(河南省人民醫(yī)院，河南 鄭州 450003)

塞來(lái)昔布膠囊是由Pfizer Pharmaceuticals LLC(輝瑞)開(kāi)發(fā)，于2003年8月獲CFDA批準(zhǔn)在中國(guó)進(jìn)口注冊(cè)上市。主要用于緩解骨關(guān)節(jié)炎、成人類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎的癥狀和體征及治療成人急性疼痛。

查閱相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)資料[1-7]，塞來(lái)昔布在生理pH值范圍內(nèi)的水性介質(zhì)中幾乎不溶，溶出度檢查采用槳法、50 rpm，但選擇了非生理pH12.0的0.04 mol/L磷酸三鈉溶液為溶出介質(zhì)，并添加1%十二烷基硫酸鈉(SLS)。因此，本文在pH12.0的磷酸三鈉溶液的溶出介質(zhì)中，考察不同溶出條件對(duì)塞來(lái)昔布膠囊(200 mg)體外溶出曲線(xiàn)的影響，包括槳法(或加沉降籃)、籃法、表面活性劑SLS的濃度等。

1 材料與方法

1.1 材料

磷酸三鈉(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；氫氧化鈉(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；微孔濾膜(混合膜0.45μm，上海市新亞凈化器件廠(chǎng))；一水乳糖(Foremost Farms，USA)；交聯(lián)羧甲基纖維素鈉(FMC公司)；聚維酮K30(BASF公司)；硬脂酸鎂(安徽山河藥用輔料股份有限公司)；十二烷基硫酸鈉(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；西樂(lè)葆(輝瑞制藥有限公司，M07166)；塞來(lái)昔布對(duì)照品(深圳健興醫(yī)藥科技有限公司，TLC，99.9%)；純化水。

溶出試驗(yàn)儀(RCZ-8M，天大天發(fā)科技有限公司)；紫外分光光度計(jì)(UV-2550，島津中國(guó))。

1.2 測(cè)定方法

1.2.1 波長(zhǎng)的選擇 分別配制輔料和膠囊殼空白溶液及對(duì)照品溶液，在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描各配制溶液，并記錄光譜圖。

輔料空白溶液：稱(chēng)取乳糖50 mg、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉10 mg、聚維酮K30 10 mg、硬脂酸鎂10 mg和十二烷基硫酸鈉10 mg至1 000 mL量瓶中，加適量溶出介質(zhì)超聲10 min后稀釋至刻度，濾過(guò)，即得。

膠囊殼空白溶液：按照《中國(guó)藥典》2015版通則中“0931溶出度與釋放度測(cè)定法”，取6粒膠囊，除盡膠囊內(nèi)容物，置一個(gè)溶出杯中，溶出介質(zhì)1 000 mL，攪拌、溶解后，濾過(guò)，即得。

對(duì)照品溶液：取塞來(lái)昔布對(duì)照品約20 mg，精密稱(chēng)定，至100 mL量瓶中，加溶出介質(zhì)溶解后稀釋至刻度，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取5 mL對(duì)照品儲(chǔ)備液至100 mL量瓶中，配制成約10μg/mL對(duì)照品溶液。

1.2.2 檢測(cè)方法的驗(yàn)證 采用配制的對(duì)照品溶液或儲(chǔ)備液，分別進(jìn)行濾膜吸附、精密度、溶液穩(wěn)定性和回收率等試驗(yàn)。

1.2.3 線(xiàn)性、范圍 分別精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8 mL至10 mL量瓶中，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，配制一系列濃度的對(duì)照品溶液，在選定波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值A(chǔ)，以吸光度A為縱坐標(biāo)、濃度C為橫坐標(biāo)，做線(xiàn)性回歸，并記錄線(xiàn)性方程和回歸系數(shù)。

1.2.4 溶出曲線(xiàn)的測(cè)定 參考FDA藥物溶出數(shù)據(jù)庫(kù)收載的溶出方法，按照《中國(guó)藥典》2015版通則0931溶出度與釋放度測(cè)定法和“普通口服固體制劑溶出曲線(xiàn)測(cè)定與比較指導(dǎo)原則”，采用RCZ-8M溶出儀，1 000 mL溶出介質(zhì)，在10、20、30、45、60、120 min時(shí)間點(diǎn)各取5 mL，濾過(guò)，測(cè)定吸光度，按外標(biāo)法計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)溶出量；考察不同溶出介質(zhì)(介質(zhì)1：含0%SLS；介質(zhì)2：含1%SLS)、溶出方法(即：槳法、50 rpm、1%SLS；槳法、50 rpm、0%SLS；槳法、50 rpm、0%SLS、沉降籃；籃法、75 rpm、0%SLS)對(duì)塞來(lái)昔布膠囊溶出度的影響。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的確定(見(jiàn)圖1)

圖1 各樣品溶液在200～400 nm之間的光譜圖(A:對(duì)照品；B:輔料空白；C：膠囊殼空白)

由光譜圖1可知，塞來(lái)昔布在252 nm處有吸收峰，而輔料和膠囊殼空白溶液在該波長(zhǎng)處幾乎無(wú)吸收。結(jié)果表明，輔料和膠囊殼不干擾塞來(lái)昔布的溶出度測(cè)定。

2.2 濾膜吸附

對(duì)照品溶液濾過(guò)前和濾過(guò)不同體積續(xù)濾液的吸光度值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.53%，表明濾膜幾乎對(duì)塞來(lái)昔布不吸附，對(duì)塞來(lái)昔布測(cè)定的影響不顯著。

2.3 精密度

對(duì)照品溶液，連續(xù)測(cè)定6次的吸光度值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.66%，表明紫外可見(jiàn)分光光度儀的精密度良好。

2.4 穩(wěn)定性

對(duì)照品溶液在0、1、2、4、6、24 h吸光度測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.42%，表明塞來(lái)昔布在pH12.0介質(zhì)中24 h內(nèi)是穩(wěn)定的。

2.5 回收率

采用槳法、50 rpm、1 000 mL的溶出介質(zhì)，投入塞來(lái)昔布膠囊1粒，攪拌2 h后停止，即得塞來(lái)昔布膠囊溶液。精密量取該溶液4 mL至10 mL量瓶，9份，分別加入精密量取的對(duì)照品儲(chǔ)備液3、3.5、4.5 mL，充分搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液0.5 mL至10 mL量瓶中，配制成低、中、高3個(gè)濃度的樣品溶液。依法測(cè)定，計(jì)算回收率(見(jiàn)表1)。由表1中結(jié)果可知本方法準(zhǔn)確度良好。

表1 溶出度回收率試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

2.6 線(xiàn)性范圍(見(jiàn)圖2、3)

圖2 塞來(lái)昔布在pH12.0、0%SLS介質(zhì)中對(duì)照品溶液線(xiàn)性關(guān)系圖

圖3 塞來(lái)昔布在pH12.0、1%SLS介質(zhì)中對(duì)照品溶液線(xiàn)性關(guān)系圖

由圖2、3可知，溶出介質(zhì)中添加0%或1%的十二烷基硫酸鈉(SLS)，塞來(lái)昔布在4～16μg/mL濃度范圍內(nèi)與吸光度的線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.7 溶出曲線(xiàn)結(jié)果(見(jiàn)圖4)

圖4 不同溶出條件下塞來(lái)昔布膠囊體外溶出曲線(xiàn)圖

由圖4可知，塞來(lái)昔布膠囊采用槳法時(shí)，表面活性劑(SLS)對(duì)溶出行為影響不大，加用沉降籃后溶出反而稍有降低；采用籃法時(shí)，溶出變快。所考察溶出方法的溶出快慢順序依次是籃法>槳法、1%SLS ≈槳法、0%SLS>沉降籃。

3討論

研究發(fā)現(xiàn)，在pH12.0的溶出介質(zhì)中，由于膠囊殼自身的因素，如囊殼的漂浮等，籃法更易于塞來(lái)昔布膠囊的溶出，分析原因主要是膠囊殼在溶解過(guò)程中不會(huì)致使顆粒粘附并堆積于溶出杯底部，造成溶出變慢或溶出時(shí)間延長(zhǎng)的現(xiàn)象。在使用沉降籃時(shí)，并不能改善顆粒在溶出杯底部的堆積，反而溶出度最慢。

本研究使用紫外分光光度法測(cè)定塞來(lái)昔布膠囊體外溶出度，結(jié)果表明，輔料和膠囊殼不干擾溶出度測(cè)定；在4～16μg/mL范圍內(nèi)塞來(lái)昔布濃度與吸光度呈良好線(xiàn)性關(guān)系；樣品平均回收率為99.64%，RSD值<1%，方法準(zhǔn)確度良好，可方便、快速、準(zhǔn)確的測(cè)定塞來(lái)昔布膠囊的體外溶出曲線(xiàn)。FDA溶出數(shù)據(jù)庫(kù)及文獻(xiàn)中使用到的溶出介質(zhì)是pH12.0的磷酸三鈉溶液，文獻(xiàn)報(bào)道，塞來(lái)昔布在pH12.0溶出介質(zhì)中溶解度為322.5 mg/mL[2,8]，而其為非生理pH值，并且添加了表面活性劑SLS(1%、m/v)以達(dá)到藥物溶出漏槽條件；由于塞來(lái)昔布在生理相關(guān)介質(zhì)中的溶解度非常低，無(wú)法建立臨床上有意義的體內(nèi)外相關(guān)性[2,9]。因此，F(xiàn)DA溶出數(shù)據(jù)庫(kù)和文獻(xiàn)中使用到的pH12.0磷酸三鈉溶液(1%SLS、m/v)為溶出介質(zhì)，應(yīng)是西樂(lè)葆生產(chǎn)質(zhì)量控制的溶出方法，且可以降低SLS的濃度。

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