郭小娟 王 玲 趙 剛 裴學軍 肖 飛

(湖北省中藥現(xiàn)代化工程技術研究中心，武漢，430052)

龍牡壯骨顆粒強筋壯骨作用綜述

郭小娟 王 玲 趙 剛 裴學軍 肖 飛

(湖北省中藥現(xiàn)代化工程技術研究中心，武漢，430052)

本文主要對龍牡壯骨顆粒強筋壯骨的基礎理論、藥理藥效研究以及臨床應用情況進行綜述，明確其作用機制和臨床療效。同時對其安全性方面進行全面綜述。

龍牡壯骨顆粒；強筋壯骨；佝僂病；骨質(zhì)疏松

龍牡壯骨顆粒由黃芪、黨參、山麥冬、醋龜甲、炒白術、山藥、醋南五味子、龍骨、煅牡蠣、茯苓、大棗、甘草、乳酸鈣、炒雞內(nèi)金、維生素D2、葡萄糖酸鈣組成，該方具有強筋壯骨、健脾和胃的作用，可用于治療和預防小兒佝僂病、軟骨病，兒童反復呼吸道感染，原發(fā)性骨質(zhì)疏松、功能性消化不良、小兒汗癥、夜驚、發(fā)育不良等[1]。本文主要針對龍牡壯骨顆粒在強筋壯骨方面的作用機制、臨床應用及安全性方面進行論述。

1 理論依據(jù)

《靈樞·經(jīng)脈篇》中云∶“人始生，先成精，精成而腦髓生，骨為干，脈為營，筋為剛，肉為墻，皮膚堅而毛發(fā)長，谷入于胃，脈道以通，血氣乃行。”闡述了人體胚胎的形成過程中先天之精形成和后天氣血生化的重要作用。氣、血、精是構成人體和維持人體生命活動的基本物質(zhì)，而這些基本物質(zhì)的生成和代謝，又依賴于臟腑生理功能的正常。故《理虛元鑒·治虛有三本》記載：“治虛有三本，肺脾腎是也。肺為五臟之天，脾為百骸之母，腎為性命之根”。中醫(yī)學認為，腎為先天之本，藏精，主骨，生髓，主生長發(fā)育。小兒若腎精不足，則可致發(fā)育遲緩、筋骨萎軟。龍牡壯骨顆粒方中含有龜甲、牡蠣、龍骨、麥冬、五味子等藥味，通過補腎壯骨經(jīng)典名方“龍骨湯”加減而來，可達補腎壯骨、填精益髓、培元固本之功。

2 基礎研究情況

2.1 龍牡壯骨顆粒對骨生長的影響 成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負責骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。小鼠顱頂前成骨細胞(MC3T3-E1)，具有ALP活性、I型膠原合成和基質(zhì)鈣化等成骨細胞的生物學特性，常作為骨代謝研究的細胞模型。

周紅等[1]以MC3T3-E1小鼠成骨細胞株作為藥物篩選的體外模型，采用終濃度分別為1、5、10、25、50 μg/mL的龍牡壯骨顆粒溶液進行干預，檢測細胞增殖率及不同濃度藥物對細胞鈣化的影響，并考察了不同濃度藥物及不同作用時間后的堿性磷酸酶(ALP)的活性。結果顯示，與對照組比較，培養(yǎng)24 h后，50 μg/mL的龍牡壯骨顆粒溶液可顯著促進細胞增殖的作用，培養(yǎng)48 h后，龍牡壯骨顆粒溶液在5～50 μg/mL范圍內(nèi)增殖作用顯著，培養(yǎng)72 h后，50 μg/mL的龍牡壯骨顆粒溶液仍能顯著增強細胞增殖。并且，ALP的活性也得到相應的增強。茜素紅染色結果顯示，不同濃度的龍牡壯骨顆粒組均可見橘黃色至橘紅色的顆粒結節(jié)，其中，10、50 μg/mL藥物效果最為顯著，Von Kossa染色結果顯示：10、25、50 μg/mL龍牡壯骨顆粒作用后可見黑色的礦化結節(jié)。因此，可見龍牡壯骨顆粒對成骨細胞的增殖、分化及鈣化均具有一定的促進作用。

蔣鵬，熊富良等[2-3]研究結果顯示，龍牡壯骨顆粒對大鼠的骨干重、骨灰重、骨密度均有明顯的升高作用，提示龍牡壯骨顆粒能增加佝僂病大鼠的骨干重、骨密度、骨鈣含量，維持大鼠的骨健康。此外，在對骨鈣化影響中，模型組出現(xiàn)少量或微量褐色小點，鈣化不明顯，而龍牡壯骨顆粒組則出現(xiàn)較多褐色黑點，表明龍牡壯骨顆粒能顯著促進骨的鈣化[4]。

2.2 龍牡壯骨顆粒對血清鈣等物質(zhì)的影響 25-羥基維生素D3是由無生物活性的維生素D3在25-羥化酶催化作用下形成的一種具有一定生物活性的化合物，在1ɑ-羥化酶的催化下生成活性更高的1,25-(OH)2-VitD3，各種形式的維生素D3與維生素D結合蛋白結合，形成結合型維生素D。此化合物是反應維生素D在體內(nèi)吸收的最佳指標，有研究表明[2-7]，龍牡壯骨顆?？擅黠@促進維生素D的吸收，而維生素D可以進一步促進小腸對鈣、磷的吸收，升高血鈣、血磷，達到對因治療佝僂病及原發(fā)性骨質(zhì)疏松的目的。

此外，ALP一般存在于成骨細胞的細胞膜上，是骨形成的生化指標，TRAP是由破骨細胞釋放，反應骨吸收的特征酶，兩者分別負責新骨的形成和舊骨的吸收代謝。研究表明[5，8]，龍牡壯骨顆粒可顯著抑制ALP和TRAP的釋放，維持血中兩者的相對平衡，能有效抑制佝僂病和骨質(zhì)疏松大鼠體中異常的骨轉(zhuǎn)換和代謝。

2.3 龍牡壯骨顆粒對小腸鈣跨膜轉(zhuǎn)運相關蛋白表達的影響 CAT1為鈣轉(zhuǎn)運蛋白，VDR為維生素D受體，兩者表達的上調(diào)可以促進小腸對鈣和維生素D的吸收和轉(zhuǎn)運，緩解缺鈣和缺維生素D的癥狀[2]，達到強筋壯骨的作用。

劉秀蘭等[5]的研究結果表明，相對于空白組，佝僂病大鼠模型組的CAT1、VDR表達均下調(diào)，治療結束后，龍牡壯骨顆粒試驗組相對于模型組，CAT1、VDR表達均顯著上調(diào)，與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義，提示龍牡壯骨顆粒通過促進小腸對鈣和維生素D的吸收和轉(zhuǎn)運，緩解佝僂病、骨質(zhì)疏松癥缺鈣和維生素D的癥狀。

2.4 龍牡壯骨顆粒對免疫系統(tǒng)的影響 熊富良等[3]論述了龍牡壯骨顆粒對佝僂病大鼠脾臟指數(shù)的影響，模型組大鼠相比于正常組，脾臟指數(shù)明顯下降，治療75 d后，龍牡壯骨顆粒組對脾臟指數(shù)的提高具有顯著臨床意義，而脾臟是機體最大的免疫器官，表明該品種可顯著改善由于佝僂病所致的小兒抵抗力下降。

袁泉等[9]研究了龍牡壯骨顆粒及咀嚼片對脾虛型小鼠免疫功能的影響，試驗分為龍牡壯骨咀嚼片高、中、低劑量組、顆粒組、黃芪煎液組及脾虛模型對照組，連續(xù)給藥15 d，檢測小鼠的胸腺指數(shù)、溶血素、淋轉(zhuǎn)情況，結果表明，用藥各組的胸腺重量均顯著升高，與模型組比較有統(tǒng)計學意義；用藥各組溶血素均顯著升高，與模型組比較有統(tǒng)計學意義；用藥各組的淋轉(zhuǎn)率均顯著升高，與模型組比較有統(tǒng)計學意義，證明龍牡壯骨顆粒及咀嚼片均具有提高免疫力的作用。

3 臨床應用情況

3.1 龍牡壯骨顆粒對小兒佝僂病的治療作用 桂林市第三人民醫(yī)院陳燕華[10]對2008—2010年來院并使用龍牡壯骨顆粒進行佝僂病治療的90例病例進行觀察，選擇4個月～2歲在該院門診就診的患者90例，將其隨機分成2組，2組的基線比較差異無統(tǒng)計學意義，治療組48例給予龍牡壯骨顆粒，對照組42例給予葡萄糖酸鈣和維生素AD口服液，30 d為1個療程，治療2個療程后，治療組的總有效率為95.83%，對照組總有效率為78.57%，2組比較差異有統(tǒng)計學意義，表明龍牡壯骨顆粒治療嬰幼兒佝僂病療效確切。

張輝等[11]選取了60例病例，均為該院就診患者，隨機分為2組，治療組、對照組各30例，治療組給予龍牡壯骨顆粒，對照組給予三精葡萄糖酸鈣口服液和維生素AD膠囊，治療2個月，試驗組的總有效率為93.3%，顯著高于對照組73.33%的有效率，差異有統(tǒng)計學意義，其中骨堿性磷酸酶活性<200的，治療組有27例，占90%，對照組20例，占66.67%，具有統(tǒng)計學意義；林雅芬等[12]選取了58例兒童保健院門診病例，隨機分為2組治療組和對照組，治療組30例，對照組28例，治療組給予龍牡壯骨顆粒，對照組常規(guī)的維生素D加鈣劑治療，療程1個月，治療結束后治療組和對照組的總有效率都在95%以上，差異無統(tǒng)計學意義，而治療組在增加食欲、改善睡眠方面優(yōu)于對照組。

張雪榮等[13]對龍牡壯骨顆粒治療維生素D缺乏性佝僂病的有效性和安全性進行研究，其選取2013年5月至2014年11月在湖北省中醫(yī)院就診的門診患者50例，給予龍牡壯骨顆粒進行治療，療程8周，期間禁止使用含鈣、維生素D的藥物、保健品及同類中藥。治療結束后，疾病療效的顯效率30%，總有效率88%，中醫(yī)癥候的顯效率20%，總有效率88%。研究結果表明，龍牡壯骨顆粒治療維生素D缺乏性佝僂病療效確切，總有效率均在88%，且在枕禿、夜驚、面色、汗癥、肌肉、毛發(fā)、精神癥狀方面改善明顯。

3.2 龍牡壯骨顆粒對骨質(zhì)疏松癥的治療作用 戴亦暉等[14]對龍牡壯骨顆粒治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的有效性進行了研究，其選取158例來自沈陽軍區(qū)大連療養(yǎng)院付家莊療養(yǎng)區(qū)的原發(fā)性骨質(zhì)疏松患者，口服給予龍牡壯骨顆粒進行治療，4粒/次，3次/d，療程6個月。治療結束后，144名患者的疼痛癥狀明顯減輕，骨密度值顯著升高，由治療前的(0.58±0.10)提高到(0.72±0.12)，治療總有效率達91.10%，與治療前比較差異有統(tǒng)計學意義。

4 安全性

4.1 龍牡壯骨顆粒及其藥材重金屬研究 有文獻報道，楊頏等[15]采用原子吸收分光光度法測定了龍牡壯骨顆粒及其中藥材中汞、鉛、鎘、砷等重金屬的含量，結果顯示，所抽檢的20批龍牡壯骨顆粒中重金屬含量均符合藥典及食品增補劑標準，可見其質(zhì)量較高，安全性較好。

4.2 龍牡壯骨顆粒對性激素的影響 龍牡壯骨顆粒在發(fā)揮臨床療效的同時，是否引起性激素水平的改變，也是臨床醫(yī)生關注的重點，由尹國驍、向明等[16]就此方面進行了研究，結果表明，龍牡壯骨顆粒等效劑量組與空白組比較，差異無統(tǒng)計學意義，高劑量組可降低雄性小鼠的雌二醇水平，而對雌性小鼠的激素水平無影響；等效劑量的龍牡壯骨顆?？娠@著增加雄性小鼠的骨濕重、骨干重、骨密度和骨量，與雄性空白組對照差異有顯著意義，高劑量雄性小鼠骨干重、骨密度高于空白小鼠，差異有統(tǒng)計學意義。從以上結果可以看出，治療劑量的龍牡壯骨顆?？娠@著改善雄性小鼠骨質(zhì)，且與小鼠性激素水平無關，為龍牡壯骨顆粒在小兒人群中的安全用藥提供了科學依據(jù)。

4.3 臨床安全性 多篇臨床應用文獻對用藥前后兒童的主要體征如體溫、脈搏、呼吸、血壓等進行觀察，對主要的安全性指標如尿常規(guī)、便常規(guī)、心電圖、肝腎功能等進行了檢查，未發(fā)現(xiàn)任何不良反應[10-11,17]。

5 總結

龍牡壯骨顆粒方中黃芪健脾補氣、升陽固表止汗，黨參、炒白術、山藥、茯苓、大棗益氣健脾、補血益氣共為君藥，炒雞內(nèi)金消食健脾，為臣藥，龍骨、牡蠣安神鎮(zhèn)驚、斂汗固精，五味子斂肺滋腎，生津收汗，龜甲滋陰潛陽，益腎強骨，共為佐藥，輔以麥冬、甘草以養(yǎng)胃陰，調(diào)和脾胃。全方合用，脾腎雙補，共奏健脾益氣，補腎益精，固表止汗，強壯筋骨之功。與中醫(yī)治療上述疾病的機制相同。從現(xiàn)代藥理研究機制出發(fā)，從同一疾病的多個相關靶點對龍牡壯骨顆粒的強筋壯骨作用進行了多方面的研究，經(jīng)試驗證實，龍牡壯骨顆粒通過上調(diào)或抑制相關信號通路中的受體、激素、細胞增殖等作用，達到治療疾病的目的。此外，多家醫(yī)療機構的臨床試驗研究也證實了龍牡壯骨顆粒在治療小兒佝僂病、原發(fā)性骨質(zhì)疏松方面的療效，有效率多在90%以上。

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(2017-06-10收稿 責任編輯：徐穎)

The Review on Effect of Longmu Zhuanggu Granule——Strengthening Tendons and Bones

Guo Xiaojuan，Wang Ling，Zhao Gang，Pei Xuejun，Xiao Fei

(EngineeringcenterofHubeiprovinceformodernizationofTCMTechnology,Wuhan430052,China)

This article mainly summarizes the basic theory, the pharmacological efficacy and clinical application of Longmu Zhuanggu granule in strengthening tendons and bones to clear the mechanism and clinical effect of Longmu Zhuanggu granule. Besides, the aspects about its safety are summarized.

Longmu Zhuanggu granule; Tendons and bones strengthening; Rickets; Osteoporosis

國家衛(wèi)計委中藥兒童用藥示范項目(2015)

郭小娟(1989.08—)，湖北，工程師，研究方向：新藥開發(fā)與臨床研究

肖飛(1977.11—)，湖北，高級工程師，研究方向：新藥開發(fā)與臨床研究

R272

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.07.058