賴媚媚， 周秋菊， 樓韻燕， 郭彬瀚， 王慧燕， 鄭曉群△

(1溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院、附屬育英兒童醫(yī)院檢驗科，浙江 溫州325027； 2溫州醫(yī)科大學(xué)檢驗醫(yī)學(xué)院， 檢驗醫(yī)學(xué)教育部重點實驗室，浙江 溫州325035)

HCMV感染對人THP-1細胞HLA-G及其受體表達的影響*

賴媚媚1, 2， 周秋菊1, 2， 樓韻燕1, 2， 郭彬瀚1, 2， 王慧燕1, 2， 鄭曉群1, 2△

(1溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院、附屬育英兒童醫(yī)院檢驗科，浙江 溫州325027；2溫州醫(yī)科大學(xué)檢驗醫(yī)學(xué)院， 檢驗醫(yī)學(xué)教育部重點實驗室，浙江 溫州325035)

目的： 研究人巨細胞病毒(HCMV)感染對人THP-1細胞人類白細胞抗原G(HLA-G)異構(gòu)體及其受體表達的影響，探討HLA-G在HCMV逃逸宿主免疫應(yīng)答中的作用。方法: HCMV Towne株感染THP-1細胞后，采用RT-PCR和Western blot 檢測HLA-G異構(gòu)體mRNA和蛋白水平，流式細胞術(shù)檢測THP-1細胞HLA-G及其表面受體ILT2、ILT4的表達，ELISA檢測細胞培養(yǎng)上清中IL-10及可溶性HLA-G(sHLA-G)水平，同時檢測細胞存活率。結(jié)果: HCMV感染后細胞未出現(xiàn)明顯凋亡，細胞存活率高。 HCMV感染THP-1細胞1 d后HLA-G1、-G3、-G4和-G5的mRNA表達明顯上調(diào)，HLA-G1和HLA-G5的蛋白表達明顯上調(diào)。THP-1 細胞HLA-G、ILT2和ILT4的表達在感染1 d后明顯上調(diào)。 sHLA-G水平在感染1 d后顯著升高，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。THP-1細胞培養(yǎng)上清液IL-10水平在感染1 d后明顯上調(diào)，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論: HCMV感染THP-1細胞能誘導(dǎo)HLA-G異構(gòu)體的差異表達，以HLA-G1和HLA-G5為主，且上調(diào)其表面受體ILT2/ILT4的表達。同時，HCMV感染能誘導(dǎo)THP-1細胞分泌IL-10。該研究為進一步探討HCMV逃避機體免疫應(yīng)答的機制提供實驗依據(jù)。

人巨細胞病毒； 人類白細胞抗原G； 抑制性受體； 感染

人巨細胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)屬于皰疹病毒科β亞科的DNA病毒，是一種機會性病原體[1-2]。病毒感染后，機體快速啟動的固有免疫和獲得性免疫能有效地清除病毒。但HCMV形成了多種機制來逃避機體免疫系統(tǒng)的監(jiān)視和防御，并在體內(nèi)長期潛伏[3-4]，如抑制NK細胞殺傷功能、編碼細胞因子和趨化因子的類似物、干擾MHCⅠ類分子的功能和調(diào)節(jié)MHCⅡ類分子的表達等。

人類白細胞抗原G(human leukocyte antigen-G，HLA-G)屬于非經(jīng)典HLA-I類分子，是體內(nèi)一種重要的免疫耐受分子。初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)選擇性剪接，產(chǎn)生7種異構(gòu)體，即膜結(jié)合型分子(HLA-G1、-G2、-G3、-G4)和可溶型分子(HLA-G5、-G6、-G7)。其主要通過與多種免疫細胞表達的特異性受體(ILT2/CD85j、ILT4/CD85d、KIR2DL4/CD158d)結(jié)合發(fā)揮免疫抑制作用，包括抑制CD4+T細胞的增殖和樹突狀細胞的抗原提呈，抑制NK細胞和CTL細胞的殺傷功能，刺激抗原提呈細胞分泌TGF-β、IL-10等細胞因子，上調(diào)抑制性受體的表達[5]。

近年來，雖在HCMV感染免疫逃逸方面取得了顯著進展，但迄今為止其持續(xù)感染的分子免疫調(diào)控機制仍不明確。經(jīng)典MHC分子參與抗原的遞呈機制，一直是病毒感染免疫的研究重點。但有研究顯示：非經(jīng)典的MHCⅠ類分子HLA-G在病毒感染后免疫逃逸機制中亦發(fā)揮了關(guān)鍵作用，HCMV誘導(dǎo)HLA-G的表達已有報道，但仍不全面或存在爭議[6-7]，因此，我們用HCMV感染THP-1細胞后，研究HCMV感染THP-1細胞對HLA-G異構(gòu)體及其受體表達的影響，以進一步發(fā)現(xiàn)和了解HLA-G在HCMV感染后持續(xù)潛伏中的作用。

材 料 和 方 法

1 細胞株及病毒株

HCMV Towne株購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心，THP-1細胞株購自中國科學(xué)院上海細胞庫。

2 主要試劑

RPMI-1640培養(yǎng)液及胎牛血清購自Gibco；RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit購自Thermo；SDS-PAGE配膠試劑、RIPA裂解液、PMSF和BCA試劑盒購自碧云天生物技術(shù)研究所；HLA-G (4H84)I抗購自Abcam；HLA-G (MEM-G/9)I抗購自Exbio；ILT2 (CD85j)和ILT4 (CD85d)抗體購自eBioscience；人IL-10和可溶性HLA-G(soluble HLA-G, sHLA-G)ELISA試劑盒購自聯(lián)科生物技術(shù)有限公司；Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒購自Life Technologies；PCR引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成，詳見表1。

表1 HLA-G PCR擴增所需引物的序列

3 方法

3.1 細胞感染模型的建立 純化后的HCMV Towne株感染THP-1細胞(1×109/L，MOI=5)，置于37 ℃、5% CO2飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1～4 d后，每天半量換液，模型建立及確定與我們之前的研究相符合[8]。

3.2 HLA-G異構(gòu)體 mRNA表達水平的檢測 提取感染組和未感染組THP-1細胞的總 RNA并測定其濃度，按照Thermo的cDNA合成試劑盒說明進行逆轉(zhuǎn)錄操作，PCR擴增后進行瓊脂糖電泳驗證。

3.3 Western blot實驗 提取感染組和未感染組THP-1細胞的總蛋白，按照BCA法進行蛋白濃度測定，蛋白樣品加熱變性后將不同蛋白樣品之間的濃度調(diào)到一致，上樣進行Western blot檢測，使用抗HLA-G (4H84)檢測HLA-G蛋白水平。4H84是用HLA-G α1結(jié)構(gòu)域61～83位氨基酸片段免疫小鼠BALB/c而獲得的，所有的HLA-G亞型都包含α1結(jié)構(gòu)域，因此，4H84可以識別所有的HLA-G亞型。

3.4 流式細胞術(shù)檢測THP-1細胞HLA-G及其受體ILT2、ILT4的表達 收集未感染組和感染組THP-1細胞，分別往兩管中加入5 μL抗HLA-G(MEM-G/9)和同型對照/CD85j和同型對照/CD85d和同型對照，混勻后，避光30 min，30 min內(nèi)上機，流式細胞術(shù)檢測THP-1細胞HLA-G、ILT2和ILT4的表達。

3.5 ELISA檢測細胞培養(yǎng)上清中sHLA-G和IL-10水平 根據(jù)人sHLA-G和IL-10 ELISA試劑盒使用說明書的步驟檢測細胞培養(yǎng)上清中sHLA-G和IL-10。

1) 采樣。按前述藥效試驗處理和藥劑噴施方法，于各重復(fù)小區(qū)取一芽2葉茶青混合裝入保鮮袋，藥前采樣記錄為CK；藥液噴施完畢，葉片表面藥液水分揮發(fā)后采集的樣品記為0 d，其他采樣時間分別為藥后1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、15 d、21 d和30 d。

4 統(tǒng)計學(xué)處理

所有實驗重復(fù) 3 次，結(jié)果用SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件進行分析。兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 Annexin V-FITC/PI檢測THP-1細胞的存活率

HCMV感染THP-1細胞1～4 d后，用Annexin V-FITC/PI檢測THP-1細胞的存活率及凋亡率，結(jié)果顯示HCMV感染THP-1細胞后，細胞的存活率較高，細胞未出現(xiàn)明顯凋亡，與對照組比較，無顯著差異，見圖1。這說明HCMV感染THP-1細胞后，THP-1仍保持生存狀態(tài)，病毒感染不對細胞造成明顯損傷，所建立的細胞模型是可取的。

Figure 1.The viability of THP-1 cells infected with HCMV. Con: control group; Q1: necrotic cells; Q2: non-viable apoptotic cells; Q3: viable apoptotic cells; Q4: normal cells. Mean±SD.n=3.

圖1 HCMV感染對THP-1細胞存活率的影響

2 HCMV感染THP-1細胞誘導(dǎo)HLA-G 異構(gòu)體的表達

HCMV感染THP-1細胞1～4 d后，無論是RNA水平還是蛋白水平，均能誘導(dǎo)HLA-G異構(gòu)體的差異表達。結(jié)果顯示HLA-G異構(gòu)體mRNA的表達以HLA-G1、-G3、-G4和-G5為主，相較對照組，以感染后1 d表達上調(diào)最為明顯。Western blot實驗結(jié)果顯示HLA-G蛋白的表達以HLA-G1和HLA-G5為主。感染1 d后HLA-G1和HLA-G5 蛋白的表達明顯上調(diào)，見圖2。

Figure 2. HCMV induced expression of HLA-G isoforms in the THP-1 cells. A: the expression of HLA-G isoforms at mRNA level; B: the expression of HLA-G isoforms at protein level. Mean±SD.n=3.*P<0.05**P<0.01vscontrol (Con) group.

圖2 HCMV感染THP-1細胞誘導(dǎo)HLA-G異構(gòu)體的表達

3 HCMV感染THP-1細胞誘導(dǎo)HLA-G、ILT2和ILT4的表達

Figure 3. The expression of HLA-G (A), ILT2 (B) and ILT4 (C) in the THP-1 cells induced by HCMV infection. Blue lines: MEM-G/9, CD85 and CD85d; red lines: the same type control. Mean±SD.n=3.*P<0.05,**P<0.01vscontrol (Con) group.

圖3 HCMV感染THP-1 細胞誘導(dǎo)HLA-G、ILT2和ILT4的表達

4 HCMV感染THP-1細胞誘導(dǎo)sHLA-G的表達

HCMV感染THP-1細胞1～4 d后，用ELISA試劑盒檢測THP-1細胞培養(yǎng)上清中sHLA-G(主要為sHLA-G1和HLA-G5)水平。結(jié)果顯示感染1 d后，sHLA-G水平顯著升高，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見圖4。

5 HCMV感染THP-1細胞誘導(dǎo)細胞因子IL-10的表達

HCMV感染THP-1細胞1～4 d后，用ELISA試劑盒檢測THP-1細胞培養(yǎng)上清中細胞因子IL-10的表達水平。結(jié)果顯示，感染1 d后IL-10水平顯著升高，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見圖5。

Figure 4.Expression of sHLA-G in the THP-1 cell culture supernatant. Con: control group. Mean±SD.n=3.*P<0.05,**P<0.01vscontrol group.

圖4 THP-1細胞培養(yǎng)上清中sHLA-G的水平

Figure 5.The level of IL-10 in the THP-1 cell culture supernatant. Con: control group. Mean±SD.n=3.**P<0.01vscontrol group.

圖5 THP-1細胞培養(yǎng)上清中IL-10水平的變化

討 論

HCMV感染機體后，形成了多種機制來逃避機體免疫系統(tǒng)的監(jiān)視和防御，如改變MHC的功能，干擾APC的抗原提呈功能以及抑制NK細胞和CD8+CTL細胞的殺傷作用等。近年研究數(shù)據(jù)顯示，HLA-G在病毒感染后的免疫逃逸中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。

生理條件下，HLA-G的表達主要局限于滋養(yǎng)層細胞、角膜、胰島細胞和干細胞等。但病理情況如惡性腫瘤、器官移植、炎癥性疾病和病毒感染等均能誘導(dǎo)HLA-G分子異常表達[9]。HLA-G初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)選擇性剪接，產(chǎn)生7種異構(gòu)體，即膜結(jié)合型分子(HLA-G1、-G2、-G3、-G4)和可溶型分子(HLA-G5、-G6、-G7)。膜結(jié)合型HLA-G蛋白能在它表達的局部發(fā)揮作用，而sHLA-G除在局部發(fā)生作用外，還可通過循環(huán)系統(tǒng)發(fā)揮遠端效應(yīng)。HLA-G主要通過與多種免疫細胞表達的特異性受體(ILT2/CD85j、ILT4/CD85d和KIR2DL4/CD158d)結(jié)合發(fā)揮免疫抑制作用。 ILT2/4抑制性受體胞質(zhì)區(qū)含有免疫受體酪氨酸抑制基序，HLA-G與ILT2/4相互作用，引起SHP-2、STAT5、p70S6K的磷酸化/去磷酸化，導(dǎo)致下游基因沉默。有研究表明，HLA-G在腫瘤細胞免疫逃逸及腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用[10]。我們前期研究結(jié)果也表明，HLA-G 14bp 插入/缺失多態(tài)性可能是HCMV活動性感染的一個潛在易感因素[11]，但對其在HCMV逃避宿主免疫應(yīng)答中的作用尚不清楚。

病毒感染誘導(dǎo)HLA-G的異常表達能影響宿主的抗病毒免疫機制，利于病毒的復(fù)制和傳播[12]。據(jù)報道HIV、狂犬病毒(RABV)、HSV-1、HCV、HBV、甲型流感病毒等均能誘導(dǎo)表達HLA-G。Lozano 等[13]研究發(fā)現(xiàn)HIV陽性患者血液中的CD8+T細胞和單核細胞能高表達HLA-G，同時發(fā)現(xiàn)HIV長期進展者血清中sHLA-G的水平明顯高于不進展者，表明HLA-G的異常表達是HIV逃避機體免疫系統(tǒng)攻擊的重要機制之一。有研究報道，不同病毒感染能上調(diào)HLA-G不同異構(gòu)體的表達。Lafon等[14]證實嗜神經(jīng)病毒(HSV-1和RABV)感染可使神經(jīng)細胞(包括受感染的神經(jīng)細胞和未感染的神經(jīng)細胞)HLA-G表達增加，其中RABV主要上調(diào)HLA-G1，而HSV-1上調(diào)HLA-G3和HLA-G5的表達。國內(nèi)外也有研究表明，HCMV感染影響HLA-G的表達，Yan等[15]發(fā)現(xiàn)HCMV活動性感染患者體內(nèi)外周血單個核細胞中膜結(jié)合型和可溶性HLA-G的表達明顯升高，但具體機制尚不明確。在本研究中，我們以THP-1為細胞模型建立HCMV 潛伏感染，分析了HCMV感染THP-1細胞后HLA-G異構(gòu)體的差異表達。THP-1細胞屬于髓系細胞，是HCMV 潛伏感染的主要靶細胞且免疫功能明確，感染HCMV后，細胞狀態(tài)無明顯變化，細胞基本為存活細胞，有利于病毒的持續(xù)復(fù)制且病毒感染不對細胞造成明顯損傷。數(shù)據(jù)顯示HCMV感染THP-1細胞后上調(diào)HLA-G的表達，以HLA-G1和HLA-G5為主。這表明HLA-G的異常表達可能是HCMV感染后免疫逃逸的關(guān)鍵，且HLA-G1和HLA-G5在HCMV免疫逃逸中發(fā)揮的作用優(yōu)于其它HLA-G異構(gòu)體。

HLA-G可直接與抑制性受體結(jié)合發(fā)揮重要的生物學(xué)功能。其中，ILT2表達在所有的單核、樹突狀細胞和B細胞以及部分T細胞和NK細胞；ILT4僅分布在單核和樹突狀細胞等髓樣細胞，這些抑制性受體在初始型免疫細胞中處于低水平表達狀態(tài)，但在活化的免疫細胞或病理條件下表達上調(diào)[16]。已有研究報道ILT2/HLA-G相互作用活化的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑主要參與調(diào)控T細胞生物學(xué)功能，在T細胞趨化受體的表達及T 細胞周期等方面起重要作用。HLA-G與單核細胞上的抑制性受體ILT2或ILT4結(jié)合后，可刺激細胞分泌TGF-β、IL-10 等細胞因子，使Th1/Th2 平衡移向Th2，同時增加抑制性受體ILT2或ILT4的表達[17]。本研究顯示HCMV感染使細胞表面ILT2和ILT-4表達明顯增加，這說明，HCMV感染THP-1細胞以后，HLA-G異常表達，結(jié)合抑制性受體ILT2/ILT4后發(fā)揮免疫抑制效應(yīng)，HLA-G與ILT2/ILT4相互作用從而可能影響單核細胞的免疫功能，但具體機制尚不明確，有待進一步研究。

細胞因子可調(diào)控HLA-G的表達。有研究報道，細胞因子IL-10、IFN-γ和IFN-α能上調(diào)HLA-G的表達[18]。IL-10是一種重要的Th2型細胞因子，除具有重要的免疫抑制作用外，還具有免疫刺激作用[19]。本研究中，HCMV感染THP-1后IL-10分泌增加且HLA-G表達上調(diào)。兩者相互作用，一方面，HLA-G能促進IL-10的分泌，使Th1/Th2平衡向Th2偏移；另一方面，IL-10又能上調(diào)HLA-G的表達，之間形成的正反饋在病毒免疫逃逸中起著重要調(diào)控作用[20]。

綜上所述，HCMV感染THP-1細胞能影響HLA-G異構(gòu)體及抑制性受體ILT2/ILT4的表達，這可能是HCMV逃避機體免疫應(yīng)答的重要機制之一。但HCMV感染后HLA-G及其抑制性受體ILT2/ILT4的異常表達對THP-1細胞免疫功能的影響目前研究較少，機制尚不清楚，值得進一步研究和探討。

[1] Slobedman B, Cao JZ, Avdic S, et al. Human cytomegalovirus latent infection and associated viral gene expression[J]. Futur Microbiol, 2010, 5(6):883-900.

[2] Manicklal S, Emery VC, Lazzarotto T, et al. The “silent” global burden of congenital cytomegalovirus[J]. Clin Microbiol Rev, 2013,26(1):86-102.

[3] Ploegh HL. Viral strategies of immune evasion[J]. Science, 1998, 280(5361):249-253.

[4] Seliger B, Ritz U, Ferrone S. Molecular mechanisms of HLA class I antigen abnormalities following viral infection and transformation[J]. Int J Cancer, 2006, 118(1):129-138.

[5] Yan WH. HLA-G expression in hematologic malignancies[J]. Expert Rev Hematol, 2010, 3(1):67-80.

[6] Onno M, Pangault C, Le Friec G, et al. Modulation of HLA-G antigens expression by human cytomegalovirus: specific induction in activated macrophages harboring human cytomegalovirus infection[J]. J Immunol, 2000, 164(12):6426-6434.

[7] Pizzato N, Garmy-Susini B, Le Bouteiller P, et al. Differential down-modulation of HLA-G and HLA-A2 or -A3 cell surface expression following human cytomegalovirus infection[J]. J Reprod Immunol, 2004, 62(1-2):3-15.

[8] Zheng XQ, Gao Y, Zahng Q, et al. Identification of transcription factor AML-1 binding site upstream of human cytomegalovirusUL111Agene[J]. PLoS One, 2015, 10(2):e0117773.

[9] 顏衛(wèi)華, 范麗安. 人類白細胞抗原與人類巨細胞病毒[J]. 免疫學(xué)雜志, 2002, 18(2):153-157.

[10]徐丹萍， 林愛芬， 顏衛(wèi)華. HLA-G 在腫瘤細胞中的表達調(diào)控機制研究進展[J]. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2012，32(8):755-760.

[11]Zheng XQ, Zhu F, Shi WW, et al. The HLA-G 14 bp insertion/deletion polymorphism is a putative susceptible factor for active human cytomegalovirus infection in children[J]. Tissue Antigens, 2009, 74(4):317-321.

[12]Tripathi P, Agrawal S. The role of human leukocyte antigen E and G in HIV infection[J]. AIDS, 2007, 21(11):1395-1404.

[13]Lozano JM, Gonzalez R, Kindela JM, et al. Monocytes and T lymphocytes in HIV-1-positive patients express HLA-G molecule[J]. AIDS, 2002, 16(3):347-351.

[14]Lafon M, Prehaud C, Megret F, et al. Modulation of HLA-G expression in human neural cells after neurotropic viral infections[J]. J Virol, 2005, 79(24):15226-15237.

[15]Yan WH, Lin A, Chen BG, et al. Induction of both membrane-bound and soluble HLA-G expression in active human cytomegalovirus infection[J]. J Infect Dis, 2009, 200(5):820-826.

[16]Nakajima H, Asai A, Okada A. Transcriptional regulation of ILT family receptors[J]. J Immunol, 2003, 171(12):6611-6620.

[17]LeMaoult J, Zafaranloo K, Le Danff C, et al. HLA-G upregulates ILT2,ILT3, ILT4, and KIR2DL4 in antigen presenting cells, NK cells, and T cells[J]. FASEB J, 2005,19(6):662-664.

[18]Ugurel S, Rebmann V, Ferrone S, et al. Soluble human leukocyte antigen-G serum level is elevated in melanoma patients and is further increased by interferon-alpha immunotherapy[J]. Cancer, 2001, 92(2): 369-376.

[19]郭錦錦, 孫萬邦. IL-10受體及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進展[J]. 臨床醫(yī)學(xué)工程, 2012,19(1):135-137.

[20]Urosevic M, Dummer R. HLA-G and IL-10 expression in human cancer different stories with the same message[J]. Semin Cancer Biol, 2003, 13(5): 337-342.

(責(zé)任編輯： 盧 萍， 羅 森)

HCMV-infected human THP-1 cells induce expression of HLA-G and its receptors

LAI Mei-mei1, 2,ZHOU Qiu-ju1, 2,LOU Yun-yan1, 2, GUO Bin-han1, 2, WANG Hui-yan1, 2, ZHENG Xiao-qun1, 2

(1DepartmentofLaboratoryMedicine,TheSecondAffiliatedHospital&YuyingChildren’sHospitalofWenzhouMedicalUniversity,Wenzhou325027,China;2SchoolofLaboratoryMedicalScience,WenzhouMedicalUniversity,TheKeyLaboratoryofLaboratoryMedicine,MinistryofEducationofChina,Wenzhou325035,China.E-mail:jszhengxq@163.com)

AIM: To investigate the differential expression of human leukocyte antigen-G (HLA-G) isoforms and its receptors in human monocyte line THP-1 after human cytomegalovirus (HCMV) infection for exploring the role of HLA-G in HCMV escaping the immune response of the organism. METHODS: THP-1 cells were infected with HCMV Towne strain. The expression of HLA-G isoforms at mRNA and protein levels was determined by RT-PCR and Western blot, respectively. The surface expression of HLA-G and its receptors ILT2/ILT4 and the cell viability were analyzed by flow cytometry. The levels of soluble HLA-G (sHLA-G) and IL-10 were measured by ELISA. RESULTS: After infection of the THP-1 cells with HCMV, no obvious apoptosis in the cells was observed, and the viability of the cells was high. A significant up-regulation of HLA-G1, -G3, -G4 and -G5 at mRNA expression level 1 d after infection was found, while the protein expression of HLA-G1 and HLA-G5 isoforms was mainly detected. The expression of HLA-G/ILT2/ILT4 was evidently up-regulated 1 d after infection. The level of sHLA-G was significantly increased 1 d after infection as compared with control group (P<0.01). The expression of IL-10 was obviously up-regulated 1 d post-infection as compared with control group. CONCLUSION: The differential expression of HLA-G isoforms and secretion of the receptors ILT2/ILT4 and IL-10 in the THP-1 cells are induced after HCMV infection. This study provides experimental evidence for evaluating the immune mechanism of HCMV infection.

Human cytomegalovirus; Human leukocyte antigen-G; Inhibitory receptor; Infection

1000- 4718(2017)02- 0329- 07

2016- 09- 09

2016- 11- 21

浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生課題項目(No.2017KY474);溫州市科技計劃項目(No. Y20150304)

R392.32

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2017.02.022

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△通訊作者 Tel: 0577-86699196; E-mail： jszhengxq@163.com