楊慶忠，付宏偉，李新善

(1、江西省婦幼保健院核醫(yī)學科，江西南昌330006；2、江西省人民醫(yī)院檢驗科，江西南昌330006)

ROMA模型聯(lián)合HE4與CA125檢測在卵巢癌診斷中的作用

楊慶忠1，付宏偉1，李新善2

(1、江西省婦幼保健院核醫(yī)學科，江西南昌330006；2、江西省人民醫(yī)院檢驗科，江西南昌330006)

目的探討卵巢惡性腫瘤風險計算法(ROMA)聯(lián)合血清人附睪蛋白4(HE4)與糖類抗原125(CAl25)檢測在預測卵巢癌診斷中的價值。方法采用通過化學發(fā)光方法檢測100例卵巢癌患者(卵巢癌組)、100例卵巢良性腫瘤患者(良性組)及100例女性健康對照者(健康對照組)的血清HE4與糖類抗原CAl25濃度，采用ROMA方法計算卵巢癌預測概率(PP)，評價PP值的診斷效果。結果(1)卵巢癌組血清HE4和CAl25水平分別為320．2±210．6pmoL/L和350．6±162．8kU/L，卵巢良性腫瘤組血清HE4和CAl25水平分別為52．8±12．6pmoL/L和32．6±10．5kU/L，健康對照組血清HE4和CAl25水平分別為36．4±12．8pmoL/L和21．4±8．2kU/L，卵巢癌組血清HE4和CAl25水平分別與卵巢良性腫瘤組和健康對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0．01)。(2)未絕經和絕經女性PP值的臨界值分別為11．4%和29．9%，診斷未絕經患者的靈敏度和特異性分別為87．0%和83．8%，陽性預測值和陰性預測值分別為71．1%和93．4%；診斷絕經患者的靈敏度和特異度分別為88．4%和81．3%，陽性預測值和陰性預測值分別為91．0%和76．5%。結論ROMA聯(lián)合血清HE4與CAl25判定有助于提高患者卵巢癌診斷的準確度。

卵巢惡性腫瘤風險計算法；人附睪蛋白4；糖類抗原125；卵巢癌

卵巢癌是較為多見的一種婦科惡性腫瘤，其患病率在女性惡性腫瘤中占第3位，治療效果差，其病死率在婦科惡性腫瘤中居高不下。它發(fā)病隱匿，臨床表現(xiàn)不明顯，早期卵巢癌病人5年存活率可達90%，而已發(fā)生遠處轉移的晚期卵巢癌病人5年存活率往往不到30%[1，2]。故早發(fā)現(xiàn)早診治是改善卵巢癌病人生存質量的首要因素。糖類抗原125(carbohydrate antigen 125，CAl25)的檢測是目前臨床婦科腫瘤使用最多的腫瘤標記物，常作為是否卵巢良惡性腫瘤的標桿。在正常卵巢表面上皮、卵巢上皮性良性和惡性病變組織中CAl25均有一定數(shù)量的釋放，其靈敏性和特異性均不夠滿意，臨床檢驗結果誤診率較高[3]。人附睪蛋白4(human epididymis protein 4，HE4)是近幾年探求到的一種盆腔腫瘤組織標記物。在正常組織和良性腫瘤中HE4濃度極低，但在卵巢惡性腫瘤濃度較高。因此，血清HE4與CAl25聯(lián)合檢測在臨床上對卵巢癌的診斷及治療效果的評估有極大的幫助并可進一步提高卵巢良惡性腫瘤的鑒別診斷率[4，5]。本文對100例卵巢癌、100例卵巢良性腫瘤及100例健康女性的血清HE4與糖類抗原CAl25濃度，采用ROMA方法測定卵巢癌患病概率(PP)，來討論HE4與CAl25聯(lián)合檢測對卵巢癌的臨床診療意義。

1 資料與方法

1．1資料來源及分組選擇2012年1月－2014年12月江西省婦幼保健醫(yī)院收治的卵巢腫瘤住院患者200例，均病理切片確診。所選病人均無明顯并發(fā)癥因素干擾腫瘤標志物測定。根據(jù)臨床診斷金標準，組織病理學檢查結果，將病人分為卵巢惡性病變組和卵巢良性病變組。卵巢惡性病變患者l00例(卵巢癌組)，均是本院初診病人，年齡32～71歲，平均54歲；其中絕經69例，未絕經31例。卵巢良性病變患者100例(良性組)，年齡27～73歲，平均49歲，均無其他疾病和并發(fā)癥，其中絕經32例，未絕經68例。健康對照組100例，均為健康成年女性，年齡28～74歲，平均51歲，均無盆腔和生殖器官疾病、消化道疾病。

1．2標本采集及處理所有研究對象(入院即采樣)空腹抽取肘靜脈血3～4ml，自然凝集45～60min，室溫下4000r/min離心15min分離血清，羅氏日立樣品杯分裝封存后－80℃保存待測。

1．3血清HE4和CA125檢測方法通過電化學發(fā)光法測定血清HE4、CA125。使用瑞士羅氏公司E－601電化學發(fā)光免疫分析儀及進口原裝HE4、CA125試劑，質控品取用進口原裝HE4、CAl25室內質控。按儀器和試劑盒的說明書操作。具體方法簡述如下：第1次孵育：標本分別與生物素化的特異性單克隆抗體和釕復合體標識的特異性單克隆抗體結合，生成抗原抗體夾心化合物。第2次孵育：加入磁性微粒，該微粒被鏈霉親合素包裹，前者生成的抗原抗體化合物通過生物素與鏈霉親合素的相互作用并結合固相。反應液被吸入測量池，經過電磁力將磁性微粒吸附在電極表面。未與磁性微粒結合的物質通過三丙胺清洗液和預清洗液除去。經過電極施加一定的電壓，使復合體化學發(fā)光，其發(fā)光強度由光電倍增器測量。經由檢測儀設定好的標準曲線得到最終的化驗結果，標準曲線是通過2點定標或試劑廠家自帶曲線生成的。血清HE4和CA125使用的正常參考值分別是0～140pmol/L和0～35kU/L．

1．4 HE4與CA125聯(lián)合檢測及結合絕經狀態(tài)預測盆腔包塊患者中卵巢惡性腫瘤的發(fā)病風險模型（Risk of Ovarian Malignancy Algorithm，ROMA)。采用Moore等通過Logistic回歸分析建立的ROMA計算：絕經前預測指數(shù)(PI)=－12．0+2．38×ln(HE4)+ 0．0626×ln(CA125)；絕經后預測指數(shù)(PI)=－8．09+ 1．04×ln(HE4)+0．732×ln(CA125)；風險預測概率(PP) =Exp(PI)/[1+Exp(PI)]。將每例患者的CA125和HE4測定值按是否絕經分別代入上述公式，算得PP值，根據(jù)特異度為75%時的PP值，作為判別高危、低危的閾值。

1．5統(tǒng)計學方法采用SPSS 13．0軟件，計量資料采用多組秩和檢驗的兩兩比較方法，計數(shù)資料采用χ2檢驗，配對計數(shù)資料運用Wilcoxon配對檢驗。P＜0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2．1各組血清HE4與CA125水平比較卵巢癌組血清HE4和CAl25水平分別為320．2±210．6pmoL/ L和350．6±162．8kU/L，卵巢良性腫瘤組血清HE4和CAl25水平分別為52．8±12．6pmoL/L和32．6± 10．5kU/L，健康對照組血清HE4和CAl25水平分別為36．4±12．8pmoL/L和21．4±8．2kU/L，卵巢癌組血清HE4和CAl25水平分別與卵巢良性腫瘤組和健康對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0．01)。見表1。

表1 各組血清CA125、HE4水平比較（x±s）

2．2 ROMA的應用價值以l00例卵巢癌患者為病例組，100例良性卵巢腫瘤組為對照組，當特異度為75%時，未絕經和已絕經女性PP值的臨界值分別為11．4%和29．9%，以該臨界值為標準，將卵巢腫瘤患者分為低危組和高危組。診斷未絕經患者的靈敏度和特異性分別為87．0%和83．8%，陽性預測值和陰性預測值分別為71．1%和93．4%；診斷絕經患者的靈敏度和特異度分別為88．4%和81．3%，陽性預測值和陰性預測值分別為91．0%和76．5%。見表2。

表2 ROMA法對不同絕經狀態(tài)卵巢腫瘤患者的評估應用100(例)

3 討論

卵巢癌是最常見的婦科惡性腫瘤，女性癌癥患者死亡病因中位列第四。如能得到早期診斷并進行干預治療，這種癌癥可以達到臨床治愈。然而，卵巢癌惡變早期通常無特異性癥狀，有70%～75%的卵巢癌都是出現(xiàn)遠處轉移才開始診療。國際癌癥研究署曾經統(tǒng)計，卵巢癌患者的5年存活率為46%，假如該疾病能夠早期診斷，存活率可達到94%[6，7]。因此，早期診斷成為治療和預后的關鍵。

血清中CA125是卵巢上皮性類癌的相關性抗原，一般情況下不釋放或甚少釋放，但卵巢組織發(fā)生惡性病變時，胚胎樣上皮細胞會釋放一定量的CA125，診斷卵巢癌具有較高的敏感性。當然一些婦科良性病變CA125亦會升高，所以存在著組織或腫瘤的特異性以及早期診斷的敏感性不高等因素[8]。HE4屬于乳清酸性四－二硫化物核心（WFDC）蛋白家族，懷疑有酪氨酸抑制劑化學性質[9]。HE4開始是在遠端附睪上皮細胞中發(fā)現(xiàn)，在包括卵巢在內的呼吸和生殖系統(tǒng)組織上皮中呈低劑量釋放，但在卵巢惡性細胞中大劑量釋放，而在癌旁正常組織中并不釋放，而且早期卵巢惡性組織中呈不同水平的釋放增加，高水平釋放還見于卵巢癌患者的血清中，因此預計HE4有助于上皮卵巢癌的風險評估[10]。

作為腫瘤標記物，HE4對于卵巢惡性病變的檢測具有較高的靈敏度，尤其是對于I期無癥狀性早期疾病，聯(lián)合CA125，HE4有95%的特異性，并且有高達76．4%的敏感度。此外，在子宮內膜癌早期，HE4比CA125要靈敏[11]。CA125水平正常，HE4的大劑量釋放可能意味著存在卵巢惡性腫瘤或其他類型的惡性腫瘤，比如子宮內膜癌。結合腫瘤標記物CA125，HE4可幫助確定絕經期前和絕經期后婦女的盆腔腫瘤是否良惡性，聯(lián)合二者檢測可以提高檢測的靈敏度和特異性[12]。CA125和HE4兩種標記物檢測相結合是比其中任何一種單用更為精準的癌性疾病預測診斷，可作為臨床鑒別診斷卵巢癌診斷的首選無創(chuàng)檢測方法[13]。王慜杰等研究得出由ROMA值結合絕經狀態(tài)診斷出卵巢癌的敏感度和特異度分別為85．7%和77．1%，闡明了依據(jù)HE4和CA125結果聯(lián)合絕經狀態(tài)計算卵巢惡性腫瘤風險值(ROMA值)，在診斷卵巢癌的靈敏性和特異性均高于CA125一種腫瘤標記物檢測，能很好的反映病情發(fā)展變化，可作為卵巢癌療效評估的有效指標[14，15]。國外學者對ROMA用于對卵巢癌的普查已很普及，我國在一些大城市也在應用，但目前江西省未見此類研究的報道。

本實驗選取江西省婦幼保健院2012年至2014年住院及門診病人，體檢人員作為研究對象，得出卵巢癌組血清HE4和CAl25水平分別與卵巢良性腫瘤組和健康對照組比較，差別均有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0．01)。采用ROMA模型，測定HE4和CA125結果聯(lián)合絕經狀態(tài)計算卵巢惡性腫瘤風險值(ROMA值)，未絕經及已絕經患者診斷卵巢癌的靈敏性和特異性與王慜杰等研究結果相符合，但比張碧蓮診斷卵巢癌的敏感性和特異性分別要低，其具體原因有待分析[16]。本實驗研究結果，未絕經患者中，卵巢癌陽性預測值為71%，卵巢良性腫瘤陰性預測值93．4%，已絕經患者中卵巢癌陽性預測值為91%，卵巢良性腫瘤陰性預測值76．5%，其較高的卵巢癌的陽性診斷和卵巢良性評估在卵巢良惡性病變及高危人群篩查方面，可以為江西省婦幼保健院臨床醫(yī)生在婦科惡性卵巢腫瘤早期提示，診斷治療，療效隨訪及其早期預防提供可靠的實驗依據(jù)。

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The role of ROMA model combined with HE4 and CA125 in the diagnosis of ovarian cancer

Y ANG Qinhzhong1，F(xiàn)U Hongwei2，LI Xingshan3.1.Nuclear Medicine Dept，Jiangxi Maternal and Child Health Hospital，Jiangxi Nanchang 330006；2.Department of Clinical Laboratory，Jiangxi Provincial People’s Hospital，Jiangxi Nanchang 330006.

Objective To investigate the diagnostic value of combination detection of human epididymis protein 4(HE4)，carbohydrate antigen 125(CAl25)and the Risk of Ovarian Malignancy Algorithm(ROMA)in diagnosis of ovarian carcinoma．Methods Chemiluminescence immunoassay was used to detect the serum concentration of HE4 and CAl25 by in patients of ovarian carcinoma group(n=l00)，benign ovarian neoplasm group(n=100)and female healthy control group(n=100)．The ROMA based on the serum concentration of CAl25，HE4 and a woman’s menopausal status was used to calculate the predicted probability(PP)and estimate diagnostic results of the PP．Results⑴The median levels and standard deviation of HE4 and CAl25 were significantly higher in ovarian carcinoma group(320．2±210．6pmoL/L and 350．6±162．8kU/L，respectively)than those of the benign ovarian neoplasm group(52．8±12．6pmoL/L and 32．6±10．5kU/L，respectively)and female healthy control group(36．4±12．8pmoL/L and 21．4±8．2kU/L，respectively)(P＜0．01)．⑵The ROMA cut－off point classifying patients into high and low risk groups was established as 11．4%in premenopausal and 29．9%in postmenopausal women．The diagnosis sensitivity，specificity，positive predictive value and negative predictive value in premenopausal patients were respectively 87．0%，83．8%，71．1%and 93．4%；and those of the postmenopausal group were 88．4%，81．3%，91．0%and 76．5%．Conclusions Determination of ROMA combined with HE4 and CAl25 in patients with ovarian cancer is helpful to improve the accuracy of diagnosis of ovarian cancer．

Risk of ovarian malignancy algorithm；Human epididymis protein 4；Carbohydrate antigen 125；Ovarian neoplasms

R711．75，R446．62

A

1674－1129(2017)02－0160－03

10．3969/j.issn.1674－1129．2017．02．007

2016-11-09；

2017-03-20)

江西省衛(wèi)生廳科技計劃項目（20133129）

楊慶忠，男，1971年生，學士學位，副主任技師，臨床檢驗，體外標記免疫，電子郵箱：13970008992@126.com

付宏偉，男，1977年生，碩士學位，檢驗主管技師，生物化學與分子生物學，體外標記免疫，電子郵箱：jiangxifhw@163.com