王 坤，趙學(xué)濤，任曉亮，魏媛媛

輻照紅細(xì)胞輸注對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血病化學(xué)治療患者血清IL-10、IL-6、TNF-α及IFN-γ的影響

王 坤，趙學(xué)濤，任曉亮，魏媛媛

目的 觀察急性淋巴細(xì)胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)患者化學(xué)治療(化療)期間輸注輻照紅細(xì)胞對(duì)血清白細(xì)胞介素-10(IL-10)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及干擾素-γ(IFN-γ)的影響。方法 收集2013年1月—2015年6月在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院血液科治療的初治誘導(dǎo)緩解治療階段的ALL 60例，隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，每組30例。兩組均在常規(guī)化療同時(shí)輸注去白懸浮紅細(xì)胞2單位，觀察組給予經(jīng)137Cs輻照去白懸浮紅細(xì)胞，對(duì)照組給予未經(jīng)輻照去白懸浮紅細(xì)胞。輸血前及輸血后1、7 d檢測(cè)比較兩組血清IL-10、IL-6、TNF-α及IFN-γ水平。結(jié)果 觀察組輸血前后各觀察指標(biāo)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。對(duì)照組輸血后1、7 d IL-10、IL-6水平較輸血前有顯著上升(P<0.01)；輸血后1 d TNF-α水平較輸血前顯著下降(P<0. 01)，輸血后7 d恢復(fù)至輸血前水平；輸血后1、7 d IFN-γ水平較輸血前明顯下降(P<0.01)。觀察組輸血后1、7 d IL-10和IL-6水平均低于對(duì)照組相同時(shí)點(diǎn)，TNF-α和IFN-γ水平高于對(duì)照組相同時(shí)點(diǎn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論 輻照紅細(xì)胞輸注對(duì)ALL患者免疫功能抑制較輕，有助于改善患者免疫調(diào)節(jié)能力，減少化療相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生。

紅細(xì)胞輸注;γ射線；前體細(xì)胞淋巴母細(xì)胞白血病淋巴瘤；貧血

急性淋巴細(xì)胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)是造血干細(xì)胞再分化過程中于某一階段發(fā)生分化、阻滯、凋亡障礙的惡性增殖性疾病[1-2]，由于其正常造血系統(tǒng)功能受到了抑制，常伴發(fā)貧血。ALL多采用化學(xué)治療(化療)，化療藥物在抗腫瘤治療期間亦會(huì)對(duì)正常細(xì)胞造成損傷，從而進(jìn)一步加重貧血[3]，因而紅細(xì)胞輸注成為本病重要的輔助治療措施。有研究顯示，輸血能使機(jī)體抗腫瘤免疫系統(tǒng)主要為T淋巴細(xì)胞及某些細(xì)胞因子受到抑制，而應(yīng)用γ射線照射血液制品可滅活血液中殘存的少量具有免疫活性的淋巴細(xì)胞，避免其在受血者體內(nèi)增殖，并對(duì)血細(xì)胞功能不產(chǎn)生影響[4-7]。本研究旨在觀察ALL并貧血患者化療期間輸注輻照紅細(xì)胞對(duì)患者免疫功能的影響，以期為輻照血臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院血液科2013年1月—2015年6月確診的初治誘導(dǎo)緩解治療階段的ALL 60例，所有患者均經(jīng)骨髓、免疫組織化學(xué)免疫染色及病理等檢查確診。所有患者均行常規(guī)化療，化療前有頭暈、乏力及胸悶等貧血癥狀，查血紅蛋白呈中度貧血。將60例采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組兩組各30例。兩組性別及年齡等一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1，具有可比性。

1.2 治療方法 觀察組在化療同時(shí)輸注經(jīng)137Cs照射去白懸浮紅細(xì)胞2單位，采用德國(guó)Biobem GM 2000輻照儀，輻照劑量為25 Gy，輻照時(shí)間12 min；對(duì)照組在化療同時(shí)輸注未經(jīng)輻照去白懸浮紅細(xì)胞2單位。血液制品均來(lái)源于河北省血液中心。

1.3 觀察指標(biāo) 2組均于輸血前及輸血后1、7 d采取外周靜脈血2 ml，3500 r/min離心5 min后取上清液2 ml。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清白細(xì)胞介素-10(IL-10)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及γ-干擾素(IFN-γ)含量，并對(duì)兩組進(jìn)行比較。檢測(cè)試劑為深圳晶美生物公司產(chǎn)品，操作步驟按試劑說明書進(jìn)行。

表1 化學(xué)治療期間輸注不同紅細(xì)胞的急性淋巴細(xì)胞白血病2組一般資料比較(±s)

注：觀察組為化學(xué)治療期間輸注輻照紅細(xì)胞的急性淋巴細(xì)胞白血病患者，對(duì)照組為化學(xué)治療期間輸注未經(jīng)輻照紅細(xì)胞的急性淋巴細(xì)胞白血病患者

2 結(jié)果

輸血前2組各觀察指標(biāo)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。觀察組輸血前后各觀察指標(biāo)比較差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。對(duì)照組輸血后1、7 d IL-10、IL-6水平較輸血前有顯著上升(P<0.01)；輸血后1 d TNF-α水平較輸血前顯著下降(P<0. 01)，輸血后7 d恢復(fù)至輸血前水平；輸血后1、7 d IFN-γ水平較輸血前明顯下降(P<0.01)。觀察組輸血后1、7 d IL-10和IL-6水平均低于對(duì)照組相同時(shí)點(diǎn)，TNF-α和IFN-γ水平高于對(duì)照組相同時(shí)點(diǎn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表2。

表2 化學(xué)治療期間輸注不同紅細(xì)胞的急性淋巴細(xì)胞白血病2組輸血前后各觀察指標(biāo)比較(±s,pg/L)

注：觀察組為化學(xué)治療期間輸注輻照紅細(xì)胞的急性淋巴細(xì)胞白血病患者，對(duì)照組為化學(xué)治療期間輸注未經(jīng)輻照紅細(xì)胞的急性淋巴細(xì)胞白血病患者；與本組輸血前比較，bP<0.01；與對(duì)照組相同時(shí)點(diǎn)同一指標(biāo)比較，dP<0.01

3 討論

3.1 異體血輸注對(duì)ALL患者免疫功能影響 盡管紅細(xì)胞輸注可緩解ALL患者貧血癥狀，但輸血亦會(huì)給受血者帶來(lái)免疫調(diào)節(jié)方面影響。近年腫瘤患者化療期間輸血受到較高重視，輸血與免疫功能關(guān)系越來(lái)越引起關(guān)注。目前血液輸注以成分輸血為主，紅細(xì)胞輸注以去白懸浮紅細(xì)胞為主，輸注過濾掉白細(xì)胞的血液制品能極大降低受血者的致病風(fēng)險(xiǎn)[8]。去白懸浮紅細(xì)胞液中淋巴細(xì)胞去除率為99.9%，但仍有一小部分淋巴細(xì)胞殘存并對(duì)受血者的免疫反應(yīng)起抑制作用[9]。既往研究經(jīng)過臨床試驗(yàn)及基礎(chǔ)科學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，異體血輸注對(duì)研究對(duì)象免疫系統(tǒng)有著重要的影響，包括炎癥反應(yīng)及固有免疫失調(diào)，導(dǎo)致機(jī)體對(duì)微生物易感性增加及受血者細(xì)胞(T細(xì)胞及自然殺傷細(xì)胞)對(duì)腫瘤防御能力下調(diào)，并能引起癌癥的復(fù)發(fā)及術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生[10-11]。接受骨髓移植后患者在輸注普通去白懸浮紅細(xì)胞后并發(fā)癥、細(xì)菌感染、移植物抗宿主反應(yīng)均增加[12]。

血液制品引起免疫抑制機(jī)制比較復(fù)雜，輸入去白懸浮紅細(xì)胞后會(huì)引發(fā)IL-6、IL-10及TNF-α的釋放，且降低脂多糖誘發(fā)TNF-α釋放，并導(dǎo)致調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory cell, Treg)活化[13]。Treg可以抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)，從而發(fā)揮促癌作用。正常人體內(nèi)Treg細(xì)胞約占CD4+T細(xì)胞總量的5%～10%，CD4+T輔助細(xì)胞與高濃度白細(xì)胞介素-2(IL-2)受體共表達(dá)，阻斷IL-2產(chǎn)生，并導(dǎo)致輔助性T淋巴細(xì)胞(Th)1功能障礙。非特異性抗原如脂多糖可激活Treg細(xì)胞，并使之活化，通過Toll樣受體4信號(hào)通路使機(jī)體產(chǎn)生免疫抑制。除殘存淋巴細(xì)胞以及生物活性細(xì)胞因子外，普通的去白懸浮紅細(xì)胞液中還包含非極性脂肪酸、類花生酸、促炎性溶血磷脂酰膽堿等物質(zhì)，這類物質(zhì)可調(diào)整自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)與T細(xì)胞活性，并起著NK細(xì)胞趨化因子的作用。NK細(xì)胞為正向免疫調(diào)節(jié)的淋巴樣細(xì)胞，可殺傷腫瘤細(xì)胞[14-15]。IFN-γ可通過多種途徑直接或間接增加NK及巨噬細(xì)胞的殺傷毒性[16]，且供血者的免疫系統(tǒng)內(nèi)包括IgE在內(nèi)的免疫球蛋白抗體會(huì)隨著血液進(jìn)入受血者體內(nèi)，IgE可與機(jī)體嗜堿粒細(xì)胞及肥大細(xì)胞等結(jié)合，并進(jìn)一步引起相應(yīng)的變態(tài)反應(yīng)[17]。

同種異體血輸入，受血者以Th2免疫應(yīng)答為主，相應(yīng)的Th1免疫應(yīng)答進(jìn)一步下調(diào)，進(jìn)而受血者的細(xì)胞免疫受到抑制。輸血可抑制Th1細(xì)胞增生，使Th1類細(xì)胞因子的合成下降，免疫活性被抑制[18]。INF-γ、TNF-α細(xì)胞因子由Th1細(xì)胞產(chǎn)生，介導(dǎo)抗腫瘤免疫反應(yīng)。IL-10及IL-6細(xì)胞因子由Th2細(xì)胞產(chǎn)生，是一類具有多樣活性的細(xì)胞因子，由淋巴細(xì)胞以及單核-巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生，可進(jìn)一步誘導(dǎo)B型淋巴細(xì)胞進(jìn)行分化，進(jìn)而參與機(jī)體的免疫應(yīng)激過程[19]，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。有研究顯示，IL-10及IL-6細(xì)胞因子表達(dá)與組織損傷程度呈正相關(guān)，是組織損傷早期較為敏感的標(biāo)志物，與臨床繼發(fā)的嚴(yán)重并發(fā)癥密切相關(guān)[20]。本研究結(jié)果提示，對(duì)照組輸注未經(jīng)輻照的紅細(xì)胞后，血清中IL-10及IL-6水平均有所上升，而抑制腫瘤生長(zhǎng)的INF-γ及TNF-α水平有所下降。提示ALL患者化療同時(shí)輸注異體未輻照紅細(xì)胞對(duì)機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)可能產(chǎn)生負(fù)性調(diào)節(jié)作用。

3.2 輻照紅細(xì)胞輸注治療原理 輻照紅細(xì)胞是利用放射性同位素137Cs在衰變過程中產(chǎn)生的γ射線，穿透有核細(xì)胞，使細(xì)胞核產(chǎn)生不可逆的DNA損傷，并干預(yù)其正常修復(fù)，進(jìn)而使淋巴細(xì)胞有絲分裂的活性喪失，停止增殖。γ射線輻照作用在瞬間發(fā)生，輻照后殺傷作用消失，血液成分并無(wú)放射活性，因此對(duì)受血體無(wú)任何放射殺傷作用。本研究中所用的輻照紅細(xì)胞經(jīng)γ射線照射，對(duì)血液中殘存的淋巴細(xì)胞進(jìn)行滅活，受血者不會(huì)對(duì)其產(chǎn)生進(jìn)一步免疫排斥。本研究結(jié)果顯示，觀察組輸血前后血清IL-10、IL-6、INF-γ及TNF-α水平無(wú)明顯改變，說明輻照紅細(xì)胞輸注對(duì)ALL患者免疫功能影響較小。輻照血輸注已在國(guó)外得到廣泛應(yīng)用，但在我國(guó)尚未得到普及。臨床上對(duì)造血干細(xì)胞、實(shí)體器官移植以及惡性腫瘤、免疫缺陷、年齡偏大或幼小等體弱患者進(jìn)行血液輸注時(shí)均應(yīng)考慮輸注經(jīng)輻照后的血液[21]。

總之，輻照紅細(xì)胞輸注對(duì)ALL患者免疫功能抑制較輕，有助于改善患者免疫調(diào)節(jié)能力，減少化療相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生。

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河北省衛(wèi)生廳課題(ZD20140345)

050000 石家莊，河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院輸血科

R457.1

B

1002-3429(2017)02-0102-04

10.3969/j.issn.1002-3429.2017.02.030

2016-09-22 修回時(shí)間：2016-10-21)