馬文典 王 弘*

（1 中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院，遼寧 沈陽 110004；2 本溪市中心醫(yī)院，遼寧 本溪 117000）

CD4+CD25high+CD127low+與兒童免疫性血小板減少癥相關性的研究

馬文典1,2王 弘1,2*

（1 中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院，遼寧 沈陽 110004；2 本溪市中心醫(yī)院，遼寧 本溪 117000）

目的 研究CD4+CD25high+CD127low+在兒童免疫性血小板減少癥相關性的研究。方法 選擇中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院小兒血液科于2015年1月至2016年6月就診2～6歲兒童60例。觀察組：重度和極重度血小板減少癥患兒30例。對照組：30例健康兒童做正常對照。60例兒童均采外周血為標本行檢測調節(jié)性T細胞中CD4+CD25high+CD127low+。結果 對照組30例正常兒童以上觀察指標均在正常值范圍。觀察組30例血小板減少癥患兒調節(jié)性T細胞中CD4+CD25high+CD127low+與正常兒童組比較P＞0.05無統(tǒng)計意義。結論 調節(jié)性T細胞CD4+CD25high+CD127low+在兒童免疫性血小板減少癥的發(fā)病中無明顯影響。

調節(jié)性T細胞；CD4+CD25high+CD127low+；兒童免疫性血小板減少癥

免疫相關性血小板減少癥（immune related thrombocytopenia， ITP）是一種自身免疫性血小板減少性疾病，由于自身免疫功能異常，導致患兒產(chǎn)生抗血小板自身抗體，使血小板在單核-巨噬細胞系統(tǒng)被大量吞噬，從而引起血小板減少[1]。兒童免疫性血小板減少癥的發(fā)生，與機體免疫功能紊亂致血小板生成減少及破壞增加相關。調節(jié)性T細（regulatory T cell，treg）是人體內具有免疫調節(jié)功能的特殊T細胞亞群，其對維持機體免疫平衡狀態(tài)起重要作用，具有免疫抑制能力，維持著對自身抗原的耐受，在防止自身免疫性疾病方面具有重要作用[2]。CD4+CD25high+CD127low+是在Treg家族中的一群，主要通過降低機體對抗原的免疫應答來保持機體的自身免疫耐受，具有免疫抑制和免疫應答低下兩大特征。報道有些調節(jié)性T細胞在兒童免疫性血小板減少癥中的作用相關，本研究選取調節(jié)T細胞中CD4+CD25high+CD127low+對此做初步探討。

1 對象與方法

1.1 研究對象：選擇中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院小兒血液科于2015年1月至2016年6月就診2～6歲兒童60例。隨機分為，觀察組：血小板減少癥患兒30例。治療前血小板計數(shù)為（1～25）×109/L。對照組：健康兒童30例，血小板計數(shù)為（100～300）×109/L。

1.2 ITP患兒依照病情分為四度。輕度：50×109/L＜PLT＜100× 109/L，只在外傷后出血；中度：25×109/L＜PLT≤50×109/L，尚無廣泛出血；重度：10×109/L＜PLT≤25×109/L，見廣泛出血，外傷處出血不止；極重度：PLT＜10×109/L自發(fā)性出血不止，危及生命[3]。目前臨床中輕中度ITP患兒病情可以得到自然緩解，故本研究中選取30例患兒均為中重度ITP患兒，其中重度18例，極重度12例。

1.3 方法

1.3.1 入組條件：30例患兒均臨床診斷為兒童免疫性血小板減少癥，無其他疾病同時存在。在采集標本前均未接受任何糖皮質激素等相關免疫治療。

1.3.2 標本采集：60例兒童均采外周血為標本，采集靜脈血2～3 mL，1 g/L肝素鈉抗凝，室溫下放置待用，于3 h內檢測。

1.3.3 檢測方法：運用血細胞簇分化抗原檢測調節(jié)性T細胞：CD4+CD25high+CD127low+。

1.4 統(tǒng)計方法：用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，采用χ2檢驗，P＜0.05具有統(tǒng)計學差異。

2 結 果

2.1 比較重度與極重度ITP患兒和健康兒童外周血中調節(jié)性T細胞：CD4+CD25high+CD127low+的變化（表1～2）用配對t檢驗。

表1 兩組患兒比較（

表1 兩組患兒比較（

注：健康兒童與重度ITP患兒CD4+CD25high+CD127low+比較，P＞0.05，差異沒有統(tǒng)計學意義

+CD25high+CD127low+(%) PLT×109健康兒童 5.1±1.92 215.6±40.7重度患兒 4.8±1.32 19.34±3.54 P值 ＞0.05觀察指標 CD4

表2 兩組患兒比較（

表2 兩組患兒比較（

注：健康兒童與極重度ITP患兒比較CD4+CD25high+CD127low+，P＞0.05，差異沒有統(tǒng)計學意義。說明：血小板減少癥患兒調節(jié)性T細胞CD4+CD25high+CD127low+與血小板減少程度無關

+CD25high+CD127low+(%) PLT×109健康兒童 5.1±1.92 215.6±40.7極重度患兒 4.4±1.15 7.31±2.63 P值 ＞0.05觀察指標 CD4

3 討 論

兒童血小板減少癥的發(fā)生主要與機體免疫功能紊亂導致的血小板破壞增加及生成減少相關。調節(jié)性T細（regulatory T cell，treg）在人體內可能主要介導免疫耐受，是免疫及炎性反應抗原暴露產(chǎn)生的結果[4-5]。兒童發(fā)病率約1.9/10萬～6.4/10萬，重要臟器如顱內出血仍然是ITP危及生命的原因[6]。

目前認為ITP的發(fā)病是一個多步驟的過程，T細胞、B細胞和抗原遞呈細胞（APC）等在其發(fā)病過程中均發(fā)揮重要作用。Treg可直接或間接通過與抗原提呈細胞或周圍環(huán)境中的其他細胞（內皮細胞、平滑肌細胞）而與靶淋巴細胞相互作用。這些反應由Tregs細胞表面分子介導.如轉化生長因子β、細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4或胞間黏附分子[6]。有學者認為在效應性T細胞和Treg細胞之間存在著一種類似于陰陽平衡的關系，也就是說人體內環(huán)境穩(wěn)態(tài)的維持不僅與Treg細胞的數(shù)量和功能相關 ，同時可能與 Treg細胞和活化的效應性 T細胞間維持一定的比值有關[7]。大多數(shù)研究表明，與正常對照相比，ITP患者尤其是活動性ITP患者和（或）血小板特別低的患者，外周Treg數(shù)量明顯減少；當ITP患者處于緩解期時，Treg數(shù)量會增高。針對血小板特異性抗體自身反應性CD4+T 細胞的激活主要在脾臟發(fā)生，并以記憶性T 細胞形式釋放到外周血中，通過釋放細胞因子促進自身反應性B 細胞產(chǎn)生特異性抗血小板抗體，從而破壞血小板[8]。

本研究表明血小板減少癥患兒與正常兒童比較外周血CD4+CD25high+CD127low+與正常兒童相比 無統(tǒng)計意義。兒童血小板減少癥的病因很復雜，深入研究調節(jié)性T細胞在兒童血小板減少癥患者發(fā)病機制中的作用 ，具有非常重要的臨床意義。對此課題的探討目前尚需要進一步臨床數(shù)據(jù)研究。

[1] McFarland J.Path ophysiology of platelet destruction in immune (idiopathic) thrombocytopenic purpura[J].Blood Rev,2002, 16(1):1-2.

[2] Fehervari Z,Sakaguchi S.CD4 Tregs and immune con trol[J].J Clin Invest,2004,114(9):1209-1217.

[3] 胡亞美.諸福棠實用兒科學.下冊[M].7版.北京:人民衛(wèi)生出版社, 2002.

[4] Kowalski RJ,Post DR,Mannon RB,et al,Assessing relative risks of infection:A meta-analysis using an immune function assay[J]. Transplantation,2006,82(5):663.

[5] Van GelderT,Klupp J,Kavanau K,et al.Novel mechanisms of action of mycophenolic acid {MPA}lnhibition ofexpressionof CD28 and CD154 costimulatory molecules and and induction of apoptosis in vivo in humans after treatment with mycophenolate mofetil (MMF) [J].Transplantation,2000,69(5):S393.

[6] Barfetil MJ,Gummert JF,VanGelderT,et al.Assessment of mechanisms ofaction of immunosuppresive drugs using novel whole blood assays[J].Transplant Proc,2001,33(3):2119.

[7] Antony PA,Restifo NP.CD4 CD 25 T regulatory cells,immunotherapy of cancer,and interleuk in -2[J].J Immunother, 2005, 28(2):120-128 .

[8] Kuwana M,Okazaki Y,Kaburaki J,et al.Spleen is a primary site for activation of glycoprotein b-a-reactive T and B cells in patients with immune thrombocytopenic purpura[J].J Immunol,2 002,168(7):3675-3682.

CD4+CD25high+CD127low+Immune Thrombocytopenia Associated with Children's Study

MA Wen-dian1,2, WANG Hong1,2

(1 Shengjing Hospital Affiliated to China Medical University, Shenyang 110004, China; 2Benxi Center Hospital, Benxi 117000, China)

Objective Research on CD4+CD25high+CD127low+ in children immune thrombocytopenia correlation research.MethodsChoose shengjing hospital affiliated to China Medical University pediatric onset in hospital from January 2015 to June 2015 60 2-6 years old children. Observation group: thrombocytopenia with 30. Control group: 30 healthy children as normal control. 60 children have line detection of regulatory T cells in peripheral blood of specimen: CD4+CD25high+CD127low+.ResultsControl group: 30 normal children above observation indexes were in normal range. In observation group: CD4+CD25high+CD127low, two groups of patients were compared with no statistical significance (P＞0.05).ConclusionCD4+CD25high+CD127low sample enough T cells may not be in the children's immunity play a role in the pathogenesis of thrombocytopenia.

Regulatory T cells; CD4+CD25high+CD127low; Children immune thrombocytopenia

R725.5

B

1671-8194（2017）06-0003-02

*通訊作者:E-mail: wang_hong354@aliyun.com