胡錦濤，成志強，周冬仙，彭全洲，左敏，王曉玫(深圳市人民醫(yī)院，廣東深圳 518020)

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CD117在乳腺柱狀細胞病變和導管增生性病變中的表達變化及意義

胡錦濤，成志強，周冬仙，彭全洲，左敏，王曉玫
(深圳市人民醫(yī)院，廣東深圳 518020)

目的 觀察CD117在乳腺柱狀細胞病變(CCLs)及導管增生性病變中的表達變化，并探討其意義。方法 收集53例乳腺CCLs患者(意義未明組)，20例乳腺導管內普通型增生(UDH)患者(非腫瘤組)，43例乳腺導管上皮不典型增生(ADH)及導管原位癌(DCIS)患者(腫瘤組)，采用免疫組化法檢測各組中CD117及ER表達，采用χ2檢驗分析組間表達差異，Spearman法分析兩者表達相關性。結果 CD117在意義未明組CCLs中陽性表達率為17%(9/53)，非腫瘤組UDH中陽性表達率為85%(17/20)，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(χ2=29.297，P<0.001)；CD117在腫瘤組(ADH&DCIS)中陽性表達率為9.3%(4/43)，兩組比較差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.196，P=0.373)。CD117在乳腺增生性病變中表達與ER表達呈負相關性(r=-0.825，P<0.001)。結論 CD117在乳腺UDH中呈陽性表達，在CCLs、ADH及ER陽性DCIS中呈較高缺失性表達；CD117在乳腺增生性病變中表達與ER表達呈負相關，CCLs可能是顯微鏡下可辨識的最早期乳腺ER陽性腫瘤性轉化的癌前病變。

乳腺柱狀細胞病變;乳腺癌；癌前病變;CD117

乳腺柱狀細胞病變(CCLs)是發(fā)生于乳腺終末導管小葉單位的病變，其特征是被覆柱狀上皮細胞的腺泡增大伴不同程度的擴張。該病變是最常見的乳腺導管原位癌及浸潤性癌的伴隨性病變[1]，亦稱盲管型腺病、增生性小葉單位擴大、低級別貼壁型導管原位癌等[2]。2012年WHO乳腺腫瘤分冊將CCLs分為柱狀細胞變(CCC)、柱狀細胞增生(CCH)、伴不典型增生的柱狀細胞變/增生(等同于乳腺平坦上皮不典型增生，F(xiàn)EA)，并同乳腺導管普通型增生(UDH)、非典型增生(ADH)及導管原位癌一同歸類為乳腺導管增生性病變中。CCLs多被認為是乳腺導管上皮的一種特殊類型的化生性病變，其原因和意義尚不明確。由于乳腺鉬靶影像學應用于乳腺疾病的早期篩查，常伴有微小鈣化的CCLs診斷越來越常見而備受重視[3]。原癌基因CD117在人類多種腫瘤中均起到重要作用，其在正常乳腺導管上皮呈包膜和胞質的陽性表達，在管腔A型乳腺癌中有較高比率表達缺失，該基因的表達缺失可能在ER陽性乳腺管腔A型腫瘤發(fā)生過程中起到一定作用。本研究通過觀察CD117在CCLs及UDH、ADH和DCIS中的表達差異，探討CCLs及CD117缺失表達在乳腺導管增生性病變中的意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集本院病理科2014年2月～2015年12月乳腺增生性病變患者116例，均為女性，年齡28～67歲，中位年齡45歲。將全部觀察樣本分為意義未明組、非腫瘤組和腫瘤組三組。其中意義未名組由53例CCLs患者組成，包括CCC 21例(穿刺標本15例，手術切除標本6例)，CCH 16例(穿刺標本10例，手術切除標本6例)，F(xiàn)EA 16例(均為手術切除標本)。非腫瘤組由20例UDH患者組成，均為手術標本。腫瘤組由18例ADH患者及25例導管原位癌(DCIS)患者組成，均為手術樣本。病例均由兩名有經(jīng)驗的病理高年資醫(yī)生重新閱片，標本均經(jīng)中性甲醛固定、常規(guī)脫水、石蠟包埋、4 μm厚切片、HE染色。

1.2 ER、CD117表達檢測 每個病例所選蠟塊進行連續(xù)的 4 μm厚切片，常規(guī)HE染色及免疫組化染色。一抗鼠抗人單克隆抗體包括ER及CD117，均購自于福州邁新生物技術開發(fā)公司。免疫組化采用En Vision兩步法染色，高壓修復抗原，DAB顯色。選取正常乳腺組織(手術切除標本為內對照)及胃腸道間質瘤病理切片做陽性對照。用PBS替代一抗做陰性對照。結果判定:ER表達為細胞核陽性，計數(shù)陽性細胞百分數(shù)，并定義50%及以上ER陽性率為ER高表達病例[4]。CD117為細胞膜及細胞質陽性，評分為0～+++。當CD117染色細胞膜及細胞質無著色，評分為0；當著色細胞低于10%的腫瘤細胞時評分+；超過10%而低于30%的計數(shù)細胞胞質和/或細胞膜有弱至中等強度陽性染色或超過30%的計數(shù)細胞胞質和/或細胞膜有弱陽性，評分為++;超過30%的計數(shù)細胞胞質和/或細胞膜有中等至強陽性染色，評分為+++。定義評分++～+++的樣本為CD117染色陽性病例[5～7]。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件。組間比較采用χ2檢驗，相關性分析采用Spearman等級相關分析法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各組ER表達情況比較 ER在CCC&CCH病例中陽性表達率為40%～90%，柱狀細胞形態(tài)越典型ER表達率越高。ER在FEA中陽性表達率為70%～95%，無論細胞是否具有柱狀細胞的特點，ER均表現(xiàn)出較彌漫的陽性表達。ER在ADH中陽性表達率為75%～95%，陽性細胞表達均一而彌漫，染色強。ER在乳腺UDH中陽性表達率為3%～20%，呈現(xiàn)不均一表達模式；ER在DCIS中的陽性表達率為10%～95%，DCIS病例均為HER2陰性病例。

2.2 各組CD117表達情況比較 在53例乳腺CCLs病例中，存在正常乳腺區(qū)域，CD117在乳腺腺泡及乳腺導管均表達陽性。CD117在CCC&CCH病例中陽性率為16.2%，在FEA中表達率為18.8%，3例呈++，未見+++病例；C117在意義未明組中總陽性率為17%(9/53)。CD117在18例ADH中陽性率為5.6%(1/18)，在25例DCIS中陽性率為12%(3/25)；CD117在腫瘤組中總陽性率為9.3%(4/43)，CD117呈較高表達缺失。CD117在意義未明組及腫瘤組中表達無統(tǒng)計學差異(P=0.373)。CD117在非腫瘤組中的陽性率為85.0%(17/20)，與意義未明組比較有統(tǒng)計學差異(P=0.000)。

2.3 ER與CD117的相關性 乳腺增生性病變116例，CD117陽性率為25.9%(30/116)；ER高表達率為72.4%(84/116)。ER高表達率與CD117陽性率在乳腺增生性病變中呈負相關(r=-0.825，P<0.001)。

3 討論

原癌基因CD117在多種腫瘤中均起到重要作用，文獻報道正常乳腺腺泡上皮及導管上皮CD117均呈現(xiàn)包膜及胞質陽性，其表達可能在乳腺上皮細胞分化中起到重要作用[8]。Tsuda等[9]研究表明CD117表達與乳腺高核級及HER2陽性乳腺癌有關，卻在ER及PR陽性的乳腺癌中呈陰性表達。據(jù)此推斷CD117缺失表達可能在ER陽性乳腺非浸潤性Luminal A型乳腺腫瘤病變早期腫瘤性轉化中起到重要作用。

Tsuura 等[10]研究觀察92例乳腺癌中僅1例CD117陽性(1%)，21例正常乳腺標本中14例(67%)CD177陽性。Natali 等[10]觀察發(fā)現(xiàn)正常乳腺組織100%均一表達CD117；在乳腺纖維囊性乳腺病、纖維腺瘤、導管內乳頭狀瘤等乳腺良性病變中CD117呈現(xiàn)低或不均一表達，陽性率為78%；CD117在原發(fā)乳腺癌及轉移性乳腺癌中陽性率分別是13%及3%。本研究觀察發(fā)現(xiàn)CD117在正常乳腺組織中均呈現(xiàn)細胞膜及胞質的彌漫陽性，與多數(shù)文獻報道一致[12]。CD117在意義未明組中陽性率為17%(9/53)，非腫瘤組中陽性率為85%(17/20)，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義；CD117在腫瘤組中陽性率為9.3%(4/43)，與意義未明組比較差異無統(tǒng)計學意義。CD117在85%(17/20)UDH中均超過30%的細胞中等或強細胞膜及胞質陽性，達到本研究所定義的陽性表達標準。CD117在乳腺良性病變中陽性率較高[13]，但其在UDH中的表達和診斷價值尚未檢索到相關文獻資料。就本研究20例樣本的鏡下觀察，CD117在UDH中并非100%細胞表達，而是表達在ER陰性的細胞，與p63及CK5/6在部分實驗組樣本的回顧性觀察中，推測UDH中CD117陽性的細胞為中間腺上皮或中間肌上皮細胞。CD117在乳腺UDH中的彌漫表達對乳腺UDH的診斷有重要價值，可作為輔助診斷指標。因CD117在正常乳腺中均彌漫表達，此結果證實了乳腺UDH應是一組乳腺導管上皮的反應性增生性病變，而并非真正的腫瘤性病變。

目前的主流乳腺病理學觀點認為FEA(伴有非典型性CCC&CCH)與乳腺ADH具有相似的細胞學形態(tài)；乳腺ADH與ER陽性低級別DCIS只有量的不同均為腫瘤性病變。而CCLs病變意義并不明確，甚至該組病變是否與乳腺ADH及ER陽性低級別DCIS存在譜系遞進關系尚存在爭議[14]。原癌基因CD117在正常乳腺導管上皮呈現(xiàn)均一細胞膜及胞質的陽性表達，其在管腔A型乳腺癌中常呈缺失表達，可能在ER陽性腫瘤癌變過程中有一定作用。本研究表明CD117在CCLs中表達明顯減少或丟失，其陽性率與非腫瘤組對比差異有統(tǒng)計學意義，與腫瘤組對比無統(tǒng)計學差異。這說明CD117表達缺失應是管腔A型乳腺腫瘤性轉化的早期事件，CCLs應是ER陽性乳腺腫瘤性轉化的早期病變，CCLs、ADH及DCIS(ER陽性，HER2陰性型)構成了一個管腔A型乳腺腫瘤轉化的完整遞進譜系。CCLs可能是乳腺導管上皮發(fā)生腫瘤性轉化顯微鏡下可辨識的最早期組織學改變。本實驗研究的腫瘤組中20例DCIS中3例CD117陽性，重新閱片后該3例樣本均為ER低表達病例(ER<20%陽性)，并均為高級別的導管內癌。有研究顯示ER低表達HER2陰性乳腺癌并非ER陽性管腔A型腫瘤，PAM50基因檢測發(fā)現(xiàn)該類腫瘤大多為基底細胞亞型乳腺癌。CD117能否作為管腔A乳腺腫瘤再分類的指標，還需要更多腫瘤性樣本的觀察研究。

相對于乳腺浸潤性癌的研究[15]，乳腺癌前病變研究資料相對較少，乳腺上皮內瘤變的概念亦未被廣大學者所認同[16]。Abdel-Fatah等[17]提出乳腺低級別核腫瘤性病變家族的概念，認為乳腺CCLs、低級別導管原位癌、小葉內瘤變與乳腺低級別核浸潤性癌是一個連續(xù)發(fā)展的譜系。本研究結果顯示CD117在乳腺CCLs、ADH、DCIS(ER陽性，HER2陰性)中呈明顯的減弱表達至缺失表達，支持Luminal A型乳腺低級別腫瘤可能是一組連續(xù)發(fā)展的病變，但CD117表達缺失的具體機制有待于更多分子生物學研究。

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深圳市科技計劃資助項目(JCYJ20140416122811941)。

王曉玫(E-mail：huqiuhan@126.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.25.022

R737.9

B

1002-266X(2017)25-0067-03

2017-03-28)