黃耀光　李偉杰　蘇偉強(qiáng)　林輝斌　陳虹　溫瓊娜

【摘要】 目的：探討聯(lián)合檢測血漿及支氣管肺泡灌洗液（BALF）（1-3）β-D-葡聚糖對侵襲性肺部真菌感染的臨床診治價值。方法：選取2014年6月-2016年5月期間本院確診治療的侵襲性肺部感染患者100例作為感染組，依據(jù)病原菌性質(zhì)分為真菌組42例和細(xì)菌組58例，同期選取體檢中心健康人員30例作為健康組。采用乳膠增強(qiáng)免疫比濁法檢測（1-3）β-D-葡聚糖水平（G試驗(yàn)），ROC曲線分析血漿及BALF的G試驗(yàn)對侵襲性肺部真菌感染的診斷價值，統(tǒng)計分析所有研究對象血漿、BALF的G試驗(yàn)情況。結(jié)果：真菌組患者血漿、BALF的G試驗(yàn)水平明顯高于健康組和細(xì)菌組，比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。ROC曲線分析顯示，BALF的G試驗(yàn)以10 ng/L為臨界值時，診斷侵襲性肺部真菌感染的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度分別為76.83%、89.73%、84.59%；血漿G試驗(yàn)以20 ng/L為臨界值時，其診斷敏感度、特異度、準(zhǔn)確度分別為78.47%、91.68%、84.43%；兩者聯(lián)合時，其診斷敏感度、特異度、準(zhǔn)確度分別為85.92%、96.41%、93.28%。在診斷敏感度、特異度、準(zhǔn)確度方面比較，BALF的G試驗(yàn)<血漿G試驗(yàn)<兩者聯(lián)合，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：血漿及BALF的G試驗(yàn)水平變化與侵襲性肺部真菌感染有關(guān)，聯(lián)合檢測其水平對侵襲性肺部真菌感染具有更為良好的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性，值得臨床作進(jìn)一步推廣。

【關(guān)鍵詞】 血漿； 支氣管肺泡灌洗液； （1-3）β-D-葡聚糖； 侵襲性肺部真菌感染； 診斷

Clinical Diagnosis and Treatment Value of Joint Detection of Plasma and Bronchoalveolar Lavage Fluid （1-3）β-D-glucan in Invasive Pulmonary Fungal Infection/HUANG Yao-guang，LI Wei-jie，SU Wei-qiang，et al.//Medical Innovation of China，2016，13（31）：010-013

【Abstract】 Objective：To discuss the clinical diagnosis and treatment value of joint detection of plasma and bronchoalveolar lavage fluid （BALF） （1-3） β-D-glucan in invasive pulmonary fungal infection.Method：100 patients with invasive pulmonary infection were selected from June 2014 to May 2016 in our hospital as infection group.According to the nature of pathogen，all patients were divided into fungal group of 42 cases and bacteria group of 58 cases，at the same time 30 cases with healthy physical examination center were chosen as health group.The latex enhanced immune turbidimetric method was used to detect （1-3） β-D-glucan level（G test），ROC curve analysis was used to analyze blood plasma and BALF G test value to the diagnosis of invasive pulmonary fungal infection，all the research objects of blood plasma and BALF G test were analysed.Result：Fungal group G test levels of plasma and BALF were obviously higher than that of healthy group and bacteria group，the differences were statistically significant（P<0.05）.ROC curve analysis showed that，the BALF G test with 10 ng/L as the critical value of invasive pulmonary fungal infection，the diagnostic，sensitivity and accuracy of the specific degree were 76.83%，89.73% and 76.83% respectively；the plasma G test with 20 ng/L as the critical value，the diagnostic，sensitivity and accuracy of the specific degree were 78.47%，91.68% and 84.43% respectively；the two joint as the critical value，diagnostic，sensitivity and accuracy of the specific degree were 85.92%，96.41% and 93.28% respectively.In the diagnosis of sensitivity， accuracy and specific degree，BALF G experiment

【Key words】 Plasma； Bronchoalveolar lavage fluid； （1-3） β-D-glucan； Invasive pulmonary fungal infection； Diagnosis

First-authors address：Central Peoples Hospital of Zhanjiang，Zhanjiang 524000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.31.003

侵襲性肺部感染是臨床上常見的感染性疾病之一，依據(jù)感染病原體的性質(zhì)，可分為細(xì)菌性、真菌性等侵襲性肺部感染，其中早期真菌性感染無臨床癥狀，待有發(fā)熱、畏寒、頭痛、流涕等癥狀時，其病情已較為嚴(yán)重，從而增加治療難度和費(fèi)用[1]。目前，侵襲性肺部真菌感染的演變迅速，病死率高，其治療關(guān)鍵在于采取綜合性防治措施，故如何準(zhǔn)確、快速鑒別診斷該疾病對患者的臨床治療具有重要的價值[2]。對此，本研究通過檢測患者血漿、BALF的G試驗(yàn)情況，探討其聯(lián)合檢測對侵襲性肺部真菌感染的診治價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年6月-2016年5月期間本院確診治療的侵襲性肺部感染患者100例作為感染組，男64例，女36例；年齡19～48歲，平均（34.76±12.47）歲。依據(jù)病原菌性質(zhì)將其分為真菌組42例和細(xì)菌組58例，真菌組：男24例，女18例；年齡19～47歲，平均（35.01±12.11）歲；細(xì)菌組：男40例，女18例；年齡20～49歲，平均（35.99±13.16）歲。同期選取體檢中心健康人員30例作為健康組，男20例，女10例；年齡19～49歲，平均（35.63±12.88）歲。本次研究已經(jīng)本院倫理委員會審批且通過，所有患者的性別、年齡等一般資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) （1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①感染組患者經(jīng)臨床癥狀、CT或超聲檢查、實(shí)驗(yàn)室檢查等證實(shí)為侵襲性肺部感染[3]；②治療前1個月內(nèi)無抗生素、抗感染等藥物治療史；③患者或其家屬簽署知情同意書。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有心、肝、腎等重要器官嚴(yán)重性疾病；②血液系統(tǒng)嚴(yán)重性疾病者；③有精神病病史者。

1.3 方法 所有研究對象均于晚8時后禁食，次晨7時空腹處理，抽取左上臂靜脈血3 mL，常規(guī)棉簽止血后置入無菌抗凝試管中，在纖維支氣管鏡輔助下于病變肺亞段支氣管緩慢灌注生理鹽水25 mL，持續(xù)緩慢吸出灌洗液至無菌收集杯內(nèi)，將樣本分成A、B兩等份。A份通過全自動離心分離機(jī)進(jìn)行10 min血清分離，3000 r/min，取適量上清液并采用乳膠增強(qiáng)免疫比濁法進(jìn)行檢測，試劑盒由浙江夸克生物有限公司提供，通過羅氏全自動生化分析儀進(jìn)行定量測定。同時B份送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行真菌、細(xì)菌培養(yǎng)等微生物學(xué)檢查，統(tǒng)計分析所有研究對象血漿、BALF的G試驗(yàn)情況，其中BALF的G試驗(yàn)水平以0～10 ng/L為正常范圍值，血漿G試驗(yàn)水平以0～20 ng/L為正常范圍值[4-5]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 使用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行處理，計量資料采用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，計數(shù)資料采用 字2檢驗(yàn)，多組資料比較采用F檢驗(yàn)，血漿、BALF的G試驗(yàn)對侵襲性肺部真菌感染的診斷價值采用ROC曲線分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血漿、BALF的G試驗(yàn)水平比較 真菌組患者血漿、BALF的G試驗(yàn)水平明顯高于健康組和細(xì)菌組，比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。但健康組和細(xì)菌組血漿、BALF的G試驗(yàn)水平基本相同，比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（t=1.299、1.388，P>0.05），見表1。

2.2 不同方法診斷侵襲性肺部真菌感染的ROC曲線分析 ROC曲線分析顯示，BALF的G試驗(yàn)以10 ng/L為臨界值時，診斷侵襲性肺部真菌感染的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度分別為76.83%、89.73%、84.59%；血漿G試驗(yàn)以20 ng/L為臨界值時，其診斷敏感度、特異度、準(zhǔn)確度分別為78.47%、91.68%、84.43%；兩者聯(lián)合時，其診斷敏感度、特異度、準(zhǔn)確度分別為85.92%、96.41%、93.28%，見圖1。在診斷敏感度、特異度、準(zhǔn)確度方面，BALF的G試驗(yàn)<血漿G試驗(yàn)<兩者聯(lián)合，比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（ 字2=11.736、12.671、15.749，P<0.05）

3 討論

侵襲性肺部真菌感染是臨床上呼吸內(nèi)科常見的疾病之一，由真菌對氣管支氣管和肺部的侵犯引起氣道黏膜炎癥和肺部炎癥肉芽腫所致，由于其早期臨床表現(xiàn)常無特異性，常規(guī)的血生化、胸部X線片等檢查常難以發(fā)現(xiàn)，易導(dǎo)致誤診、漏診，而延誤治療[6-7]。近年來，隨著人們生活環(huán)境及廣譜抗生素頻繁使用等因素影響，侵襲性肺部真菌感染的發(fā)生呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢，其臨床診治也逐漸受到人們的關(guān)注，且由于組織病理學(xué)診斷需要侵入性創(chuàng)傷性操作，故如何準(zhǔn)確、低創(chuàng)鑒別診斷該疾病具有重要的臨床意義。

有研究顯示，（1-3）β-D-葡聚糖是一種由糖苷鍵的鍵結(jié)所形成的多糖，為真菌細(xì)胞壁的特異性組成成分，在真菌感染患者中呈現(xiàn)出高表達(dá)，提示其與真菌感染的關(guān)系[8-9]。而封凱旋等[10-11]研究表明，通過G試驗(yàn)檢測（1-3）β-D-葡聚糖水平可有效對侵襲性肺部真菌感染進(jìn)行早期鑒別診斷，且具有良好的敏感性和特異性。對此，本研究通過檢測患者血漿、BALF的G試驗(yàn)情況，發(fā)現(xiàn)真菌組血漿、BALF的G試驗(yàn)水平明顯高于健康組，ROC曲線顯示BALF的G試驗(yàn)以10 ng/L、血漿G試驗(yàn)以20 ng/L為臨界值時，在診斷敏感度、特異度、準(zhǔn)確度方面，BALF的G試驗(yàn)<血漿G試驗(yàn)<兩者聯(lián)合，表明兩者G試驗(yàn)水平與侵襲性肺部真菌感染有關(guān)，聯(lián)合檢測其水平對侵襲性肺部真菌感染具有更為良好的診斷價值。本研究結(jié)果提示在侵襲性肺部真菌感染診斷過程中，實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)是常用的檢查方法，可有效準(zhǔn)確鑒別該疾病的發(fā)生，但由于其操作較為復(fù)雜，且培養(yǎng)時間較長，易延誤患者的治療，同時胸部高分辨率CT檢查雖能早期發(fā)現(xiàn)肺部病灶，但病變表現(xiàn)無特征性，易造成誤診等情況發(fā)生，錯過了早期治療的時機(jī)，進(jìn)而增加治療難度和費(fèi)用[12-15]。而患者在發(fā)生真菌感染時，可引起機(jī)體一系列的免疫反應(yīng)，進(jìn)而激活巨噬細(xì)胞、噬中性細(xì)胞等，使巨噬細(xì)胞辨別和破壞真菌細(xì)胞壁，使真菌細(xì)胞壁分解成多種碎片，其中以β方式連接的（1-3）β-D-葡聚糖可能被大量釋放至患者的體液中，引起其在機(jī)體血液或肺泡液中的濃度上升，但由于部分真菌被氣道分泌物包繞，使（1-3）β-D-葡聚糖在釋放過程中較少地進(jìn)入血液，導(dǎo)致單獨(dú)檢測BALF的G試驗(yàn)水平出現(xiàn)假陰性診斷。也可能由于部分患者肺部真菌未被氣道分泌物包繞，可較為徹底地釋放至血液中，導(dǎo)致單獨(dú)檢測血漿G試驗(yàn)水平敏感性降低[16-18]。因此，兩者聯(lián)合檢測可有效彌補(bǔ)兩者之間存在的不足，進(jìn)而增加對侵襲性肺部真菌感染診斷的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性，有利于醫(yī)師更準(zhǔn)確、快速鑒別診斷該疾病的發(fā)生，以作出相應(yīng)的早期干預(yù)措施[19-20]。endprint

綜上所述，血漿及BALF的G試驗(yàn)水平變化與侵襲性肺部真菌感染有關(guān)，聯(lián)合檢測其水平對侵襲性肺部真菌感染具有更為良好的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性，值得臨床作進(jìn)一步推廣。

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（收稿日期：2016-07-04） （本文編輯：周亞杰）endprint