董秋香，張?jiān)潞?，付萍萍，劉志瑋（保定市食品藥品檢驗(yàn)所，河北保定 071051）

氣相色譜法同時(shí)測(cè)定復(fù)方氨酚烷胺片中4種成分的含量

董秋香＊，張?jiān)潞?，付萍萍，劉志瑋（保定市食品藥品檢驗(yàn)所，河北保定 071051）

目的：建立同時(shí)測(cè)定復(fù)方氨酚烷胺片中對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏含量的方法。方法：采用氣相色譜法。色譜柱為HP-5石英毛細(xì)管柱，程序升溫，檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度為300℃，載氣為氮?dú)?，流速?.5 mL/min，分流比為20∶1，進(jìn)樣量為1 μL。結(jié)果：對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏檢測(cè)質(zhì)量濃度線性范圍分別為156.0～4 990.4、125.7～4 023.2、19.14～612.4、2.515～80.48 μg/mL（r均為0.999 9）；定量限分別為1.4、0.5、1.1、0.9 ng，檢測(cè)限分別為0.4、0.2、0.3、0.3 ng；精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn)的RSD＜2.0%；加樣回收率分別為99.59%～101.77%（RSD＝0.8%，n＝9）、99.56%～101.80%（RSD＝0.7%，n＝9）、98.44%～100.83%（RSD＝0.7%，n＝9）、100.05%～101.91%（RSD＝0.6%，n＝9）。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便快速、準(zhǔn)確可靠，適用于復(fù)方氨酚烷胺片中對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏的同時(shí)測(cè)定。

復(fù)方氨酚烷胺片；氣相色譜法；對(duì)乙酰氨基酚；鹽酸金剛烷胺；咖啡因；馬來(lái)酸氯苯那敏；含量

復(fù)方氨酚烷胺片是常見(jiàn)的抗感冒藥，用于緩解普通感冒及流行性感冒引起的發(fā)熱、頭痛、鼻塞、咽痛等癥狀，也可用于流行性感冒的預(yù)防和治療。本品為復(fù)方制劑，由對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏及人工牛黃組成，收載于《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)》[1]和國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)YBH06802005[2]?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中的含量測(cè)定分別采用滴定法和高效液相色譜法（HPLC）；滴定法操作煩瑣，易產(chǎn)生誤差，結(jié)果重復(fù)性差。該制劑中各成分的處方量、紫外吸收強(qiáng)度差異均較大，采用HPLC法測(cè)定其中主成分的含量，多為測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚、咖啡因或馬來(lái)酸氯苯那敏中1～3種成分的含量[3-6]，若同時(shí)測(cè)定4種成分的含量需采用雙波長(zhǎng)法[7]，無(wú)法實(shí)現(xiàn)真正意義上的同時(shí)檢測(cè)。因此，本試驗(yàn)采用氣相色譜法（GC）建立了同時(shí)測(cè)定該制劑中對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏含量的方法，以期為全面評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量提供參考。

1 材料

1.1 儀器

7820A型GC儀，包括氫火焰離子化檢測(cè)器、G4513A自動(dòng)進(jìn)樣器、EC Chrom Elite工作站（美國(guó)Agilent公司）；BP211D型電子天平（德國(guó)Sartorius公司）；DK-2000-ⅢLA型電熱恒溫水浴鍋（天津泰斯特儀器有限公司）。

1.2 藥品與試劑

復(fù)方氨酚烷胺片（A廠，批號(hào)：141028、141023、140414、140931、20130613、141020、20141007；B廠，批號(hào)：1410087、1410071、1411092；C廠，批號(hào)：1501241、1411071；D廠，批號(hào)：20150106、20140911；E廠，批號(hào)：140701；F廠，批號(hào)：141216；G廠，批號(hào)：1141241）規(guī)格均為12片/盒；鹽酸金剛烷胺對(duì)照品（批號(hào)：100426-201002，純度：100%）、對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品（批號(hào)：100018-201409，純度：99.9%）、咖啡因?qū)φ掌罚ㄅ?hào)：171215-200406，純度：100%）和馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品（批號(hào)：100047-200606，純度：99.7%）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；無(wú)水乙醇、三氯甲烷為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：HP-5石英毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；程序升溫：起始溫度為170℃，保持3 min，再以12℃/min升溫至260℃，保持2 min；檢測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器；檢測(cè)器溫度：300℃；載氣：氮?dú)?；流速?.5 mL/min；分流比：20∶1；進(jìn)樣量：1 μL。

2.2 溶液的制備

2.2.1 混合對(duì)照品溶液 稱取馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品50.30 mg，置于25 mL量瓶中，加無(wú)水乙醇溶解并定容，搖勻，作為馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品溶液；稱取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品124.76 mg、鹽酸金剛烷胺對(duì)照品100.58 mg、咖啡因?qū)φ掌?5.31 mg，置于25 mL量瓶中，加無(wú)水乙醇適量使溶解，再精密加入馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品溶液1 mL，加無(wú)水乙醇定容，搖勻，作為混合對(duì)照品貯備液。取上述混合對(duì)照品貯備液適量，置于25 mL量瓶中，加無(wú)水乙醇定容，搖勻，作為混合對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液 取樣品20片，精密稱定，研細(xì)，稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚125 mg），置于50 mL量瓶中，加無(wú)水乙醇適量，于80℃水浴加熱30 min，放冷至室溫，加無(wú)水乙醇定容，搖勻，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 陰性對(duì)照溶液 按樣品的處方比例和制備工藝制備缺對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏的陰性樣品，再按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備陰性對(duì)照溶液。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

精密量取“2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照溶液各適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜，詳見(jiàn)圖1。由圖1可知，在該色譜條件下，各成分均能達(dá)到基線分離，分離度＞10；理論板數(shù)以鹽酸金剛烷胺峰計(jì)為17 614，保留時(shí)間為2.450、5.430、6.870、8.490 min。結(jié)果表明，其他成分對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。

2.4 線性關(guān)系考察

取“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品貯備液適量，倍比稀釋，制備乙酰氨基酚質(zhì)量濃度分別為4 990.4、2 495.2、1 248.6、623.8、311.9、156.0 μg/mL，鹽酸金剛烷胺質(zhì)量濃度分別為4 023.2、2 011.6、1 005.8、502.9、251.4、125.7 μg/mL，咖啡因質(zhì)量濃度分別為612.4、306.2、153.1、76.55、38.28、19.14 μg/mL，馬來(lái)酸氯苯那敏質(zhì)量濃度分別為80.48、40.24、20.12、10.06、5.030、2.515 μg/ mL的系列混合對(duì)照品溶液。取上述溶液適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。以待測(cè)成分質(zhì)量濃度（x，μg/mL）為橫坐標(biāo)、峰面積（y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏的回歸方程分別為y＝4.404×103x－7.304×104（r＝0.999 9）、y＝5.734×103x+4.927×104（r＝0.999 9）、y＝2.597×103x+1.356×102（r＝0.999 9）、y＝3.383×103x+ 1.789×103（r＝0.999 9）。結(jié)果表明，對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏檢測(cè)質(zhì)量濃度線性范圍分別為156.0～4 990.4、125.7～4 023.2、19.14～612.4、2.515～80.48 μg/mL。

圖1 氣相色譜圖Fig 1 GC Chromatograms

2.5 定量限和檢測(cè)限考察

取“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液適量，倍比稀釋，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定6次，記錄峰面積。當(dāng)信噪比為10∶1時(shí)，得定量限（LOQ）；當(dāng)信噪比為3∶1時(shí)，得檢測(cè)限（LOD）。結(jié)果，對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏的LOQ分別為1.4、0.5、1.1、0.9 ng；LOD分別為0.4、0.2、0.3、0.3 ng。

2.6 精密度試驗(yàn)

精密量取“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果，鹽酸金剛烷胺、對(duì)乙酰氨基酚、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏峰面積的RSD分別為0.2%、0.3%、0.6%、0.4%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取“2.2.2”項(xiàng)下供試品溶液（批號(hào)：141028）適量，分別于室溫下放置0、1、2、4、6、8、10、24 h時(shí)按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果，對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏峰面積的RSD分別為0.9%、1.2%、1.2%、1.5%（n＝8），表明供試品溶液在室溫下放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批樣品（批號(hào)：141028）適量，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算平均含量。結(jié)果，對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因和馬來(lái)酸氯苯那敏的平均含量分別為99.2%、94.4%、100.7%、98.4%，RSD分別為0.8%、1.0%、0.8%、0.9%（n＝6），表明本方法重復(fù)性良好。

2.9 加樣回收率試驗(yàn)

取已知含量的樣品（批號(hào)：141028），研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚125 mg），共9份，各置于50 mL量瓶中，分別精密加入一定質(zhì)量的對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備低、中、高質(zhì)量濃度的供試品溶液。取上述溶液適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）Tab 1 Results of recovery test（n＝9）

2.10 樣品含量測(cè)定

取17批樣品各適量，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果（n＝3，%）Tab 2 Results of contents determination of samples（n＝3，%）

3 討論

3.1 耐用性考察

本試驗(yàn)分別選擇兩種色譜柱[HP-5石英毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm），美國(guó)Agilent公司]、[DM-5石英毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm），重慶迪馬工業(yè)有限責(zé)任公司]，對(duì)對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏的分離度進(jìn)行考察。結(jié)果表明，不同品牌色譜柱對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏的分離度影響不大，測(cè)定結(jié)果均符合要求，表明本方法的耐用性較好。

3.2 提取條件的選擇

本品為復(fù)方制劑，筆者參考相關(guān)文獻(xiàn)[8]并根據(jù)樣品及各成分的理化性質(zhì)，選取了毒性較低的無(wú)水乙醇為溶劑，采用超聲振蕩15 min提取相關(guān)成分。結(jié)果，咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏提取不完全；后改為80℃水浴加熱30 min進(jìn)行提取，對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏均能提取完全。因此，本試驗(yàn)采用80℃水浴加熱30 min進(jìn)行提取。

綜上所述，本方法簡(jiǎn)便快速、準(zhǔn)確可靠，適用于復(fù)方氨酚烷胺片中對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏的同時(shí)測(cè)定。

[1] 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.復(fù)方氨酚烷胺片[S].WS1-XG-015-2002.2003.

[2] 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.復(fù)方氨酚烷胺片[S].YBH06802005.2005.

[3] 田洪根，王洪明.HPLC法測(cè)定復(fù)方氨酚烷胺片中馬來(lái)酸氯苯那敏的含量及含量均勻度[J].中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)，2008，9（3）：207-209.

[4] 石強(qiáng).HPLC法同時(shí)測(cè)定復(fù)方氨酚烷胺片中咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏的含量及含量均勻度[J].齊魯藥事，2012，31（10）：585-587.

[5] 王軍，權(quán)勤波，宋建建，等.UFLC同時(shí)測(cè)定復(fù)方氨酚烷胺片中對(duì)乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].中國(guó)藥師，2009， 12（12）：1775-1777.

[6] 謝華，傅萍，張悅楊，等.HPLC測(cè)定復(fù)方氨酚烷胺片中的對(duì)乙酰氨基酚、咖啡因和馬來(lái)酸氯苯那敏[J].華西藥學(xué)雜志，2012，27（3）：307-308.

[7] 黃軍.RP-HPLC法測(cè)定復(fù)方氨酚烷胺片中4種主要成分的含量[J].生命科學(xué)儀器，2006，4（6）：16-18.

[8] 黃義純，劉旺培.HPLC測(cè)定氨咖黃敏中對(duì)乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].首都醫(yī)藥，2007，14（16）：472-474.

（編輯：劉 柳）

Simultaneous Determination of 4 Components in Compound Paracetamol and Amantadine Hydrochloride Tablet by GC

DONG Qiuxiang，ZHANG Yuehan，F(xiàn)U Pingping，LIU Zhiwei（Baoding Municipal Institute for Food and Drug Control，Hebei Baoding 071051，China）

OBJECTIVE：To establish a method for the simultaneous determination of paracetamol，amantadine hydrochloride，caffeine，chlorphenamine maleate in Compound paracetamol and amantadine hydrochloride tablet.METHODS：GC was performed on the column of HP-5 sillica capillary，temperature programmed，detector was FID detector，with the temperature of 300℃，carrier gas was nitrogen gas，the flow rate is 1.5 mL/min，the split ratio was 20∶1 and injection volume was 1 μL.RESULTS：The linear range was 156.0-4 990.4 μg/mL for paracetamol，125.7-4 023.2 μg/mL for amantadine hydrochloride，19.14-612.4 μg/mL for caffeine and 2.515-80.48 μg/mL for chlorphenamine maleate（all r＝0.999 9）；the limits of quantification were 1.4，0.5，1.1，0.9 ng，limits of detection were 0.4，0.2，0.3，0.3 ng；RSDs of precision，stability and reproducibility tests were lower than 2.0%；recoveries were 99.59%-101.77%（RSD＝0.8%，n＝9），99.56%-101.80%（RSD＝0.7%，n＝9），98.44%-100.83%（RSD＝0.7%，n＝9）and 100.05%-101.91%（RSD＝0.6%，n＝9），respectively.CONCLUSIONS：This method is simple，rapid，accurate and reliable，and suitable for the simultaneous determination of paracetamol，amantadine hydrochloride，caffeine，chlorphenamine maleate in Compound paracetamol and amantadine hydrochloride tablet.

Compound paracetamol and amantadine hydrochloride tablet；GC；Paracetamol；Amantadine hydrochloride；Caffeine；Chlorphenamine maleate；Content

R917

A

1001-0408（2017）06-0844-04

2016-02-28

2016-11-12）

＊主管藥師，碩士。研究方向：化學(xué)藥品檢驗(yàn)。電話：0312-5906322。E-mail：739998331@qq.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.06.34