劉新

感染性疾病甲肝、戊肝的免疫學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量相關(guān)探討

劉新

目的通過免疫學(xué)檢驗(yàn)抗原與抗體反應(yīng)的原理，探討感染性甲肝、戊肝的免疫學(xué)檢驗(yàn)效果。方法選取已確診甲肝、戊肝患者各18例，采用兩種方法檢測，對照組采用膠體金法檢測，實(shí)驗(yàn)組采用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行檢測。結(jié)果從選擇的18例確診患者中，通過酶聯(lián)免疫法檢測得出HAV-IgM呈陽性的人數(shù)，即甲肝檢出人數(shù)為12例，檢出率為66．7%；HEV-IgM呈陽性的人數(shù)，即戊肝檢出人數(shù)為10例，檢出率為55．6%；采用膠體金法檢測得出HAV-IgM呈陽性的人數(shù)，即甲肝檢出人數(shù)為9例，檢出率為50．0%；HEV-IgM呈陽性的人數(shù)，即戊肝檢出人數(shù)為6例，檢出率為33．3%。對照組檢測的準(zhǔn)確率低于實(shí)驗(yàn)組的準(zhǔn)確率，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論在感染性疾病甲肝和戊肝的檢驗(yàn)過程中，酶聯(lián)免疫法檢測準(zhǔn)確率高于膠體金法。

甲肝；戊肝；免疫學(xué)檢測

我國是肝炎高發(fā)國家[1]，目前，很多地區(qū)已將甲肝、戊肝作為常規(guī)檢查項(xiàng)目，對從業(yè)人員定期進(jìn)行檢查，特別是食品行業(yè)或飲食行業(yè)。甲肝和戊肝都是由糞口途徑傳播，易造成暴發(fā)性流行，因此，采用免疫學(xué)檢查對甲肝和戊肝進(jìn)行早期診斷并及時治療有很重要的意義[2]。

1 甲肝、戊肝的免疫學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量比較

1.1 調(diào)查對象

選取2015年7月- 2016年7月某公司從業(yè)人員共8 534人，其中，男性5 217人，女性3 317人進(jìn)行體檢，已經(jīng)確診甲肝、戊肝患者各18例，年齡23～45歲，平均年齡（31.8±6.5）歲，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。將患者用兩種方法進(jìn)行檢測，分為對照組和實(shí)驗(yàn)組，對照組采用膠體金法檢測，實(shí)驗(yàn)組采用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行檢測，對比兩種方法檢測結(jié)果準(zhǔn)確率。

1.2 試劑與材料

甲型肝炎病毒lgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法，北京科衛(wèi)診斷科技有限公司）、戊型肝炎病毒lgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法，北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司）；甲型肝炎病毒lgM抗體檢測試劑盒（膠體金法，北京萬泰生物藥業(yè)有限公司）、戊型肝炎病毒lgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法，北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司）。

1.3 方法

酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測：清晨空腹抽取待檢者靜脈血，將血液進(jìn)行3 500轉(zhuǎn)/分的速度離心10 min，分離血清，以抗人IgM抗體作為固相抗體，將血清樣本加入，IgM抗體可被固相抗體捕捉，37℃孵育30min后洗滌，將未結(jié)合的抗體洗去，得到被結(jié)合的抗體，再用Ag-酶標(biāo)記的復(fù)合物與被捕獲的IgM抗體相結(jié)合，37℃孵育30 min后洗滌，得到被結(jié)合的抗體，加入底物進(jìn)行顯色反應(yīng)，再加入終止液結(jié)束反應(yīng)，并測定OD值，從而得到標(biāo)本中的HAVIgM和HEV-IgM抗體。測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶。男性谷丙轉(zhuǎn)氨酶小于41 U/L，女性谷丙轉(zhuǎn)氨酶小于31 U/L為正常。

膠體金法檢測[3]：采用膠體金試紙快速測定，其操作方法和原理是將特異的抗體先固定于酸類纖維素膜的某一區(qū)帶，當(dāng)該干燥的酸類纖維素一端浸入血清樣品后，樣品將沿著該膜向前移動，當(dāng)移動至固定有抗體的區(qū)域時，樣品中相應(yīng)的抗原即與該抗體發(fā)生特異性結(jié)合。同時利用金粒具有高電子密度的特性，在金標(biāo)蛋白結(jié)合處進(jìn)行標(biāo)記。當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時，肉眼可見紅色的斑點(diǎn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將所測的數(shù)據(jù)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPASS 18.0進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

從選擇的18例確診患者中，通過酶聯(lián)免疫法檢測得出HAV-IgM呈陽性的人數(shù)，即甲肝檢出人數(shù)為12例，檢出率為66.7%；HEV-IgM呈陽性的人數(shù)，即戊肝檢出人數(shù)為10例，檢出率為55.6%；采用膠體金法檢測得出HAV-IgM呈陽性的人數(shù)，即甲肝檢出人數(shù)為9例，檢出率為50.0%；HEV-IgM呈陽性的人數(shù)，即戊肝檢出人數(shù)為6例，檢出率為33.3%。對照組檢測的準(zhǔn)確率低于實(shí)驗(yàn)組的準(zhǔn)確率，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

免疫學(xué)檢驗(yàn)是通過抗原與抗體反應(yīng)的原理，用各種物質(zhì)，如酶、熒光物質(zhì)、放射線同位素等具有識別的物質(zhì)進(jìn)行標(biāo)記，追蹤，通過特異性的分析檢測出各種生理與病理的免疫學(xué)指標(biāo)，進(jìn)行診斷，評價治療療效[4]。為避免暴發(fā)性大流行，采用免疫學(xué)檢查早期診斷具有相當(dāng)重要的診斷意義。

甲型和戊型肝炎主要的傳播途徑是食物、水、糞口、日常接觸、院內(nèi)感染。食物傳播主要是因?yàn)槭秤蒙摹⑽醇庸さ氖澄?，而人們在食用過程中未發(fā)現(xiàn)其食用的水產(chǎn)品被污染，因此造成感染[5]。同樣，人們在食用了未經(jīng)消毒的水，其中水源被污染，導(dǎo)致肝炎暴發(fā)[6]。日常接觸傳播方式主要是人與人的親密接觸，不注意個人衛(wèi)生，往往共同使用器具、用品等，一人得病，導(dǎo)致其他人員均被傳染，尤其注意的是人多聚集的地方，比如工地、醫(yī)院、幼兒園、部隊(duì)或?qū)W生寢室等，常易引起肝炎的暴發(fā)[7-8]。

[1] 陳鳳仙． 感染性疾病甲肝、戊肝的免疫學(xué)檢驗(yàn)[J]． 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2015，15（69）：40-41．

[2] 許斌，朱虎定． ELISA檢測HBsAg影響因素的探討[J]． 臨床檢驗(yàn)雜志，2001，18（4）：232．

[3] 曲萌． 膠體金免疫層析法同步檢測甲、戊型肝炎特異性抗體的實(shí)驗(yàn)研究[D]． 吉林：北華大學(xué)，2001．

[4] 李海俠，裘宇容，楊佳． 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)精品課程建設(shè)的探索與實(shí)踐[J]． 中華醫(yī)學(xué)教育探索雜志，2010，9（1）：51-53．

[5] 哈魯虹． 感染性疾病甲肝、乙肝的免疫學(xué)檢驗(yàn)[J]． 中外健康文摘，2010，7（21）：107-108．

[6] 葛馨． 免疫學(xué)檢驗(yàn)感染性疾病甲肝乙肝的臨床體會[J]． 中國保健營養(yǎng)，2016，26（6）：368．

[7] 李尚琴，崔吉茂，何莉，等． 2010-2012年達(dá)州市從業(yè)人員健康體檢甲肝、戊肝、ALT檢測結(jié)果分析[J]． 大家健康，2014，7（4）：29-30．

[8] 于利英，王瑛，金學(xué)燕，等． 2010年-2013年吳興區(qū)從業(yè)人員甲肝和戊肝病毒感染結(jié)果分析[J]． 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2015，25（5）：728-730．

To Investigate the Immunological Test Quality Related Infectious Diseases, Hepatitis A and E

LIU Xin Department of Clinical Laboratory, The Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, Changchun Jilin 130021, China

ObjectiveTo study the immunological test results of hepatitis A and hepatitis E in China by analyzing the principle of antigenantibody reaction in immunocompetent countries.Methods18 patients with confirmed hepatitis A and E were detected by two methods. The control group was detected by enzyme-linked immunosorbent assay. The experimental group was detected by colloidal gold method, and the accuracy of the two methods was compared.ResultsFrom 18 cases were selected, by enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of the HAV-IgM positive number, which was a positive number for 12 cases, the detection rate was 66.7%; HEV-IgM positive number, the number of 10 cases of hepatitis E were detected, the detection rate was 55.6%; detected by colloidal gold method was positive for HAV-IgM the number is a positive number for 9 cases, the detection rate was 50.0%; HEV-IgM positive number, the number of 6 cases of hepatitis E were detected, the detection rate was 33.3%. The accuracy rate of the control group was lower than that of the experimental group, and the difference was statistically significant.ConclusionThe detection accuracy of colloidal gold method is higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in the detection of hepatitis A and hepatitis E in infectious diseases.

hepatitis A; hepatitis E; immunological detection

R446．1

A

1674-9316（2017）01-0106-02

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．01．070

長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 長春 130021