蔣曉蓉，孟以秀，彭 玲（重慶市開州區(qū)人民醫(yī)院婦科，重慶 405499）

重組人干擾素α-2b治療宮頸糜爛合并人乳頭瘤病毒感染的臨床觀察

蔣曉蓉＊，孟以秀，彭 玲#（重慶市開州區(qū)人民醫(yī)院婦科，重慶 405499）

目的：觀察重組人干擾素α-2b治療宮頸糜爛合并人乳頭瘤病毒（HPV）感染的療效和安全性。方法：81例宮頸糜爛合并HPV感染患者隨機(jī)分為對照組（40例）和觀察組（41例）。兩組患者均于月經(jīng)干凈后3～7 d行微波治療，微波治療后3 d，對照組患者給予保婦康栓劑1粒，睡前置于陰道深部，每日1次，連用14 d。觀察組患者在對照組治療的基礎(chǔ)上給予重組人干擾素α-2b凝膠1 g，每日1次，連用14 d。觀察兩組患者的臨床療效，HPV轉(zhuǎn)陰率，治療前后特異性轉(zhuǎn)錄因子（T-bet、GATA3、T-bet/GATA3、FoxP3）水平、炎癥因子[白細(xì)胞介素（IL）-2、γ干擾素（IFN）-γ、IL-4、IL-10、轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-β1、IFN-γ/IL-4]水平及不良反應(yīng)發(fā)生情況。結(jié)果：觀察組患者總有效率、HPV轉(zhuǎn)陰率均顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。治療后，兩組患者T-bet、T-bet/ GATA3、IL-2、IFN-γ、IFN-γ/IL-4水平均顯著高于同組治療前，且觀察組顯著高于對照組；兩組患者GATA3、FoxP3、IL-4、IL-10、TGF-β1水平均顯著低于同組治療前，且觀察組顯著低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，重組人干擾素α-2b治療宮頸糜爛合并HPV感染的療效和安全性均較好，可提高HPV轉(zhuǎn)陰率。

重組人干擾素α-2b；宮頸糜爛；人乳頭瘤病毒；療效；安全性；特異性轉(zhuǎn)錄因子；炎癥因子

宮頸糜爛是婦科常見慢性炎癥，嚴(yán)重者可發(fā)展為宮頸上皮內(nèi)瘤變或癌癥。人乳頭瘤病毒（Human papilloma virus，HPV）是促進(jìn)宮頸糜爛發(fā)生與發(fā)展的一個重要誘因。據(jù)悉，70%以上的宮頸糜爛患者能夠依靠自身的免疫系統(tǒng)清除HPV，少數(shù)患者由于感染持續(xù)存在，很容易進(jìn)入“宮頸炎-上皮內(nèi)瘤變-原位癌-浸潤癌-轉(zhuǎn)移癌”這一階梯式病變過程[1]。研究表明，生殖道局部免疫微環(huán)境異常是導(dǎo)致HPV免疫逃逸和持續(xù)感染的重要原因[2]。其中，1型輔助性T細(xì)胞（Th1）/2型輔助性T細(xì)胞（Th2）比例平衡及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（FoxP3）功能失調(diào)是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。重組人干擾素α-2b是一類體外合成的高活性蛋白多肽，可與病毒細(xì)胞表面的干擾素受體結(jié)合來阻止蛋白質(zhì)合成，發(fā)揮抗病毒作用；此外，該藥還能調(diào)整T淋巴細(xì)胞比例，增強(qiáng)局部細(xì)胞免疫功能[3-4]。目前，關(guān)于重組人干擾素α-2b是否能夠調(diào)整Th1/Th2平衡及FoxP3細(xì)胞功能國內(nèi)外鮮有報道。為此，在本研究中筆者觀察了重組人干擾素α-2b治療宮頸糜爛合并HPV感染的療效和安全性，旨在為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選擇2014年7月—2016年6月我院婦科收治的81例宮頸糜爛合并HPV感染患者，年齡29～51歲，平均（41.54±6.12）歲；體質(zhì)量指數(shù)18.4～27.1 kg/m2，平均（23.54±4.34）kg/m2；宮頸糜爛程度：輕度21例、中度49例、重度11例。按隨機(jī)數(shù)字表法將所有患者分為對照組（40例）和觀察組（41例）。兩組患者年齡、體質(zhì)量指數(shù)、宮頸糜爛程度等基本資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），具有可比性，詳見表1。本研究方案經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核通過，所有患者均簽署了知情同意書。

表1 兩組患者基本資料比較（s）Tab 1 Comparison of general information between 2 groups（s）

表1 兩組患者基本資料比較（s）Tab 1 Comparison of general information between 2 groups（s）

組別觀察組對照組t/χ2P n 體質(zhì)量指數(shù)，kg/m241 40年齡，歲41.43±6.01 41.47±7.11 0.2740.392糜爛程度，例輕度10111.364 0.243中度27 22重度23.35±4.64 23.80±4.240.5110.30647 HPV類型HPV16/HPV18 20/21 23/17 0.618 0.432

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《婦產(chǎn)科學(xué)》中宮頸糜爛的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②HPV陽性。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有陰道出血癥狀患者；②干擾素不耐受患者；③合并有免疫系統(tǒng)疾病或糖尿病、冠心病或可能導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)的其他疾病患者；④生殖道急性炎癥患者；⑤近3個月有宮頸糜爛或HPV治療史患者。

1.3 治療方法

兩組患者均于月經(jīng)干凈后3～7 d，采用MTC-3H型微波治療儀（上海維世康醫(yī)用電子有限公司）進(jìn)行治療。消毒外陰和陰道后，窺陰器協(xié)助下清理宮頸分泌物，置入微波治療儀，根據(jù)患者病情選擇功率，至糜爛面凝固呈白色或黃色痂殼樣為止。微波治療后3 d，對照組患者給予保婦康栓劑（海南碧凱藥業(yè)有限公司，規(guī)格：1.74 g/粒，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z46020058）1粒，睡前置于陰道深部，每日1次，連用14 d。觀察組患者在對照組治療的基礎(chǔ)上給予重組人干擾素α-2b凝膠[兆科藥業(yè)（合肥）有限公司，規(guī)格：10萬U/g，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字S20010054]1 g，每日1次，連用14 d。

1.4 觀察指標(biāo)

觀察兩組患者的HPV轉(zhuǎn)陰率，治療前后特異性轉(zhuǎn)錄因子（T-bet、GATA3、T-bet/GATA3、FoxP3）水平、炎癥因子[白細(xì)胞介素（IL）-2、γ干擾素（IFN）-γ、IL-4、IL-10、轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-β1、IFN-γ/IL-4]水平及不良反應(yīng)發(fā)生情況。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測炎癥因子水平（試劑盒均由南京森貝伽生物科技有限公司提供）。HPV轉(zhuǎn)陰率＝轉(zhuǎn)陰例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.5 療效判定標(biāo)準(zhǔn)

痊愈：臨床癥狀與體征、糜爛面全部消失，宮頸光滑；顯效：臨床癥狀與體征明顯減輕，糜爛面縮小三分之二以上；有效：臨床癥狀與體征有所減輕，糜爛面縮小三分之一以上；無效：未達(dá)上述標(biāo)準(zhǔn)?？傆行剩剑ㄈ龜?shù)+顯效例數(shù)+有效例數(shù)）/總例數(shù)×100%[5]。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計量資料以s表示，采用t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床療效比較

觀察組患者總有效率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），詳見表2。

表2 兩組患者臨床療效比較[例（%）]Tab 2 Comparison of clinical efficacy between 2 groups[case（%）]

2.2 兩組患者HPV轉(zhuǎn)陰率比較

觀察組患者有27例轉(zhuǎn)陰，轉(zhuǎn)陰率為65.85%；對照組患者有17例轉(zhuǎn)陰，轉(zhuǎn)陰率為42.50%；觀察組顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

2.3 兩組患者治療前后特異性轉(zhuǎn)錄因子水平比較

治療前，兩組患者特異性轉(zhuǎn)錄因子水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，兩組患者T-bet、T-bet/GATA3水平均顯著高于同組治療前，且觀察組顯著高于對照組；兩組患者GATA3、FoxP3水平均顯著低于同組治療前，且觀察組顯著低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），詳見表3、圖1。

表3 兩組患者治療前后特異性轉(zhuǎn)錄因子水平比較（s）Tab 3 Comparison of specific transcription factor levels between 2 groups before and after treatment（s）

表3 兩組患者治療前后特異性轉(zhuǎn)錄因子水平比較（s）Tab 3 Comparison of specific transcription factor levels between 2 groups before and after treatment（s）

注：與治療前比較，＊P＜0.05；與對照組比較，#P＜0.05Note：vs.before treatment，＊P＜0.05；vs.control group，#P＜0.05

組別觀察組41 n對照組FoxP30.72±0.12 0.51±0.08＊#0.75±0.11 0.57±0.09＊40時段治療前治療后治療前治療后T-bet0.23±0.06 0.45±0.09＊#0.24±0.05 0.38±0.08＊GATA3 0.59±0.09 0.42±0.08＊#0.61±0.10 0.50±0.07＊T-bet/GATA3 0.38±0.06 1.07±0.12＊#0.39±0.08 0.77±0.11＊

圖1 反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)電泳圖Fig 1 Electrophoresis image of RT-PCR

2.4 兩組患者治療前后炎癥因子水平比較

治療前，兩組患者炎癥因子水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，兩組患者IL-2、IFN-γ、IFN-γ/IL-4水平均顯著高于同組治療前，且觀察組顯著高于對照組；兩組患者IL-4、IL-10、TGF-β1水平均顯著低于同組治療前，且觀察組顯著低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），詳見表4。

2.5 不良反應(yīng)

觀察組患者出現(xiàn)1例局部灼熱感，不良反應(yīng)發(fā)生率為2.44%；對照組患者出現(xiàn)2例局部灼熱感，不良反應(yīng)發(fā)生率為5.00%。兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2＝0.001，P＝0.983）。出現(xiàn)的不良反應(yīng)均在1周左右自行消失，均未見嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生。

3 討論

作為世界排名第二的女性癌癥殺手，99%的宮頸癌與高危型HPV感染有關(guān)。HPV是一種嗜上皮性病毒，主要寄居于宮頸上皮細(xì)胞，并隨上皮細(xì)胞的成熟分化完成自身的復(fù)制與繁殖。正常宮頸一般可在短期內(nèi)通過自身免疫功能清除HPV，但也有一小部分因局部免疫微環(huán)境異常，長期處于病毒感染和免疫功能損害的惡性循環(huán)中[6]。目前，已有學(xué)者證實(shí)Th1/Th2平衡與FoxP3細(xì)胞功能失調(diào)在宮頸HPV感染中的介導(dǎo)作用[7-8]，Th1/Th2平衡向Th1漂移和CD4+、CD25+、FoxP3細(xì)胞增多均是促進(jìn)宮頸疾病惡性發(fā)展的重要因素。

表4 兩組患者治療前后炎癥因子水平比較（s）Tab 4 Comparison of inflammatory cytokine levels between 2 groups before and after treatment（s）

表4 兩組患者治療前后炎癥因子水平比較（s）Tab 4 Comparison of inflammatory cytokine levels between 2 groups before and after treatment（s）

注：與治療前比較，＊P＜0.05；與對照組比較，#P＜0.05Note：vs.before treatment，＊P＜0.05；vs.control group，#P＜0.05

組別觀察組41 n對照組TGF-β1，ng/L 35.38±4.27 21.53±3.47＊#36.75±4.62 25.68±3.54＊40時段治療前治療后治療前治療后IL-2，ng/L 10.22±1.52 18.53±1.61＊#10.52±1.62 13.62±1.71＊IFN-γ，ng/L 9.47±0.87 16.38±1.27＊#9.35±0.73 12.55±1.13＊IL-4，ng/L 25.38±3.17 17.35±1.57＊#26.55±4.27 21.15±2.37＊IL-10，ng/L 16.75±0.88 9.14±1.54＊#16.62±0.84 10.82±1.75＊IFN-γ/IL-4，% 0.37±0.08 0.94±0.18＊#0.35±0.06 0.59±0.11＊

保婦康栓劑為純中藥制劑，主要成分為莪術(shù)油和冰片，莪術(shù)油具有抗菌、抗病毒的作用，臨床可用于治療霍亂、感冒等多種感染性疾病；冰片可活血消癰，臨床多用于治療瘡瘍腫痛、潰后不斂等。保婦康栓劑在宮頸糜爛的臨床治療中已取得了一定的成效，但對HPV感染的針對性不強(qiáng)，單獨(dú)治療宮頸糜爛合并HPV感染的療效尚不理想[9-10]。

重組人干擾素α-2b是臨床治療宮頸糜爛的常用藥物之一，干擾素是病毒進(jìn)入機(jī)體后誘導(dǎo)宿主細(xì)胞產(chǎn)生的反應(yīng)物，其主要生理作用為促進(jìn)免疫細(xì)胞發(fā)揮免疫功能，抵抗病毒感染。研究表明，重組人干擾素α-2b能夠增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、外周血單核細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞的活性，調(diào)節(jié)T細(xì)胞和B細(xì)胞分化，增加或誘導(dǎo)細(xì)胞表皮主要組織相容復(fù)合物抗原的表達(dá)，具有廣譜抗病毒作用[11]。

T-bet和GATA3分別是調(diào)控Th1細(xì)胞及Th2細(xì)胞發(fā)育與功能的特異性上游轉(zhuǎn)錄因子。研究表明，T-bet主要表達(dá)于Th1細(xì)胞分化和發(fā)育的早期階段，在Th2細(xì)胞中幾乎不表達(dá)；而GATA3相反，其高表達(dá)于Th2細(xì)胞，當(dāng)CD4+分化為Th1細(xì)胞時表達(dá)下調(diào)，在成熟Th1細(xì)胞中幾乎不表達(dá)[12]?？梢?，T-bet和GATA3的表達(dá)強(qiáng)弱與Th1、Th2的細(xì)胞數(shù)量密切相關(guān)。FoxP3是FoxP3細(xì)胞的特異性核心轉(zhuǎn)錄因子[13]，在數(shù)量和功能方面的波動與FoxP3、Treg細(xì)胞高度一致。

本研究結(jié)果顯示，治療后，兩組患者T-bet、T-bet/ GATA3水平均顯著高于同組治療前，且觀察組顯著高于對照組；兩組患者GATA3、FoxP3水平均顯著低于同組治療前，且觀察組顯著低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。這提示，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，重組人干擾素α-2b能夠調(diào)整Th1/Th2與CD4+、CD25+、FoxP3細(xì)胞數(shù)量。觀察組患者總有效率、HPV轉(zhuǎn)陰率均顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。這提示，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，重組人干擾素α-2b治療宮頸糜爛合并HPV感染的療效顯著，可顯著提高HPV轉(zhuǎn)陰率。

另外，免疫細(xì)胞主要通過自身分泌的細(xì)胞因子發(fā)揮生物學(xué)活性，其中Th1細(xì)胞主要分泌IL-2和IFN-γ等，在抗腫瘤和抗病原體的免疫方面起積極作用。Th2細(xì)胞主要分泌IL-4和IL-10等，可增強(qiáng)對感染的敏感性，但過高分泌時可抑制Th1細(xì)胞的功能[14]。目前，臨床試驗(yàn)中多以IFN-γ/IL-4作為衡量Th1/Th2功能狀態(tài)的指標(biāo)。FoxP3細(xì)胞多分泌TGF-β1，健康生理狀態(tài)下可防止免疫系統(tǒng)對自身抗原的反應(yīng)，預(yù)防自身免疫性疾病的發(fā)生，病理條件下則是腫瘤和病原菌發(fā)生免疫逃逸的重要原因[15]。既往已有研究證實(shí)，HPV感染者外周血和宮頸局部IL-2和IFN-γ水平均顯著低于健康人群，IL-4、IL-10與TGF-β1水平均顯著高于健康人群[16-17]。本研究結(jié)果顯示，治療后，兩組患者IL-2、IFN-γ、IFN-γ/IL-4水平均顯著高于同組治療前，且觀察組高于對照組；IL-4、IL-10、TGF-β1水平均顯著低于同組治療前，且觀察組低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。這提示，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，重組人干擾素α-2b可調(diào)整Th1/Th2及FoxP3細(xì)胞的功能狀態(tài)。安全性方面，兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。這提示，重組人干擾素α-2b治療宮頸糜爛合并HPV感染的安全性較好。

綜上所述，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，重組人干擾素α-2b治療宮頸糜爛合并HPV感染的療效和安全性均較好，能調(diào)節(jié)患者T細(xì)胞數(shù)量及活性，提高HPV轉(zhuǎn)陰率。本研究局限性：（1）樣本量較小，僅涵蓋了HPV16和HPV18型患者，不同HPV型對治療藥物的敏感性不一致，患者對HPV的免疫也存在個體化因素，導(dǎo)致結(jié)果存在偏倚；（2）觀察時間較短，缺乏長期隨訪資料，未觀察HPV復(fù)發(fā)情況。故此結(jié)論有待大樣本、多中心研究進(jìn)一步證實(shí)。

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（編輯：陳 宏）

Clinical Observation of Recombinant Human Interferon α-2b in the Treatment of Cervical Erosion Combined with Human Papillomavirus Infection

JIANG Xiaorong，MENG Yixiu，PENG Ling（Dept.of Gynecology，People’s Hospital of Chongqing Kaizhou District，Chongqing 405499，China）

OBJECTIVE：To observe the efficacy and safety of recombinant human interferon α-2b in the treatment of cervical erosion combined with human papillomavirus（HPV）infection.METHODS：81 patients with cervical erosion combined with HPV infection were randomly divided into control group（40 cases）and observation group（40 cases）.All patients received microwave therapy after 3-7 d of menstruation，control group was given Baofukang suppository 1 granule in deep vagina before going to bed after 3 d，once a day，for 14 d.Observation group was additionally given Recombinant human interferon α-2b gel 1 g，once a day，for 14 d.The clinical efficacy，HPV negative conversion rate，specific transcription factor levels（T-bet，GATA3，T-bet/GATA3，F(xiàn)oxP3），inflammatory cytokine levels[interleukin（IL）-2，gamma interferon（IFN）-γ，IL-4，IL-10，transforming growth factor-β1（TGF-β1），IFN-γ/IL-4]before and after treatment，and the incidence of adverse reactions in 2 groups were observed.RESULTS：The total effective rate and HPV negative conversion rate in observation group were significantly higher than control group，with statistical significances（P＜0.05）.After treatment，T-bet，T-bet/GATA3，IL-2，IFN-γ，IFN-γ/IL-4 levels in 2 groups were significantly higher than before，and observation group was higher than control group；GATA3，F(xiàn)oxP3，IL-4，TGF-β1levels were significantly lower than before，and observation group was lower than control group，with statistical significances（P＜0.05）. And there was no significant difference in the incidence of adverse reactions in 2 groups（P＞0.05）.CONCLUSIONS：Based on conventional treatment，recombinant human interferon α-2b has good efficacy and safety in the treatment of cervical erosion combined with HPV infection，increase the removal of the HPV.

Recombinant human interferon α-2b；Cervical erosion；Human papillomavirus；Efficacy；Safety；Specific transcription factor；Imflammatory cytokine

R711.3；R711.74

A

1001-0408（2017）03-0331-04

2016-07-03

2016-11-16）

＊副主任醫(yī)師。研究方向：婦科腫瘤。電話：023-52663962。E-mail：104378916@qq.com

#通信作者：副主任醫(yī)師。研究方向：婦科腫瘤。電話：023-52663962

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.03.13