高凌峰

（臨汾市中心血站，山西 臨汾 041000）

無償獻血者弱D鑒定兩種試劑結(jié)果不一致分析與探討

高凌峰

（臨汾市中心血站，山西 臨汾 041000）

目的通過兩種不同的試劑做RhD陰性確認試驗，來檢測獻血者Rh血型是否為RhD弱D型。從而判斷兩種試劑做RhD陰性確認試驗的一致性和必要性。方法選取2017年1月至2017年4月所檢測出的RhD弱D型做回顧性檢查，發(fā)現(xiàn)RhD弱D型一例，通過初篩疑為Rh陰性，分別用兩種抗D（IgM+IgG）血型定型試劑（單克隆抗體）做抗人球蛋白試驗。結(jié)果兩種試劑一種做出的確認結(jié)果為RhD陰性，另一種試劑做出的結(jié)果為RhD弱D型。結(jié)論不同的試劑廠家的試劑對弱D的檢測能力不盡相同，所具備的檢測抗原表位的種類也不盡完全相同，所以用不同的廠家的試劑檢測弱D是有必要的。

RhD陰性確認試驗；弱D檢測

Rh血型系統(tǒng)是輸血醫(yī)學(xué)中僅次于ABO系統(tǒng)的第二大血型系統(tǒng)。臨床上，D抗原是Rh抗原中免疫原性最強的抗原，也是最具有臨床意義的抗原，Rh系統(tǒng)一般只作D抗原鑒定，凡帶有D抗原者稱為Rh陽性，不帶D抗原稱為Rh陰性。但弱D型紅細胞與某些抗D試劑在鹽水介質(zhì)中不發(fā)生凝集，而在間接抗球蛋白試驗中發(fā)生凝集。因此，當在鹽水介質(zhì)中發(fā)現(xiàn)紅細胞與IgM抗D不凝集時，不應(yīng)立即鑒定為RhD陰性，需進一步排除弱D型的可能。在臨床獻血中，任何獻血者被檢出Rh弱陽性，都應(yīng)做為Rh陽性對待，本單位多次檢出RhD弱D的標本，但同時也發(fā)現(xiàn)有兩種試劑檢測出現(xiàn)不同結(jié)果的情況，個人認為用兩種不同廠家的試劑鑒定可以提高弱D的檢出率，保障輸血安全?，F(xiàn)將同一份標本兩種不同廠家試劑得出不同結(jié)果報告如下。

1 所用試劑

初篩試驗選用北京金豪生產(chǎn)的抗D（IgM）血型定型試劑；

確認試驗選用加拿大Dominion Biologicals Limited生產(chǎn)的抗D（IgM+IgG）血型定型試劑（單克隆抗體）；英國Millipore生產(chǎn)的抗D（IgM+IgG）血型定型試劑（單克隆抗體）。

血型血清學(xué)方法：按試劑說明書采用鹽水法，抗人球蛋白法。

2 方法與結(jié)果

2.1 鹽水法

2.1.1 用生理鹽水配制3%～5%的獻血者紅細胞懸液。

2.1.2 取標記清晰的潔凈試管，加入兩滴抗D（IgM）血型定型試劑（單克隆抗體）。

2.1.3 再向試管中加入一滴3%～5%的待測紅細胞懸液。

2.1.4 充分混勻試管中的內(nèi)容物。

2.1.5 900～1000 g 離心15秒。

2.1.6 輕搖試管，輕輕重懸紅細胞，肉眼觀察試管底部是否出現(xiàn)凝集。

2.1.7 結(jié)果為無肉眼可見凝集。

2.2 間接抗人球蛋白實驗

2.2.1 用生理鹽水配制3%～5%的獻血者紅細胞懸液。

2.2.2 取標記清晰的潔凈試管兩支，分別加入Dominion Biologicals Limited生產(chǎn)的抗D（IgM+IgG）血型定型試劑（單克隆抗體）和英國Millipore生產(chǎn)的抗D（IgM+IgG）血型定型試劑（單克隆抗體）兩滴。

2.2.3 再分別向兩支試管中加入一滴3%～5%的獻血者紅細胞溶液。

2.2.4 充分混勻后，37℃孵育30分鐘。

2.2.5 生理鹽水洗滌紅細胞三次。

2.2.6 末次洗滌后控干鹽水。

2.2.7 向試管中加入兩滴抗人球蛋白試劑，并充分混勻。

2.2.8 900～1000g離心15秒鐘。

2.2.9 輕搖試管，輕輕重懸紅細胞，肉眼觀察試管底部是否出現(xiàn)凝集。出現(xiàn)凝集為陽性；無凝集加入IgG致敏的試劑紅細胞觀察結(jié)果是否有效，若IgG致敏的試劑紅細胞凝集則結(jié)果有效為陰性。

2.2.10 試驗結(jié)果

英國Millipore生產(chǎn)的抗D（IgM+IgG）血型定型試劑（單克隆抗體）出現(xiàn)肉眼可見凝集。Dominion Biologicals Limited生產(chǎn)的抗D（IgM+IgG）血型定型試劑（單克隆抗體）未出現(xiàn)凝集，加入IgG致敏的試劑紅細胞后紅細胞凝集

3 討 論

根據(jù)以上結(jié)果，獻血者的紅細胞在鹽水介質(zhì)中與初篩試劑呈陰性反應(yīng)，而用抗人球蛋白試驗，與英國Millipore生產(chǎn)的抗D（IgM+IgG）血型定型試劑（單克隆抗體）呈陽性反應(yīng)，與加拿大Dominion Biologicals Limited生產(chǎn)的抗D（IgM+IgG）血型定型試劑（單克隆抗體）呈陰性反應(yīng)，個人認為：

1、在對獻血者血型檢測中對RhD弱D型的確認非常重要，因為Rh弱D型雖然抗原性較弱，但它容易產(chǎn)生抗-D抗體，Rh陰性人接受Rh弱陽性輸血后，至少20%要對D抗原發(fā)生致敏，在第二次體內(nèi)接觸此抗原會發(fā)生溶血反應(yīng)，因此如果被檢出獻血者是Rh弱D型，應(yīng)把它當做Rh陽性看待，不可以輸給Rh陰性受血者，但是對于受血者懷疑為Rh弱D型，則可不必做RhD弱D型的確認試驗，應(yīng)看做Rh陰性，只可接受Rh陰性血液。

2、對于兩種試劑檢測結(jié)果哪個更趨向于正確沒有做討論，因為對于獻血者的血來說，不能確定為Rh陰性的都當做RhD陽性來對待，對于受血者都當做RhD陰性來對待。

[1] 孫國棟,王小平.Rh血型系統(tǒng)弱D及部分D研究進展.臨床輸血與檢驗.2007,9(2):183-185

[2] 蘭炯采,張德梅,張印則,等.再論Rh陰性患者的科學(xué)安全輸血.中國輸血雜志,2009,22(5):341-342

R446.5

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ISSN.2095-8242.2017.38.7453.01

本文編輯：王雨辰