘤,2003,12(1):28-30.

[23] 平寶紅,孟凡義.腫瘤多藥耐藥逆轉(zhuǎn)研究現(xiàn)狀[J].白血病,2000,9(5):314-316.

[24] Mizukoshi E,Nakagawa H,Kitahara M,etal.Phase I trial of multidrug resistance-associated protein 3-derived peptide in patients with hepatocellular carcinoma[J].Cancer Letters,2015,369(1):242-249.

[25] Kell J.The addition of gemtuzumab ozogamicin to chemotherapy in adult patients with acute myeloid leukemia[J].Expert Rev Anticancer Ther,2016,16(4):377-382.

[26] Kung Sutherland MS,Walter RB,Jeffrey SC,etal.SGNCD33A:a novel CD33-targeting antibody-drug conjugate using a pyrrolobenzodiazepie dimer is active in models of drug-resistant AML[J].Blood,2013,122(8):1455-1463.

[27] Chen J,Pan Y,He B,etal.Inhibition of CD147 expression by RNA interference reduces proliferation,invasion and increases chemosensitivity in cancer stem cell-like HT-29 cells[J].Int J Oncol,2015,47(4):1476-1484.

[28] Wang L,Deng Q,Wang J,etal.Effect of CIK on multidrug resistance reversal and increasing the sensitivity of ADR in K562/ADR cells[J].Oncol Lett,2014,8(4):1778-1782.

[29] 蘇榮英,宋盈盈,裴耀華,等.DC-CIK細(xì)胞對K562/ADR細(xì)胞多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用[J].廣東醫(yī)學(xué),201l,32(24):3164-3166.

[30] Patel NR,Rathi A,Mongayt D,etal.Reversal of multidrug resistance by co-delivery of tariquidar(XR9576)and paclitaxel using long-circulating liposomes[J].Int J Pharm,2011,416(1):296-299.

[31] 平超強(qiáng),張宇晶,孫國勛,等.DC-CIK 對K562/A多藥耐藥基因mdr1表達(dá)的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2014,14(14):2667-2671.

[32] Ke XY.Application of CAR-T cell immunotherapy in the treatment of hematological malignancy [J].Chin General Pract,2016,19(12):1361-1366.

[33] Maude SL,Frey N,Shaw PA,etal.Chimeric antigen receptor T cells for sustained remissions in leukemia[J].N Engl J Med,2014,371(16):1507-1517.

[34] Kenderian SS,Ruella M,Shestova O,etal.CD33-specific chimeric antigen receptor T cells exhibit potent preclinical activity against human acute myeloid leukemia[J].Leukemia,2015,29(8):1637-1647.

[35] Rafiq S,Dao T,Purdon T,etal.Engineering armored t cell receptor-mimic(TCRm)chimeric antigen receptor(CAR)T cells specific for the intracellular protein wilms tumor 1(WT1)for treatment of hematologic and solid malignancies [J].Molecular Therapy,2016,24(Supplement1):156.

[36] Koury LCA,Figueiredo-Pontes LL,Simoes BP,etal.The use of cyclosporine in association with chemotherapy as induction treatment in patients with acute myeloid leukemia(AML)and high rhodamine efflux at diagnosis results in higher complete hematological remission rates,but does not prolong overall survival[J].Blood,2015,126(23):4896-4896.

[收稿2017-05-16]

(編輯 張曉舟)

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.11.028

①本文受國家自然科學(xué)基金(31660112)資助。

R733.71

A

1000-484X(2017)11-1726-05

李燕鴻(1985年-)，男，碩士，助理研究員，主要從事血液腫瘤免疫相關(guān)研究。

及指導(dǎo)教師：張連生(1964年-)，男，碩士，教授，主任醫(yī)師，主要從事血液腫瘤細(xì)胞免疫治療相關(guān)研究。