祁飛 周瑩君

·實(shí)驗(yàn)研究·

紅景天藥材的快速檢測研究

祁飛 周瑩君

現(xiàn)在國家藥典規(guī)定的中藥材鑒別方法主要集中在薄層鑒別, 液相色譜法；定量方法主要多采用高效液相色譜法(HPLC)方法。而采用HPLC法檢驗(yàn)周期長, 無法滿足連續(xù)生產(chǎn)的需要, 超高效液相色譜法(UPLC)方法的出現(xiàn)彌補(bǔ)了HPLC的不足, 以其快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好的優(yōu)點(diǎn)在分析領(lǐng)域中得以廣泛地應(yīng)用。本次試驗(yàn)采用UPLC法建立了快速檢測紅景天藥材的含量方法, 可以有效控制藥材質(zhì)量, 并滿足連續(xù)生產(chǎn)的要求。

紅景天；超高效液相色譜法；高效液相色譜法

紅景天苷［(4-羥基-苯基)乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷］,紅景天屬(rhodiola)植物中廣泛存在的酚苷類化合物, 可從植物根、莖提取, 亦可通過生物合成途徑、化學(xué)合成途徑、生物催化合成途徑等其他途徑合成［1-4］。紅景天藥材已廣泛應(yīng)用于藥品中。本試驗(yàn)采用UPLC方法替代HPLC方法, 建立了快速檢測紅景天藥材的含量方法, 可提高檢測的靈敏度和速度, 為生產(chǎn)效率的提升奠定基礎(chǔ)。

1 材料

對照品∶紅景天苷(批號：110818-200404)購于中國食品藥品檢定研究院。Waters Acquity-H-Class超高效液相色譜儀(美國Waters公司), AT201十萬分之一分析天平(METTLER TOLEDO)；色譜柱：Waters ACQUITY UPLC?BEH C18(2.1 mm×100 mm, 1.7 μm)；乙腈、甲醇(色譜純, 美國Fisher Scientific公司), 磷酸(色譜純, 天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備 取本品粉末(過三號篩)約0.5g,精密稱定, 置具塞錐形瓶中, 精密加入甲醇10 ml, 密塞, 稱定重量, 超聲處理30 min, 放冷, 再稱定重量, 用甲醇補(bǔ)足減失的重量, 搖勻, 濾過, 取續(xù)濾液, 即得［5］。

2.2 對照品溶液的制備 取紅景天苷對照品適量, 精密稱定, 加甲醇制成每1 ml含71.2 μg的溶液, 即得。

2.3 色譜條件 HPLC：色譜柱：Waters Symmetry?C18柱 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90)；檢測波長：275 nm；柱溫：30℃；流速：1.0 ml/min。

UPLC∶ 色譜柱：Waters ACQUITY UPLC?BEH C18 (2.1 mm× 100 mm, 1.7 μm)；流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液(15∶85)；檢測波長：275 nm；柱溫：30℃；流速：0.4 ml/min。

2.4 測定結(jié)果 HPLC：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μl, 注入液相色譜儀, 測定, 即得。見圖1。

圖1 紅景天苷HPLC測定圖

UPLC：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各1 μl,注入超高效液相色譜儀, 測定, 即得。見圖2。

圖2 紅景天苷UPLC測定圖譜

取不同產(chǎn)地的10批紅景天藥材, 分別用HPLC、UPLC方法進(jìn)行測定, UPLC測定紅景天苷對比圖譜見圖3。HPLC、UPLC測定紅景天苷含量見表1。

圖3 紅景天苷UPLC對比研究圖譜

表1 紅景天藥材中紅景天苷含量測定結(jié)果(%)

3 小結(jié)

中國藥典2015年版一部［6］紅景天項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：本品按干燥品計(jì)算, 含紅景天苷(C14H20O7)不得少于0.50%。經(jīng)測定, 采用UPLC方法測定10批紅景天的含量測定結(jié)果均符合中國藥典2015版一部紅景天項(xiàng)下含量測定要求。本次試驗(yàn)采用UPLC法建立了快速檢測紅景天藥材的含量方法, 可以快速、有效控制藥材質(zhì)量, 提高了檢驗(yàn)效率, 滿足連續(xù)生產(chǎn)的要求, 相關(guān)研究亦有此類結(jié)果證明［7］。

綜上所述, UPLC方法具有快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好的優(yōu)點(diǎn)。

［1］郭建鋒, 符義剛, 王孟華, 等. 紅景天苷的合成. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志, 2015, 46(8)∶812-814.

［2］龔舒, 甘淋. 紅景天苷藥理作用的分子機(jī)制研究進(jìn)展. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生, 2015(5)∶696-699.

［3］王雪晶, 謝雪, 羅鑫, 等. 大株紅景天化學(xué)成分研究(Ⅰ). 中草藥, 2015, 46(23)∶3471-3474.

［4］崔晉龍, 付少彬, 王夢亮, 等. 紅景天苷生物、化學(xué)和生物催化合成的分子理論及應(yīng)用. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2013, 25(6)∶851-855.

［5］國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典四部. 北京∶中國醫(yī)藥科技出版社, 2015∶59-61.

［6］國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典一部. 北京∶中國醫(yī)藥科技出版社, 2015∶154.

［7］高青, 劉穎, 宋彬彬, 等. 超高效液相色譜與高效液相色譜方法轉(zhuǎn)換及驗(yàn)證. 藥物分析雜志, 2016(7)∶1279-1286.

Research of rapid detection for Rhodiola rosea

QI Fei, ZHOU Ying-jun.
Shijiazhuang Yiling Pharmaceutical Co., Ltd, Shijiazhuang 050035, China

Main identification methods for traditional Chinese medicinal materials include thin-layer chromatography and liquid chromatography by national pharmacopoeia. High performance liquid chromatography (HPLC) is used as the main quantitative method. Due to its long detection cycle, HPLC cannot meet requirement of continuous production. Ultra performance liquid chromatography (UPLC) compensates for the disadvantages of HPLC, and this method is widely applied in detection due to its advantages of speediness, accuracy and good repeatability. This research applied UPLC to establish a rapid detection method for Rhodiola rosea concentration, and it can effectively control material quality and meet requirements of continuous production.

Rhodiola rosea; Ultra performance liquid chromatography; High performance liquid chromatography

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.02.099

2016-12-26］

050035 石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司

祁飛