楊保旺 徐菱陽 王愛華

蘭州大學(xué)第二醫(yī)院（甘肅蘭州 730000）

德朗綜合征1例報告及基因分析

楊保旺 徐菱陽 王愛華

蘭州大學(xué)第二醫(yī)院（甘肅蘭州 730000）

目的探討遺傳代謝病德朗綜合征（CdLS）的臨床特點及基因突變類型。方法回顧1例CdLS患兒的臨床資料及基因檢測結(jié)果。結(jié)果患兒，男，2歲。外貌特殊，頭小，眉毛濃密、雙側(cè)匯合于中線，睫毛長而卷曲，體質(zhì)量低，運動及智力發(fā)育落后。檢測患兒NIPBL基因發(fā)現(xiàn)c.7176T＞A（編碼區(qū)7176號核苷酸由T變?yōu)锳）的雜核苷酸變異。結(jié)論CdLS為罕見先天遺傳代謝病，臨床表現(xiàn)有特殊的面容及體征。NIPBL基因的c.7176T＞A突變在國內(nèi)外未見報道。

德朗綜合征； 基因突變； 遺傳代謝病

德朗綜合征(Cornelia de Lange syndrome，CdLS)又名阿姆斯特丹侏儒癥，是一種少見的遺傳病，臨床可表現(xiàn)為多器官發(fā)育畸形，發(fā)病率為0.6/100 000[1]，患兒無性別差異，同胞發(fā)病率為2%～5%。本文報告1例CdLS患兒的臨床資料及基因分析結(jié)果。

1 臨床資料

患兒，男，2歲10個月。因發(fā)熱、咳嗽3天，加重伴精神反應(yīng)差1天收住蘭州大學(xué)第二醫(yī)院?；純合倒聝海錾凡辉?，生后送福利院?；純荷L發(fā)育落后，入院體質(zhì)量僅4.8 kg、身長67 cm、頭圍40 cm，豎頭欠穩(wěn)，能翻身，不會爬，不會坐，不會說話。精神可，前囟閉合，有特殊面容，毛發(fā)濃密，前后發(fā)際低，連眉，睫毛長，鼻梁低平，鼻頭小而上翹，人中長且外凸，嘴唇薄，顴弓高（圖1）。眼瞼無浮腫，瞼結(jié)膜無蒼白，鞏膜無黃染，瞳孔等大等圓，直徑3 mm，對光反射靈敏。頸軟，無抵抗。雙肺呼吸音粗，可聞及痰鳴音。心、腹檢查未見異常。扁平手，通貫掌。陰莖短小，雙側(cè)陰囊空虛。雙下肢膝腱反射亢進(jìn)。入院后心臟彩色超聲示：肺動脈瓣及瓣上狹窄（輕度），降主動脈狹窄（輕度），肺動脈高壓（中度），心功能正常，三尖瓣反流（中度），肺動脈瓣反流。胸部正位片示：雙側(cè)支氣管肺炎。初步診斷為支氣管肺炎。因患兒有特殊面容、多器官發(fā)育畸形、體質(zhì)量極低，且伴運動及智力發(fā)育落后，考慮有先天性遺傳代謝性疾病，為CdLS，常見基因變異為NIPBL基因突變。

圖1 患兒特殊面容

征得福利院工作人員同意后，行相關(guān)基因及染色體檢查。染色體檢查采用G顯帶方法，計數(shù)20個分裂組，核型分析5個，未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常?；驒z測采用二代測序（高通量測序）、一代測序方法。利用FlexiGene DNA Kit提取基因組DNA，采用Nanodrop 2000超微量分光光度計（美國Thermo Fisher Scientific公司）測定DNA含量。靶向捕獲利用Agilent SureSelect Target Enrichment System Kit，使用RTA software（real-time analysis，Illumina）、CASAVA software v1.8.2（Illumina）、BWA、Genome Analysis Toolkit（GATK）軟件分析后，評估測序質(zhì)量。運用PolyPhen-2.2.2等軟件進(jìn)行變異注釋，最后，采用Sanger法對候選變異進(jìn)行驗證。基因檢查結(jié)果為NIPBL基因突變：NIPBL基因c.7176T＞A（編碼區(qū)7176號核苷酸由T變?yōu)锳）的雜核苷酸變異。該變異導(dǎo)致編譯第2392號氨基酸Cys的密碼子變?yōu)榻K止密碼子（p.Cys2392Ter），從而使肽鏈合成提前終止，為無義突變。該變異可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能受影響（圖2）。該變異為新發(fā)變異，其致病性尚未見文獻(xiàn)報道（所參考數(shù)據(jù)庫：HGMD Pro及PubMed），該變異不屬于多態(tài)性變化，在人群中的發(fā)生頻率極低。用MutationTaster軟件對蛋白功能損傷預(yù)測該變異為很可能致病（disease_causing_automatic），故認(rèn)為該變異為本病的致病基因，患兒CdLS基因診斷明確。

圖2 患兒基因檢測結(jié)果

2 討論

CdLS是一種先天多發(fā)性發(fā)育異常綜合征[2]。1933年首先由 Cornelia de lange 描述，為常染色體顯性遺傳性疾病。檢索相關(guān)數(shù)據(jù)庫（CNKI/萬方/維普數(shù)據(jù)庫），國內(nèi)共有相關(guān)文獻(xiàn)報道17篇，有相關(guān)病例20例，所有患兒全部具有特殊面容（一字眉/連眉，睫毛長且卷曲，毛發(fā)濃密，耳位低、鼻梁低平），通貫手，體質(zhì)量及智力均較低下。主要依據(jù)臨床診斷，僅有4例患兒進(jìn)行了基因診斷，其中2例有基因突變，均為NIPBL基因突變。

Van Allen等[3]將CdLS分為3型。Ⅰ型即經(jīng)典型，具有典型的面容及骨骼畸形，多有宮內(nèi)發(fā)育遲緩，生后中到重度精神運動發(fā)育遲滯，伴有嚴(yán)重畸形，最終導(dǎo)致嚴(yán)重殘疾或死亡；Ⅱ型即輕型，有相似面容，但骨骼畸形較經(jīng)典型輕，可隨年齡增長逐漸表現(xiàn)出來，輕度精神運動發(fā)育遲滯，很少有嚴(yán)重的宮內(nèi)、宮外發(fā)育遲緩；Ⅲ型多與染色體的非整倍體或致畸突變有關(guān)。也有學(xué)者將CdLS分為典型及輕型兩大類[4]，兩者均有較易分辨的特殊面容，但輕型患者極少有四肢和心臟畸形，且輕型CdLS患兒的認(rèn)知能力缺陷相對較輕。本病主要臨床特征包括[2]：①產(chǎn)前和產(chǎn)后發(fā)育滯后，出生體質(zhì)量低，生后發(fā)育落后；②小頭；③嚴(yán)重智力發(fā)育滯后，語言落后；④喂養(yǎng)困難；⑤畸形，主要為肢體殘缺，表現(xiàn)小手、小腳，并指，第5指內(nèi)彎；⑥特征面容，弓形眉、連體眉、短鼻、鼻孔前傾、長人中、耳位低、上唇薄、嘴角上翹、顎/頜小。CdLS的診斷主要根據(jù)病史及臨床表現(xiàn)，確診需行基因?qū)W診斷。本病無有效治療手段。有報道如合并多系統(tǒng)畸形如肢體畸形、先天性心臟病、腭裂以及生后喂養(yǎng)困難等，影響患兒預(yù)后。

CdLS病因不詳，通常認(rèn)為與基因突變有關(guān)，目前已識別的CdLS致病基因有3個，分別是位于5號染色體的NIPBL基因[5]（約50%患者存在該基因突變），位于X染色體上的SMCIA基因[6]（約5%的患者存在該基因突變），和位于10號染色體的SMC3基因[7]（目前僅有1例報道）。目前國內(nèi)報道了20例CdLS患兒，進(jìn)行基因突變測定的4例中2例發(fā)現(xiàn)突變基因，均為NIPBL基因[8]，1例為NIPBL基因20號外顯子檢測到c.4321G＞T雜合突變，另1例為NIPBL基因38號內(nèi)含子c.6589+5G＞C雜合突變。

本例患兒有特殊面容、扁平手、通貫掌、陰莖短小、雙側(cè)陰囊空虛，且有低體質(zhì)量，運動及智力發(fā)育落后，其臨床表現(xiàn)及特殊的外貌體征符合CdLS表現(xiàn)?；驒z測發(fā)現(xiàn)有NIPBL基因c.7176T＞A的雜核苷酸變異。該變異為新發(fā)現(xiàn)的基因突變，其致病性尚未見文獻(xiàn)報道。用MutationTaster軟件對蛋白功能損傷預(yù)測顯示該變異為很可能致病。因此認(rèn)為該變異為本病例的致病基因。NIPBL基因是CdLS I型的致病基因，為常染色體顯性遺傳。對于該類遺傳方式，雜合變異可能導(dǎo)致發(fā)病。由于該患兒系孤兒，故未能對其父母進(jìn)行基因檢測。

參考文獻(xiàn)：

[1] Liu J, Baynam G. Cornelia de Lange syndrome [J]. Adv Exp Med Biol, 2010, 685:111-123.

[2] Oliver C, Bedeschi MF, Blagowidow N, et al. Cornelia de Lange syndrome: extending the physical and psychological phenotype [J]. Am J Med Genet A, 2010, 152A(5):1127-1135.

[3] Van Allen MI, Filippi G, Siegel-Bartelt J, et al. Clinical variability within Brachmann-de Lange syndrome: a proposed classification system [J]. Am J Med Genet, 1993, 47(7):947-958.

[4] Ireland M, Donnai D, Burn J. Brachmann-de Lange syndrome. Delineation of the clinical phenotype [J]. Am J Med Genet, 1993, 47(7):959-964.

[5] Krantz ID, McCallum J, DeScipio C, et al. Cornelia de Lange syndrome is caused by mutations in NIPBL, the human homolog of Drosophila melanogaster Nipped-B [J]. Nat Genet，2004, 36(6):631-635.

[6] Musio A, Selicorni A, Focarelli ML, et al. X-linked Cornelia de Lange syndrome owing to SMC1L1 mutations [J]. Nat Genet, 2006, 38(5):528-530.

[7] Kalal GI, Raina VP, Nayak VS, et al. Cornelia de Lange syndrome: a case study [J]. Genet Test Mol Biomarkers, 2009, 13(1):15-18.

[8] 鐘秋連. 運用細(xì)胞和分子遺傳學(xué)方法對Cornelia de Lange綜合征患者進(jìn)行遺傳診斷 [D]. 中南大學(xué), 2011.

Genetic analysis of Cornelia de Lange syndrome in one case

YANG Baowang, XU Lingyang, WANG Aihua
(The Second Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730000, Gansu, China)

ObjectiveTo explore the clinical features and gene mutation types of Cornelia de Lange syndrome (CdLS), an inherited metabolic disease.MethodsThe clinical data and gene detection results of one case of CdLS were retrospectively analyzed.ResultsTwo-year-old male had special appearance, microcephaly, bushy eyebrows with both sides meeting in the midline, long curly eyelashes, low body mass, and motor and mental retardation. NIPBL gene detection found the variation of the nucleotide in c.7176T＞A (nucleotide 7176 in coding region changed from T to A).ConclusionsCdLS is a rare congenital inherited metabolic disease. The clinical manifestations were special appearance and signs. The c.7176T＞A mutation in NIPBL gene has not been reported at home and abroad.

Cornelia de Lange syndrome; gene mutation; inherited metabolic diseases

10.3969/j.issn.1000-3606.2017.03.013

2016-08-29)

(本文編輯：蔡虹蔚)

王愛華 電子信箱：aihua970@163.com