霍雯蒲大力吳明娟王云鵬李強(qiáng)吳玨蓉陳林汪霞張建武

(1.川北醫(yī)學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)中心；2.川北醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)系；3.川北醫(yī)學(xué)院藥理教研室，四川 南充 637100)

法半夏對離體蟾蜍心功能的研究

霍雯蒲大力2吳明娟2王云鵬2李強(qiáng)2吳玨蓉2陳林2汪霞2張建武3△

(1.川北醫(yī)學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)中心；2.川北醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)系；3.川北醫(yī)學(xué)院藥理教研室，四川 南充 637100)

目的：觀察法半夏懸濁液對離體蟾蜍心臟的心率和心肌收縮力的影響。方法：根據(jù)斯氏蛙心插管的方法，用0.033 g·ml-1、0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的法半夏懸濁液對離體蟾蜍心臟灌流，采用BL-420生物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄心率和心肌收縮力的變化。結(jié)果：灌注0.033 g·ml-1的法半夏懸濁液對離體蟾蜍心的收縮力和心率影響不大；分別灌注0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的法半夏懸濁液，離體蟾蜍心收縮力明顯增強(qiáng)，心率減慢(P<0.05)。結(jié)論：法半夏可以增強(qiáng)離體蟾蜍心的收縮力，對其心率影響不大。

法半夏；離體蟾蜍心；心率；心肌收縮力

半夏的原植物為天南星科植物半夏Pinellia ternate (Thunb.) Berit，以塊莖入藥，性溫、味辛，由于生半夏具有一定的毒性，臨床上多以炮制品入藥。具有降逆止嘔、燥濕化痰、消痞散節(jié)的功效，用于痰飲喘咳、胸脘痞悶、惡心嘔吐、眩暈[1,2]。但目前未見有關(guān)半夏對兩棲類動物心功能影響的研究報道，故本實(shí)驗(yàn)研究法半夏對離體蛙心心率和心肌收縮力的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物

蟾蜍50只，雌、雄兼?zhèn)?，體重80-100 g(川北醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心)。

1.1.2 藥品

市售已炮制好的法半夏、任氏液。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

蛙類通用實(shí)驗(yàn)器械，肌張力換能器(四川成都泰盟公司)，電子天平(上海醫(yī)用激光儀器廠)，BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(四川成都泰盟公司)。

1.2 方法

1.2.1 法半夏溶液的配制

取法半夏80 g，加入蒸餾水，水煎60 min，過濾，取其懸濁液。再加入蒸餾水配制成80 g·200ml-1的溶液。再用任氏液與80 g·200ml-1的溶液分別配制出0.033 g·ml-1、0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的溶液。

1.2.2 離體蟾蜍心標(biāo)本的制備[3]

取一只蟾蜍，破壞腦和脊髓，背位固定于蛙板上暴露心臟，在左主動脈下穿一線，距動脈圓錐2～3 mm處結(jié)扎，再從左、右兩主動脈下方穿一線打一活結(jié)留作固定插管用。持眼科剪在動脈圓錐前端處向心臟剪一斜口，將盛有任氏液的蛙心插管由此口插人心室腔內(nèi)，連同近旁血管一起結(jié)扎固定，將心臟離體，用任氏液反復(fù)沖洗心室內(nèi)的余血至插管內(nèi)灌流液完全澄清無色，然后保持插管內(nèi)的液面高度約2 cm，劃線作標(biāo)記。

1.2.3 離體蛙心的心活動記錄[4]

將插好離體心臟的插管固定在支架上，用蛙心夾夾住心肌尖部肌肉。再將蛙心夾的絲線繞過滑輪然后與張力換能器相連，通過BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄心搏曲線。

1.2.4 分組及加藥

空白對照組：先在蛙心套管內(nèi)加入任氏液，待搏動穩(wěn)定后，記錄收縮曲線，以此作為空白對照組；法半夏不同劑量組：分別以0.033 g·ml-1、0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的CDI灌流心臟；維拉帕米組：滴加100 μL的維拉帕米。觀察加藥前后心肌收縮力和心率的變化。每組8只，每次加藥前后插管內(nèi)的總液面高度保持一致于2 cm處。

1.3 統(tǒng)計(jì)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

2 結(jié)果

由表1可知，離體蛙心加入維拉帕米后，心率減慢、心肌收縮力降低(P<0.05)，表明維拉帕米的負(fù)性心肌作用；灌注0.033 g·ml-1的法半夏懸濁液對離體蟾蜍心的收縮力和心率影響不大；分別灌注0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的法半夏懸濁液，離體蟾蜍心收縮力明顯增強(qiáng)，心率減慢(P<0.05)。

表1 法半夏對離體蟾蜍心心率和心肌收縮力的影響( ±SD，n=12)

注：與任氏液比較，*P<0.05。

3 討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：灌注0.033 g·ml-1的法半夏懸濁液對離體蟾蜍心的收縮力和心率影響不大；分別灌注0.067 g·ml-1、0.133 g·ml-1和0.267 g·ml-1的半夏懸濁液，離體蟾蜍心收縮力明顯增強(qiáng)，心率減慢，說明0.067～0.267 g·ml-1濃度范圍內(nèi)的法半夏對離體蛙心心率有負(fù)性作用、對心肌有正性肌力作用。

此外，維拉帕米可使心率和心肌收縮力降低，表現(xiàn)為負(fù)性心肌作用[5]，但是加入維拉帕米后再加入0.05 mg·ml-1的CDI，雖然心率變化不明顯，但是由于收縮幅度增高，說明心肌收縮力增強(qiáng)，表明CDI可以拮抗維拉帕米的負(fù)性作用。由此可證明CDI可能通過促進(jìn)鈣離子通道開放，增加鈣離子內(nèi)流而使心肌收縮力增強(qiáng)[6]。然而0.5 mg·ml-1的CDI降低心肌收縮力甚至使心臟停止搏動可能與其對離體蛙心心肌有一定的損傷作用有關(guān)。

1 肖培根. 半夏. 新編中藥志[M]. 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 2002, 372-378.

2 冉懋雄. 名貴中藥材綠色栽培技術(shù)[M]. 北京: 科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社, 2002, 12-13.

3 鄭倩,曹弟勇,劉紅,等. 醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 2009, 127-131.

4 沈裕,楊琨,易蓓,等.生魚膽汁對離體蟾蜍心臟功能的影響[J]. 四川生理科學(xué)雜志, 2013 35(1):14-15.

5 楊俊卿,凌保東,劉毅,等. 藥理學(xué)[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 2009, 61-62.

6 馬滿玲,劉艷,王玲,等. 膽堿對大鼠和家兔心臟M3受體作用實(shí)驗(yàn)研究[J]. 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2003, 37(4): 302-304.

Effects of rhizoma pinellinae praeparata on isolated frog hearts

Huo Wen1, Pu Da-li2, Wu Ming-juan2, Wang Yun-peng2,Li Qiang2, Wu Jue-rong2, Chen Lin2, Wang Xia2, Zhang Jian-wu3△

(1.Functional Experiment Center, North Sichuan Medical College;2.Department of Clinical Medicine, North Sichuan Medical College;3.Department of Pharmacology, North Sichuan Medical College, Sichuan Nanchong 637100)

Objective：To observe the effect of rhizoma pinellinae praeparata on heart rate and myocardial contractility of isolated frog heart. Methods: The Steinmann′s frog heart perfusion method was used to perfuse the isolated frog heart with different concentrations (0.033 g·ml-1, 0.067 g·ml-1, 0.133 g·ml-1and 0.267 g·ml-1) of rhizoma pinellinae praeparata, then the changes of heart rate and myocardial contractility were recorded by the BL-420E biological function experiment system. Results: Perfusion with 0.033 g·ml-1rhizoma pinellinae praeparata suspension had little effect on isolated toad heart contractility and heart rate. But perfusion with 0.067 g·ml-1, 0.133 g·ml-1and 0.267 g·ml-1rhizoma pinellinae praeparata suspension significantly increased cardiac contractility, and decreased heart rate, respectively. Conclusion: Rhizoma pinellinae praeparata can enhance the isolated toad heart contractility, has little effect on heart rate.

Rhizoma pinellinae praeparata; Isolated toad heart; Heart; Myocardial contractility

霍雯，女，助教，主要從事機(jī)能實(shí)驗(yàn)教學(xué)和科研工作，Email：274423454@qq.com。

△通訊作者：張建武，男，副教授，主要從事心腦血管疾病和抗腫瘤方面研究，Email：546815404@qq.com。

2016-9-20)