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實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物化療性靜脈炎研究進(jìn)展

馬榮華，惠薏，張琪，劉曉梅

就實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物化療性靜脈炎(CP)研究進(jìn)行綜述，指出CP研究主要集中于護(hù)理措施臨床效果觀察或誘發(fā)因素分析，有關(guān)CP形成機(jī)制研究甚少，缺乏對(duì)防護(hù)機(jī)制的基礎(chǔ)性研究，可通過(guò)實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)研究從細(xì)胞分子學(xué)水平探索常用化療藥所致CP的形成機(jī)制，探尋CP防護(hù)新思路。

化療性靜脈炎；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；化療藥物；干預(yù)機(jī)制；誘發(fā)因素

化療性靜脈炎(chemotherapeuticphlebitis，CP)指由于化療藥物強(qiáng)刺激性和細(xì)胞毒性作用等因素導(dǎo)致穿刺局部血管壁發(fā)生化學(xué)炎性反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)病人可出現(xiàn)潰瘍、硬結(jié)，甚至壞死、功能障礙，給病人帶來(lái)巨大痛苦，影響化療方案的實(shí)施，增加醫(yī)療費(fèi)用。目前有關(guān)CP的護(hù)理研究主要集中于各措施臨床防護(hù)效果觀察或誘發(fā)因素分析，有關(guān)CP的形成機(jī)制研究甚少，缺乏具體干預(yù)機(jī)制的基礎(chǔ)性研究。現(xiàn)就實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物CP研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，旨在為CP形成機(jī)制及防護(hù)研究提供可借鑒之處，為改進(jìn)臨床護(hù)理措施提供基礎(chǔ)理論支持。

1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

1.1 建立兔耳緣靜脈CP模型 兔子耳大較平坦，皮膚菲薄，耳緣靜脈清晰可見，有利于觀察給藥反應(yīng)，除了疼痛指標(biāo)無(wú)法評(píng)估外，CP癥狀均可呈現(xiàn)。且兔耳相對(duì)平坦，有利于藥物涂抹、濕敷、貼服等各種臨床常用護(hù)理措施的實(shí)施，常被作為CP動(dòng)物模型之首選。國(guó)內(nèi)學(xué)者[1-6]先后通過(guò)兔耳緣靜脈單次推注長(zhǎng)春瑞濱注射液，分別于用藥后48 h、72 h、7 d形成穩(wěn)定的CP模型。章飛飛[7]向兔耳緣靜脈單次輸注長(zhǎng)春新堿48 h后建立CP模型。各品種兔耳緣靜脈普遍較細(xì)，對(duì)靜脈穿刺技術(shù)要求較高，一旦穿刺失敗或藥物外滲可致局部組織壞死被迫剔除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，增加樣本量與實(shí)驗(yàn)費(fèi)用。兔耳緣靜脈較細(xì)，模仿臨床反復(fù)給藥存在一定難度，顯著制約著實(shí)驗(yàn)觀察時(shí)限，現(xiàn)有研究觀察時(shí)限也僅7 d[4]。如需模擬臨床給藥方案，反復(fù)多次給藥以探索CP形成機(jī)制變化及具體干預(yù)機(jī)制則存在一定難度。

1.2 小鼠尾靜脈CP模型 小鼠尾靜脈較兔耳緣靜脈粗、長(zhǎng)、直、表淺、被毛少，穿刺難度小，適宜反復(fù)多次靜脈給藥，便于實(shí)驗(yàn)觀察。小鼠個(gè)體小，易固定，繁殖能力強(qiáng)，可成批獲得，有利于控制體重、年齡等影響因素，且飼養(yǎng)方便,便于擴(kuò)大樣本量。國(guó)內(nèi)學(xué)者利用小鼠尾靜脈先后建立5-氟尿嘧啶、長(zhǎng)春瑞濱、吡柔比星致CP動(dòng)物模型[8-11]。馬麗娟等[12]進(jìn)一步優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，模擬臨床反復(fù)多次給藥方案成功建立長(zhǎng)春瑞濱致小鼠尾靜脈CP動(dòng)物模型。

目前以小鼠尾靜脈建立CP動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)方法較為成熟，其研究領(lǐng)域重點(diǎn)集中于腫瘤學(xué)、藥物學(xué)等基礎(chǔ)學(xué)科。但由于小鼠重量小，給藥劑量少，臨床用微量輸液泵難以實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的流速控制，需借助精密的流速控制器控制給藥速度，且小鼠重量小，對(duì)化療藥物十分敏感,穿刺等輕微刺激即可致小鼠全身肌肉緊張、尾巴強(qiáng)直、煩躁不安、尖叫亂動(dòng)致穿刺失敗[13]。此外，小鼠尾巴成圓錐樣，臨床常用CP防護(hù)措施如熱敷、冷敷、敷貼外用等護(hù)理措施執(zhí)行困難，制約著小鼠尾靜脈CP模型在護(hù)理實(shí)驗(yàn)研究領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。

2 建模藥物

基于化療藥物的強(qiáng)刺激性與血管毒性作用，大多數(shù)化療藥物均可導(dǎo)致CP形成，CP建模藥物選取主要取決于具體研究目的。目前關(guān)于長(zhǎng)春瑞濱致CP研究最為多見，其次有長(zhǎng)春新堿、紫杉醇、吡柔比星、5-氟尿嘧啶等所致CP。所有研究均可獲取良好CP模型。由于長(zhǎng)春瑞濱具有強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性作用與發(fā)皰性能，CP發(fā)生率高達(dá)10%～30%[14]，是臨床常用化療藥，用途廣、效果好、價(jià)格低廉，因此常被作為CP研究的代表性藥物。目前關(guān)于各類化療藥致CP的形成及干預(yù)機(jī)制研究甚少，長(zhǎng)春瑞濱致CP與其他化療藥致CP作用機(jī)制是否一致尚不明確，長(zhǎng)春瑞濱致CP的防護(hù)措施對(duì)其他類化療藥致CP是否具有防護(hù)作用，仍有待探索。

3 給藥方式

現(xiàn)有研究中偶見反復(fù)多次靜脈用藥，多采用單次靜脈給藥建立CP模型，且給藥速度、濃度、劑量及持續(xù)時(shí)間尚無(wú)定論。姚遠(yuǎn)兵等[3]以濃度10 mg/mL、速度12 mL/h向小鼠尾靜脈輸注長(zhǎng)春瑞濱24 h后形成良好CP模型。王紅等[1]依據(jù)人體給藥劑量25 mg/m2于48 h后建立長(zhǎng)春瑞濱致家兔耳緣靜脈CP模型。楊文琴等[15]以給藥劑量12 mg/(kg·d)、給藥容量12 mL/(kg·d)向兔耳緣靜脈輸注5-氟尿嘧啶72 h可100%形成CP。張蕻等[16]以15 mg/mL給藥濃度建立了5-氟尿嘧啶致小鼠尾靜脈CP模型，建模成功率100%，當(dāng)濃度增至17.5 mg/mL時(shí)出現(xiàn)動(dòng)物死亡現(xiàn)象。高文等[9]以20 mg/kg向兔耳緣靜脈輸注長(zhǎng)春新堿48 h后建立CP模型，且無(wú)動(dòng)物死亡。Emiko等[17]研究顯示：快速輸注、稀釋濃度可有效緩解長(zhǎng)春瑞濱致CP的嚴(yán)重程度，降低發(fā)生率。Yoh等[14]臨床研究認(rèn)為快速輸注及給藥后生理鹽水沖管可有效降低長(zhǎng)春瑞濱致CP的發(fā)生率。

4 研究指標(biāo)

4.1 局部組織病理觀察 組織病理觀察方法成熟，操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)直觀，常被作為CP實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)性觀察指標(biāo)?？蓮难軆?nèi)皮細(xì)胞損傷、血管周圍水腫、炎細(xì)胞浸潤(rùn)、靜脈管壁損傷、纖維組織增生、周圍組織出血、血栓形成7個(gè)方面評(píng)估靜脈炎損傷程度[8]。長(zhǎng)春瑞濱可致炎細(xì)胞浸潤(rùn)、組織水腫、表皮組織變性，未見明顯的血管內(nèi)皮細(xì)胞脫落，阿霉素可致明顯的血管內(nèi)皮細(xì)胞脫落、壞死，地塞米松預(yù)處理可有效降低長(zhǎng)春瑞濱致CP的發(fā)生率，而且快速靜脈輸注長(zhǎng)春瑞濱可有效減輕穿刺導(dǎo)管遠(yuǎn)端組織水腫程度，稀釋給藥濃度可明顯減輕穿刺導(dǎo)管近端上皮組織退行性變[17]。

4.2 細(xì)胞間黏附分子1和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 細(xì)胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1，ICAM-1) 是介導(dǎo)細(xì)胞間或細(xì)胞外基質(zhì)相互作用的一類糖蛋白，主要存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞中，正常情況下呈低表達(dá)或不表達(dá)，當(dāng)刺激、感染等因素導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞受損時(shí)呈高表達(dá)，參與血小板聚集、白細(xì)胞粘附、穿越和血栓形成，其表達(dá)量與內(nèi)皮細(xì)胞損傷程度、炎癥程度和血栓形成[18]密切相關(guān)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是一種多功能細(xì)胞因子，既可特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞[19]，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)降解，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞移行、遷移,促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖，利于血管修復(fù)[20]，又是一種血管通透性因子，增加血管通透性，增加滲出[21]。國(guó)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)ICAM-1在抗生素致輸液性靜脈炎的形成中發(fā)揮重要作用[22-23]。國(guó)內(nèi)研究認(rèn)為馬鈴薯汁聯(lián)合地塞米松外涂可有效抑制血管損傷早期局部ICAM-1與VEGF表達(dá)，防護(hù)5-氟尿嘧啶、長(zhǎng)春瑞濱致CP[4,15,17]。水膠體透明貼外敷可通過(guò)抑制損傷血管局部ICAM-1和VEGF表達(dá)，抑制白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附，減輕血管通透性，減輕甘露醇致輸液性靜脈炎的癥狀[24]。 延胡索合劑可抑制血管損傷局部ICAM-1表達(dá)，上調(diào)VEGF表達(dá)，減輕炎癥反應(yīng)，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生修復(fù)，防治CP的發(fā)生[25]。

4.3 E-選擇素 E-選擇素是一種特異性表達(dá)在活化內(nèi)皮細(xì)胞膜上的粘附分子，在白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附、向炎癥部位游走和腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。炎癥時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞表面E-選擇素可介導(dǎo)中性粒細(xì)胞沿血管壁滾動(dòng)[26]。腫瘤壞死因子α(TNF-α)，白介素、熱刺激等均可誘導(dǎo)E-選擇素高表達(dá)[27]。Edelstein等[28]發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞受刺激后，E-選擇素呈現(xiàn)快速而短暫的高表達(dá)，4 h達(dá)高峰，24 h后從胞膜上開始脫落進(jìn)入血液，成為可溶性E-選擇素。日本學(xué)者Kobayshi等[29]動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)西咪替丁可通過(guò)下調(diào)E-選擇素表達(dá)抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。Vassilomanolakis等[30]通過(guò)臨床研究發(fā)現(xiàn)西咪替丁可有效預(yù)防長(zhǎng)春瑞濱致CP。國(guó)內(nèi)學(xué)者柴琴等[31]也再次驗(yàn)證了這一臨床效果。研究證實(shí)長(zhǎng)春瑞濱輸注5 h后E-選擇素顯著升高，而E-選擇素基因敲除小鼠則表現(xiàn)出明顯的炎癥反應(yīng)缺陷，再次表明E-選擇素與長(zhǎng)春瑞濱致CP的形成密切相關(guān)[32]。后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)春瑞濱可通過(guò)激活核轉(zhuǎn)錄因子-kB(NF-kB)通路，啟動(dòng)E-選擇素基因表達(dá)，啟動(dòng)炎癥反應(yīng)，西咪替丁預(yù)處理可有效抑制E-選擇素表達(dá)，干預(yù)長(zhǎng)春瑞濱致CP形成[33]。

4.4 腫瘤壞死因子 腫瘤壞死因子α(tumor necrosisi factor α，TNF-α)是一種由單核巨噬細(xì)胞分泌的炎性介質(zhì)，在細(xì)菌感染、腫瘤等病理狀態(tài)下呈高表達(dá)，可損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，改變內(nèi)皮細(xì)胞基因表達(dá)，激活內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生多種炎性介質(zhì)，增加內(nèi)皮細(xì)胞表面血栓形成能力，促進(jìn)中性粒細(xì)胞聚集，釋放蛋白溶解酶，導(dǎo)致炎癥、細(xì)胞壞死、新生血管形成，并可促進(jìn)內(nèi)皮素-1高表達(dá)，損傷血管壁[34]。有研究顯示長(zhǎng)春瑞濱輸注后局部組織中腫瘤壞死因子α表達(dá)逐漸升高，48 h后其表達(dá)呈下降趨勢(shì)[1,35]，但相關(guān)研究較少。

5 小結(jié)

目前，關(guān)于CP研究主要集中于各護(hù)理措施臨床效果觀察或誘發(fā)因素分析，有關(guān)CP形成機(jī)制研究甚少，缺乏對(duì)干預(yù)機(jī)制的基礎(chǔ)性研究。有關(guān)E-選擇素、腫瘤壞死因子α在CP領(lǐng)域的研究尚處于實(shí)驗(yàn)室探索階段，可通過(guò)實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)研究從細(xì)胞分析學(xué)水平探索常用化療藥所致CP的形成機(jī)制，探尋CP防護(hù)新思路，明確各種常見護(hù)理措施的干預(yù)機(jī)制，為臨床護(hù)理措施改進(jìn)提供實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)理論支持。

[1] 王紅,吳婷婷,盧慧芳.長(zhǎng)春瑞濱化療性靜脈炎動(dòng)物模型的建立[J].護(hù)理學(xué)雜志,2014,29(17):19-21.

[2] 宋向陽(yáng),李武平,王宇,等.兔耳緣靜脈化療性靜脈炎動(dòng)物模型建構(gòu)初探[J].護(hù)理研究,2006,20(12A)：3123-3125.

[3] 姚遠(yuǎn)兵,王卓,金桂蘭,等.長(zhǎng)春瑞濱致輸液性靜脈炎動(dòng)物模型的建立[J].中國(guó)藥房,2009,20(4):263-265.

[4] 張小來(lái),葉希平,陳曉蓉,等.熱敷法預(yù)防家兔化療性靜脈炎效果觀察及機(jī)制探討[J].山東醫(yī)藥,2013,53(22)：22-25.

[5] 謝麗微,杜樂(lè)燕,蘇銀法.馬鈴薯外敷對(duì)長(zhǎng)春瑞濱輸液性靜脈炎ICAM-1和VEGF表達(dá)的影響[J].溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2012,42(5):458-460.

[6] 單珍珠,周留勇,尤建良,等.復(fù)脈膏外敷的安全性及對(duì)兔耳緣化療性靜脈炎的影響[J].河北中醫(yī),2015,37(10):1515-1518.

[7] 章飛飛.化療性靜脈炎動(dòng)物模型的建立及給藥方式對(duì)化療性靜脈炎影響的研究[D].南寧:廣西醫(yī)科大學(xué),2010:1.

[8] 楊芳,楊喜花,閻磊,等.丹七散瘀搽劑對(duì)化療性靜脈炎動(dòng)物模型的療效研究[J].中國(guó)藥物與臨床,2012,12(9)：1148-1149.

[9] 高文,韋義萍.金黃膏對(duì)防治化療性靜脈炎動(dòng)物模型的效果研究[J].護(hù)理研究,2011,25(4C)：1120-1121.

[10] 楊晉田,劉麗坤,王晞星,等.復(fù)方藤芷膏治療小鼠化療性靜脈炎的實(shí)驗(yàn)研究[J].護(hù)理研究,2014,28(1C)：286-287.

[11] 孫甜甜,王華慶.延胡索合劑(YHS-1)對(duì)吡柔比星外滲性損傷及靜脈炎防治及機(jī)制研究[D].天津:天津醫(yī)科大學(xué),2012:1.

[12] 馬麗娟,王卓,胡晉紅.西咪替丁對(duì)長(zhǎng)春瑞濱所致化療性靜脈炎的防治作用[J].藥物服務(wù)與研究,2009,9(5)：340-343.

[13] 梁月琴,楊波.大鼠、小鼠給藥及采血的幾點(diǎn)體會(huì)[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2000,31(1)：92-93.

[14] Yoh K,Niho S,Goto K,etal.Randomized trial of drip infusion versus bolus injection of vinorelbine for the control of local venous toxicity[J].Lung Cancer,2007,55(3):337-341.

[15] 楊文琴,王晉芬,李瑞萍.馬鈴薯汁加地塞米松預(yù)防氟尿嘧啶致靜脈炎的實(shí)驗(yàn)觀察及機(jī)制研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2010,10(10)：1860-1866.

[16] 張蕻,泰剛,閆磊,等.化療性靜脈炎小鼠模型的建立[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué),2010,27(5):5-8.

[17] Emiko Kohno,Saori Murase,Mayumi Nishikata,etal.Methods of preventing vinorelbine-induced phlebitis:an experimental study in rabbits[J].International Journal of Medical Sciences,2008,5:218-223.

[18] Zhang ZX,Wang P,Zhang QS,etal.Effects of anisodamine on the expressions of vascular endothelial growth factor and intercellular adhesion molecule 1 in experimental infusion phlebitis[J].Chin Med J (Engl),2012,125(2):300-305.

[19] Ambati J,Ambati BK,Yoo SH,etal.Age-related macular degeneration:etiology,pathogenesis,and therapeutic strategies[J].Surv Ophthalmol,2003,48(3):257-293.

[20] Witmer AN,Blaauwgeers HG,Weich HA,etal.Altered expression patterns of VEGF receptors in human diabetic retina and in experimental VEGF-induced retinopathy in monkey[J].Invest Ophthalmol Vis Sci,2002,43(3):849-857.

[21] Kazemi S,Enzel D,Kolossov E,etal.Differential role of bFGF and VEGF for vasculogenesis[J].Cell Physiol Biochem,2002,12(2/3):55-62.

[22] Lanbeck P’Odenholt I,Riesbeck K.Dicloxacillin and erythromycin at high concentration in crease ICAM-1 expression by endotherlial cells:a possible factor in the pathogenesis of infusion phlebitis[J].Antimicrob Chemother,2004,53(2):174-179.

[23] Kilic B,Kruse M,Stahlmann R.The in vitro effects of quinupristin /dalfopristin,erythomycin and levofloxoxacin at low concentration on the expression of different cell adhesion molecules on the surface of endothelial cells[J].Toxicology,2006,218(1):30-38.

[24] 寧寧,楊小春,陳海霞,等.康惠爾增強(qiáng)型透明貼防治靜脈炎的作用機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究[J].護(hù)理研究,2007,21(3A)：592-594.

[25] 馮莉霞,王華慶,賀瑾,延胡索合劑預(yù)防和治療腫瘤化療性靜脈炎的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)腫瘤臨床,2012,39(15)：1073-1076.

[26] Bevilacqua MP,Stengelin S,Gimbrone MAJr,etal.Endothelial leukocyte adhesion molecule 1：all inducible receptor for neutrophils related to complement regulatory proteins and loctins[J].Science,1989,243(4895):1160-1165．

[27] Christenson LK,Stouffer RL．Isolation and culture of microvascular endothelial cells from the primate corpus luteum[J].Biol Reprod,1996,55(6):1397-1404．

[28] Edelstein LC,Pan A,Collins T.Chromatin modification and the endothelial -specific activation of the E-selectin gene[J].J Biol Chem,2005,280(12)：1192-1202．

[29] Kobayshi K,Matsumoto S,Morishina T,etal.Chetidine inhibits cancer celladhesion to endotllelial cells and prevents metastasis by blocking E-selectin expression[J].Cancer Res,2000,60(14):3978-3984.

[30] Vassilomanolakis M,Koumakis G,Barbounis V,etal.Prevention of vinorelbine phlebitis with cimetidine.A two-step design study [J].Support Care Cancer,2001,9(2):108-111．

[31] 柴琴,安東建．西咪替丁對(duì)長(zhǎng)春瑞濱所致靜脈炎的預(yù)防[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2004,4(12)：2011-2012．

[32] 馬麗娟.長(zhǎng)春瑞濱致小鼠輸液性靜脈炎模型建立及藥物干預(yù)研究[D].上海:第二軍醫(yī)大學(xué),2009:1.

[33] Wang Zhuo,Ma Lijuan,Wang Xuebin,etal.Cimetidine attenuates vinorelbine -induced phlebitis in mice by militating E-selection expression[J].Cancer Chemother Pharmacol,2014,74:239-247.

[34] 楊名,趙揚(yáng),陳廣潔.TNF-α調(diào)節(jié)Treg細(xì)胞增殖與功能的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代免疫學(xué),2013,33(6):505-509.

[35] 陳桂園,姜麗萍,黃利全,等.靜脈炎動(dòng)物模型的建立及TNF-α、ICAM-1的表達(dá)[J].護(hù)理學(xué)雜志,2014,29(8)：6-9.

2016-07-16；

2017-09-05)

(本文編輯 崔曉芳)

Researchprogressonlaboratoryanimalchemotherapyphlebitis

MaRonghua,HuiYi,ZhangQi,etal

(Suzhou Vocational Health College,Jiangsu 215009 China)

R47

A

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.35.003

1009-6493(2017)35-4459-04

蘇州市科技局指導(dǎo)課題資助項(xiàng)目項(xiàng)目，編號(hào)：SYSD2015067；江蘇省高等學(xué)校大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目資助，編號(hào)：201512688016X；蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院解剖學(xué)優(yōu)秀教學(xué)團(tuán)隊(duì)。

馬榮華，講師，主管護(hù)師，碩士研究生，單位：215009，蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院；惠薏、張琪、劉曉梅(通訊作者)單位：215009，蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院。

信息馬榮華，惠薏，張琪，等.實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物化療性靜脈炎研究進(jìn)展[J].護(hù)理研究，2017，31(35)：4459-4462.