李 林 綜述，杜劍平 綜述，李曉松 綜述,譚 瀟,2 審校，鄭 軍△ 審校

(1.三峽大學(xué)肝膽胰外科研究所/三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院普外科，湖北宜昌 443002；2.三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院/腫瘤微環(huán)境與免疫治療湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖北宜昌 443002)

·綜 述·

KLK10作為消化系統(tǒng)腫瘤預(yù)后因子的研究進(jìn)展

李 林1綜述，杜劍平1綜述，李曉松1綜述,譚 瀟1,2審校，鄭 軍1△審校

(1.三峽大學(xué)肝膽胰外科研究所/三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院普外科，湖北宜昌 443002；2.三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院/腫瘤微環(huán)境與免疫治療湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖北宜昌 443002)

人組織激肽釋放酶10;消化系統(tǒng)；腫瘤預(yù)后因子

人組織激肽釋放酶10(KLK10)又稱(chēng)NES1(normal epithelial cell specific-1)屬于人類(lèi)組織激肽釋放酶家族15個(gè)成員中的一員，在1996年由Liu等[1]利用差異雜交法從變異乳腺細(xì)胞株76R-30中分離出來(lái)。與組織激肽釋放酶家族其他成員一樣，KLK10的分泌也是經(jīng)歷了從前體到活性形式的轉(zhuǎn)變，其不同之處表現(xiàn)為KLK10為單鏈肽形式；其次，在其N(xiāo)末端比其他KLKs多3個(gè)氨基酸，從而呈現(xiàn)出KLK10具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)[2]。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，KLK10可在許多上皮組織中表達(dá)，如：扁桃體、食管、唾液腺、性腺等，并普遍存在于細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞間質(zhì)中，在各類(lèi)體液中如：乳汁、精液、羊水、腦脊液等均可檢測(cè)到[3-4]。該基因參與了正常上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)及生理調(diào)控[5]，但具體作用機(jī)制目前還不清楚。盡管KLK10在正常生理功能的調(diào)節(jié)方面仍存在許多未知，但隨著人們對(duì)KLKs基因家族研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)KLK10在多種腫瘤組織中存在異常表達(dá)的情況。早期研究發(fā)現(xiàn)KLK10在乳腺癌、前列腺癌、宮頸癌、急性淋巴細(xì)胞白血病等腫瘤細(xì)胞中存在表達(dá)下調(diào)，這為多種腫瘤的預(yù)后評(píng)估提供了非常有價(jià)值的信息。參與KLK10異常表達(dá)的調(diào)控機(jī)制可能有：(1)激素調(diào)節(jié)、視黃醇、類(lèi)維生素A途徑[6]；(2)RAS/MEK/ERK及PI3K/AKT信號(hào)通路途徑[7]；(3)CpG島超甲基化途徑等[8]。

近年來(lái)研究表明，KLK10被發(fā)現(xiàn)并推測(cè)可能將在消化系統(tǒng)中發(fā)揮腫瘤標(biāo)志物的重要作用，因此對(duì)目前仍處于姑息治療水平的消化系統(tǒng)惡性腫瘤具有十分重要的臨床意義。KLK10在腫瘤預(yù)后方面的應(yīng)用已成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)，本文旨在對(duì)其在消化系統(tǒng)腫瘤疾病的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為消化系統(tǒng)腫瘤的預(yù)后判斷及個(gè)性化治療方案的選擇提供一定的理論支持。

1 胃 癌

我國(guó)是胃癌高發(fā)地區(qū)，處于消化道惡性腫瘤的首位，且新發(fā)胃癌患者呈年輕化趨勢(shì)[9]。盡管各種手術(shù)治療方案和聯(lián)合化療方案在不斷發(fā)展和完善，但目前胃癌的預(yù)后仍然極差[10]，因此探尋有助于胃癌預(yù)后評(píng)估的理想指標(biāo)具有重要的臨床意義。隨著人們對(duì)KLK10基因表達(dá)與胃癌關(guān)系研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)KLK10參與了胃癌發(fā)生發(fā)展的多個(gè)過(guò)程。有研究表明在檢測(cè)KLK10基因于胃癌組織中的表達(dá)量時(shí)發(fā)現(xiàn)，KLK10基因的表達(dá)量下降或缺失與胃部腫瘤的發(fā)生具有相關(guān)性，黃瑋等[11]檢測(cè)胃癌組織中KLK10基因表達(dá)情況時(shí)發(fā)現(xiàn)，KLK10基因在胃癌組織中的表達(dá)量明顯低于正常組織，且組織惡性程度越高表達(dá)量越少甚至缺失，兩者陽(yáng)性率及表達(dá)強(qiáng)度均有顯著性差異，但KLK10基因在胃癌中的低表達(dá)與患者的性別、年齡、幽門(mén)螺桿菌感染等差異無(wú)顯著性。該研究小組在另一研究中檢測(cè)KLK10基因在胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)KLK10基因在正常胃上皮組織中大量表達(dá)，而在胃癌細(xì)胞系如HGC-27、MKN45、SGC-7901、AGS和MKN-28中表達(dá)降低或缺失。研究同時(shí)表明KLK10基因在不同胃癌細(xì)胞株中的表達(dá)量不同，并與胃癌細(xì)胞的增殖和遷移相關(guān)[12]。綜上研究說(shuō)明KLK10基因在胃癌的發(fā)生發(fā)展中起著一定的作用。

然而近來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)KLK10基因在胃癌組織中的表達(dá)也存在上調(diào)的情況。雷科鋒等[13]用cDNA微陣列檢測(cè)胃癌組織及正常胃黏膜標(biāo)本時(shí)發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中KLK10基因的表達(dá)較正常胃黏膜上調(diào)約10倍，隨后檢測(cè)KLK10基因的表達(dá)情況，其結(jié)果與cDNA微陣列實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同，KLK10 在胃癌組織中表達(dá)顯著上調(diào)。KLK10 的表達(dá)水平與腫瘤直徑、腫瘤浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及患者的總體生存率明顯相關(guān)。在另一項(xiàng)研究中，Xin等[14]通過(guò)運(yùn)用RT-PCR方法研究80例胃癌組織和80例正常胃組織中KLK10 mRNA表達(dá)情況，結(jié)果顯示在正常胃組織中僅能檢出低量或不能檢出KLK10的表達(dá)，而在胃癌組織中，57例標(biāo)本顯示KLK10表達(dá)為陽(yáng)性，23例KLK10表達(dá)為陰性。該研究認(rèn)為KLK10基因表達(dá)上調(diào)是胃癌患者的獨(dú)立預(yù)后因素，其對(duì)病情預(yù)后評(píng)估具有一定價(jià)值。目前暫無(wú)研究解釋KLK10基因表達(dá)在胃癌組織中究竟是上調(diào)還是下調(diào)，筆者認(rèn)為其可能與樣本類(lèi)型與容量、腫瘤惡化程度、參照對(duì)象等因素相關(guān)，值得進(jìn)一步深入探究?？傊?，以上研究說(shuō)明KLK10基因表達(dá)異常在胃癌早期診斷及預(yù)后方面體現(xiàn)出了極大的潛力，值得進(jìn)一步深入研究。

2 結(jié)直腸癌

雖已有少量蛋白質(zhì)或基因作為生物標(biāo)記物已用于結(jié)直腸癌的臨床預(yù)后評(píng)估，但這些指標(biāo)的準(zhǔn)確性及可靠性都不夠理想，因此發(fā)現(xiàn)有助于臨床決策的新的更可靠的標(biāo)志物是目前的重要任務(wù)。大量研究報(bào)告表明，KLK10在結(jié)直腸腫瘤的發(fā)生及發(fā)展中起著重要的作用。Alexopoulou 等[15]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，KLK10在腫瘤組織中的表達(dá)量顯著高于癌旁組織及正常組織，且與腫瘤的TNM分期及Dukes分期明顯相關(guān)；KLK10表達(dá)升高，患者無(wú)病生存率和總生存率降低。因此他們推測(cè)，KLK10可能是一種用于結(jié)直腸癌預(yù)后評(píng)估新指標(biāo)。Petraki等[16]研究小組運(yùn)用免疫組化實(shí)驗(yàn)方法發(fā)現(xiàn)，KLK10在腫瘤組織中的表達(dá)量也顯著高于癌旁組織及正常組織?？ㄆ仗m-Meier生存曲線(xiàn)和單因素分析表明，KLK10基因表達(dá)和腫瘤的臨床分期與無(wú)癥狀生存率和總生存率具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；通過(guò)Cox多因素分析表明，KLK10基因的表達(dá)量和腫瘤臨床分期越高，患者的無(wú)癥狀生存率和總生存率越低，表明KLK10與結(jié)直腸腫瘤的臨床分期是腫瘤預(yù)后評(píng)估的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素。另外Talieri等[17]選取了119例原發(fā)性結(jié)直腸癌樣本進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)KLK10表達(dá)量與TNM分期顯著相關(guān)，通過(guò)Kaplan-Meier生存曲線(xiàn)分析表明，KLK10低表達(dá)與更長(zhǎng)的無(wú)癥狀生存期和總生存期顯著相關(guān)；研究者認(rèn)為KLK10參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展并與結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，KLK10的表達(dá)可作為結(jié)直腸癌預(yù)后的標(biāo)志。綜上所述，KLK10在直腸癌診治及預(yù)后評(píng)估等方面體現(xiàn)出了巨大的潛在價(jià)值，KLK10參與了結(jié)腸癌發(fā)生與發(fā)展的過(guò)程，KLK10可能是結(jié)腸癌臨床預(yù)后判定的理想?yún)⒖贾笜?biāo)，為結(jié)直腸癌的臨床診治提供了新的方向與選擇。

3 肝 癌

盡管腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用和各種影像學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，特別是血清甲胎蛋白和超聲顯像用于肝癌高危人群的監(jiān)測(cè)，使肝癌能夠在無(wú)癥狀、無(wú)體征的亞臨床期被診斷，加之外科手術(shù)技術(shù)的成熟，以及各種局部非手術(shù)治療方法的發(fā)展，使肝癌的預(yù)后較過(guò)去有了明顯提高，但由于其惡性程度高、病程進(jìn)展快、預(yù)后極差，肝癌的診療仍是當(dāng)前急需解決的世界性醫(yī)學(xué)難題之一。作為在消化系統(tǒng)腫瘤中表現(xiàn)出巨大潛力的KLK10基因，目前在肝癌方面的文獻(xiàn)報(bào)道極少。曹虹等[18]發(fā)現(xiàn)KLK10 mRNA在肝癌組織中的表達(dá)水平明顯低于癌旁組織及正常肝組織中的表達(dá)，說(shuō)明KLK10的低表達(dá)與肝癌的發(fā)生密切相關(guān)。肝癌中KLK10 mRNA的表達(dá)水平與腫瘤大小、腫瘤數(shù)目(單個(gè)或多個(gè))、脈管癌栓均呈負(fù)相關(guān)；腫瘤的臨床分期越晚，KLK10 mRNA表達(dá)水平越低、患者的預(yù)后越差。這些結(jié)果表明KLK10的低表達(dá)或表達(dá)缺失與肝癌后期的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移具有密切關(guān)系，是判斷肝癌預(yù)后的良好指標(biāo)。另外Lu等[19]通過(guò)甲基化特異性PCR的方法檢測(cè)了49例肝癌細(xì)胞株和臨床病例樣本中的腫瘤組織和鄰近正常組織，發(fā)現(xiàn)KLK10基因在肝癌中存在異常甲基化的現(xiàn)象，KLK10基因的表達(dá)恢復(fù)能夠減少基質(zhì)非依賴(lài)性肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，表明KLK10基因失活是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要因素。雖然文獻(xiàn)中沒(méi)有提到KLK10對(duì)于肝癌預(yù)后評(píng)估有關(guān)的敘述，但是作為一種肝癌有潛力的生物指標(biāo)仍然具有更進(jìn)一步的研究?jī)r(jià)值?？梢?jiàn)，KLK10可能是一種較理想的臨床預(yù)后標(biāo)志物，應(yīng)用于臨床將極大提高預(yù)后判斷水平。

4 胰腺癌

由于胰腺具有獨(dú)特的解剖結(jié)構(gòu)和生物學(xué)特性，胰腺癌的診斷和治療都很困難，是嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的惡性腫瘤之一[20]。胰腺癌的發(fā)病率和死亡率近年來(lái)明顯上升，但發(fā)病機(jī)制至今尚未闡明，目前缺乏有效的早期診療方法，腫瘤細(xì)胞的擴(kuò)散轉(zhuǎn)移是胰腺癌患者死亡的重要原因[21-23]。盡管目前一些血清標(biāo)志物在胰腺癌的臨床診斷、治療監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估中起到了重要作用，但這些指標(biāo)的特異性和敏感性尚不能完全滿(mǎn)足臨床的需要，胰腺癌早期的確診率仍然不高，確診時(shí)多屬晚期，已喪失合適的治療時(shí)機(jī)[24-25]。因此臨床上需要更加敏感及特異的方法來(lái)提高胰腺癌的預(yù)后評(píng)估，為患者提供更好的治療時(shí)機(jī)。

雖然關(guān)于胰腺癌腫瘤標(biāo)志物的相關(guān)研究較多，但目前關(guān)于KLK10基因?qū)τ谝认侔┑臐撛趦r(jià)值方面的研究甚少[26]。Rückert等[27]研究發(fā)現(xiàn)，KLK10在胰腺癌組織中的表達(dá)大幅上調(diào)，并參與了胰腺癌的發(fā)生與發(fā)展的過(guò)程。多因素分析表明KLK10與KLK6共同表達(dá)時(shí)，患者的無(wú)癥狀生存期及總生存期較KLK10基因單一表達(dá)時(shí)明顯縮短，說(shuō)明KLK10參與胰腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程與KLKs基因家族其他成員具有一定的協(xié)同作用，但該研究未提及相關(guān)的協(xié)同作用機(jī)制。盡管目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于KLK10在胰腺癌方面的研究較少見(jiàn)，但隨著對(duì)KLK10基因的進(jìn)一步研究，將獲取更多與其相關(guān)的信息，明確腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制并能早期干預(yù)胰腺癌侵襲途徑，從而改善其預(yù)后。

盡管人們?cè)絹?lái)越重視對(duì)消化系統(tǒng)腫瘤疾病的研究，但這并沒(méi)有改變目前其早期診斷困難、預(yù)后差、病死率高的局面。傳統(tǒng)的血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物如甲胎蛋白、癌胚抗原、糖抗原19-9等均具有較高的臨床意義，在消化系統(tǒng)腫瘤的診治過(guò)程中具有非常重要的參考價(jià)值，為臨床工作者提供了巨大的幫助，但至今尚未有一種血清標(biāo)志物有足夠的敏感性和特異性用于消化道腫瘤的預(yù)后評(píng)估。隨著人們對(duì)于KLKs基因家族的研究越來(lái)越深入，KLKs基因家族在消化系統(tǒng)腫瘤中的差異表達(dá)使人們?cè)絹?lái)越確信KLKs基因家族在腫瘤的發(fā)生與發(fā)展中扮演著極其重要的角色[28]。雖然，KLK10 在消化系統(tǒng)腫瘤中的研究才經(jīng)歷不過(guò)短短數(shù)十年，且目前僅見(jiàn)免疫組織化學(xué)方面相關(guān)研究報(bào)道，其表達(dá)水平、檢測(cè)手段都存在許多疑問(wèn)與局限性，距離將其應(yīng)用于臨床仍然存在一定差距。但是基于KLKs基因家族目前在婦科腫瘤和前列腺癌方面取得的豐碩研究成果[29-30]，KLK10基因作為消化系統(tǒng)腫瘤特異性標(biāo)志物的應(yīng)用將得到極大促進(jìn)，其可能作為一種新的腫瘤預(yù)后因子，與其他生物學(xué)標(biāo)志物聯(lián)合應(yīng)用而極大提高疾病預(yù)后評(píng)估的特異性和敏感性，從而為患者提供更加個(gè)性化及針對(duì)性的治療決策，以期改變目前疾病預(yù)后極差的困境。

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10.3969/j.issn.1671-8348.2017.16.041

三峽大學(xué)腫瘤微環(huán)境與免疫治療湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放課題基金(2015KZLO4)；三峽大學(xué)人才科研啟動(dòng)基金(KJ2014B070)。 作者簡(jiǎn)介：李林(1990-)，在讀碩士，主要從事肝膽胰外科腫瘤的基礎(chǔ)與臨床研究?！?/p>

，E-mail：zhengjunpi@163.com。

R735

A

1671-8348(2017)16-2287-04

2017-01-22

2017-03-22)