程初勇 梁麗梅 劉燕 李志樂(lè)++李克拉 劉文靜 張倬華 黃照河

【摘要】目的探討龍血竭對(duì)急性心肌梗死家兔左心功能的保護(hù)作用。

方法將30只家兔隨機(jī)分為三組，假手術(shù)組、心肌梗死組、龍血竭干預(yù)組，每組10只。采用左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎法，建立急性心肌梗死模型。觀察HE染色的心肌組織結(jié)構(gòu)變化，測(cè)量心率、左心室收縮末壓（LVSP）、左心室舒張末壓（LVEDP）、左心室內(nèi)壓最大上升速率（+dp/dtmax）、左心室內(nèi)壓最大下降速率（-dp/dtmax）。

結(jié)果龍血竭干預(yù)組心肌組織結(jié)構(gòu)明顯好于心肌梗死組；心肌梗死組和龍血竭干預(yù)組其心率較假手術(shù)組明顯減慢，龍血竭干預(yù)組心率減慢更明顯（P<0.05或0.01）。心肌梗死組、龍血竭干預(yù)組與假手術(shù)組比較，其LVSP均明顯下降、LVEDP均明顯升高，而心肌梗死組與龍血竭干預(yù)組比較，其LVSP下降更明顯、LVEDP升高更明顯（P<0.05或0.01）。心肌梗死組和龍血竭干預(yù)組其+dp/dtmax和-dp/dtmax均較假手術(shù)組明顯下降，且心肌梗死組較龍血竭干預(yù)組下降更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

結(jié)論龍血竭對(duì)急性心肌梗死家兔左心功能具有較好的保護(hù)作用。

【關(guān)鍵詞】龍血竭；急性心肌梗死；左心功能；保護(hù)

中圖分類號(hào)：R542.2+2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2017.01.004

A study on protection effect of Resina Draconis on left ventricular function of acute myocardial infarction rabbits

[HJ1*2][HJ]

CHENG Chuyong1，LIANG Limei2，LIU Yan3，LI Zhile3，LI Kela3，LIU Wenjing1，ZHANG Zhuohua1，HUANG Zhaohe3▲

（1.Graduate School， 2. Department of Laboratory Medicine of Affiliated Hospital， 3.Department of Cardiology of Affiliated Hospital， Youjiang Medical University for Nationalities， Baise 533000， China）

[HJ1*2][HJ]

【Abstract】ObjectiveTo study protection effect of Resina Draconis on left ventricular function of acute myocardial infarction rabbits.

Methods30 rabbits were randomly divided into sham operation group， myocardial infarction group and Resina Draconis intervention group with 10 rabbits in each group. Acute myocardial infarction model was established by left anterior descending coronary artery ligation method. The changes of myocardial tissue structure were observed by HE staining， and heart rate， left ventricular end systolic pressure（LVSP）， left ventricular end diastolic pressure（LVEDP）， maximum rise rate of left ventricular pressure（+dp/dtmax） and maximum descending rate of left ventricular pressure （-dp/dtmax） were measured.

ResultsThe structure of myocardium in the Resina Draconis intervention group was significantly better than that in the myocardial infarction group. Heart rates of myocardial infarction group and Resina Draconis intervention group significantly slowed down compared with that of the sham operation group， and that of the Resina Draconis intervention group decreased more significantly（P<0.05 or 0.01）. Compared with that of the sham operation group， LVSP of both myocardial infarction group and Resina Draconis intervention group significantly decreased， while LVEDP significantly increased，and LVSP of the myocardial infarction group decreased more significantly， and LVEDP increased more significantly than those of the Resina Draconis intervention group（P<0.05 or 0.01）. In addition， the +dp/dtmax and -dp/dtmax of the myocardial infarction group and Resina Draconis intervention group decreased more significantly than those of the sham operation group， and those of the myocardial infarction group decreased more significantly than those of the Resina Draconis intervention group， difference was statistically significant（P<0.01）.

ConclusionResina Draconis has good protective effect on left ventricular function in acute myocardial infarction rabbits.

【Key words】Resina Draconis； acute myocardial infarction； left ventricular function； protection

隨著經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展和人們的生活水平不斷提高，人們的生活方式也發(fā)生了明顯改變，心血管疾病的發(fā)病率也逐年攀升，特別是急性心肌梗死的發(fā)生率更是快速增長(zhǎng)，2014年中國(guó)急性心肌梗死死亡率城市為55.32/10萬(wàn)，農(nóng)村為68.6/10萬(wàn)[1]。雖然近年來(lái)一些新的診療技術(shù)得到廣泛應(yīng)用，但急性心肌梗死后心功能不全仍是其重要的死亡原因。如何保護(hù)急性心肌梗死后患者心功能、降低其死亡率已成為當(dāng)今國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)予龍血竭對(duì)急性心肌梗死家兔進(jìn)行干預(yù)，觀察其對(duì)急性心肌梗死家兔左心功能的保護(hù)作用，為進(jìn)一步改善急性心肌梗死后心功能不全探索新的防治思路和新的理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1動(dòng)物

家兔30只，雌雄各一半，體重為2.0～30 kg。右江民族醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK桂20120003。

1.2設(shè)備

V100小型動(dòng)物呼吸機(jī)（上海玉研科學(xué)儀器有限公司），BL420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（成都泰盟科技公司），ECG6511心電圖機(jī)（上海光電醫(yī)用電子儀器有限公司），MICROM EC3501組織包埋機(jī)（Thermo scientifi，德國(guó)），Shandon Varistain Gemini ES全自動(dòng)染色機(jī)（Thermo scientific，德國(guó)），HM315切片機(jī)（Thermo scientific，德國(guó)），ASP300S自動(dòng)組織脫水機(jī)（Leica，德國(guó)）。

1.3藥物與試劑

龍血竭（桂林三金藥業(yè)藥品研究所提供，紅褐色粉末狀），20%氨基甲酸乙酯（成都市科龍化工試劑廠），10%中性福爾馬林固定液（無(wú)錫市江原實(shí)業(yè)技貿(mào)總公司）。

1.4分組及給藥

將30只家兔隨機(jī)分成三組：假手術(shù)組、心肌梗死組、龍血竭干預(yù)組。每組10只，雌雄各半，假手術(shù)組與心肌梗死組每天正常飲食，龍血竭干預(yù)組用龍血竭180 mg·kg-1·d-1加玉米淀粉做成飼料形狀，觀察家兔完全進(jìn)食，手術(shù)前連續(xù)給藥7天。

1.5家兔心肌梗死模型的制備

手術(shù)前禁食12小時(shí)，按1.0 g·kg-1應(yīng)用20%氨基甲酸乙酯耳緣靜脈注射麻醉家兔，仰臥位固定手術(shù)臺(tái)上，四肢皮下連接心電圖機(jī)，監(jiān)測(cè)動(dòng)物心電圖，剪去頸部毛發(fā)，切開皮膚，暴露氣管，行氣管插管，連接小型動(dòng)物呼吸機(jī)（呼吸頻率：45～50次/分鐘，潮氣量16～20 ml，呼吸比1∶1）。于胸骨左側(cè)2～3 cm切開皮膚，鈍性分離肌肉，剪斷左側(cè)第3～5肋骨，暴露心臟，小心剪開心包膜，于左心耳處找到左冠狀動(dòng)脈前降支，從前降支下方1～2 mm進(jìn)針，牽引出30號(hào)縫合絲線，假手術(shù)組不結(jié)扎；心肌梗死組和龍血竭干預(yù)組均在前降支上墊放約1.0 cm長(zhǎng)PE塑料細(xì)管結(jié)扎30分鐘后，剪去縫合線，開放血管2小時(shí)。造模過(guò)程中，Ⅱ?qū)?lián)ST段弓背抬高，心肌組織變?yōu)榘导t色為造模成功（心電圖見圖1）。

圖1三組家兔造模過(guò)程心電圖

1.6測(cè)量家兔心率、LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax

所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均剪去前降支結(jié)扎線使心肌再灌注2小時(shí)后，動(dòng)脈測(cè)壓管連接15 G注射針頭，另一頭再連接到生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，直接從心尖部將注射針頭插入左心室，測(cè)量心率、左心室收縮末壓（LVSP）、左心室舒張末壓（LVEDP）、左心室內(nèi)壓最大上升速率（+dp/dtmax）、左心室內(nèi)壓最大下降速率（-dp/dtmax）。

1.7心肌組織HE染色

將以上各組家兔心臟分離出體外，選用左心室前壁心肌組織，10%中性福爾馬林固定，進(jìn)行HE常規(guī)染色。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，正態(tài)分布的計(jì)量資料用（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD方法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1龍血竭對(duì)心肌組織的影響

假手術(shù)組：心肌組織HE染色心肌纖維結(jié)構(gòu)層次清晰，細(xì)胞排列整齊有序，細(xì)胞核清晰可見，染色濃淡均勻一致（圖2A）；心肌梗死組：心肌組織HE染色顏色變深變濃，細(xì)胞核清晰欠佳，細(xì)胞間紅細(xì)胞滲出，心肌纖維排列紊亂，可見纖維斷裂現(xiàn)象（圖2B）；龍血竭干預(yù)組：心肌組織HE染色胞漿濃染輕，結(jié)構(gòu)比較規(guī)則，心肌纖維較為清晰，細(xì)胞核染色均勻，細(xì)胞間可見紅細(xì)胞少量滲出（圖2C）。

A：假手術(shù)組；B心肌梗死組；C：龍血竭干預(yù)組。

圖2 心肌梗死后心肌組織壞死肉眼觀及三組家兔心肌組織HE染色（10×40倍）

2.2龍血竭對(duì)急性心肌梗死家兔心率、LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax的影響

實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)心肌梗死組和龍血竭干預(yù)組其心率較假手術(shù)組明顯減慢，龍血竭干預(yù)組心率減慢更明顯（P<0.05或0.01）。心肌梗死組、龍血竭干預(yù)組與假手術(shù)組比較，其LVSP均明顯下降、LVEDP均明顯升高，而心肌梗死組與龍血竭干預(yù)組比較，其LVSP下降更明顯、LVEDP升高更明顯（P<0.05或0.01）。心肌梗死組和龍血竭干預(yù)組其+dp/dtmax和-dp/dtmax均較假手術(shù)組明顯下降，且心肌梗死組較龍血竭干預(yù)組下降更明顯（均P<0.01）。詳見表1。

表1三組家兔心率、LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax（n=10，±s）

分組心率（次/分） LVSP（mmHg）LVEDP（mmHg） +dp/dtmax（mmHg/ms）-dp/dtmax（mmHg/ms）

假手術(shù)組291.90±28.25110.86±7.58-15.86±5.221.97±0.12-2.04±0.14

心肌梗死組272.50±2.72a44.84±5.71b16.15±1.48b0.56±0.11b-0.60±0.08b

龍血竭干預(yù)組240.50±4.53bc71.12±6.12bc-12.48±3.15ac1.28±0.93bc-1.29±0.14bc

F24.48259.68235.38418.71329.20

P<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001

注：與假手術(shù)組比較，aP<0.05，bP<0.01；與心肌梗死組比較，cP<0.01。

3討論

急性心肌梗死發(fā)生后，冠狀動(dòng)脈堵塞導(dǎo)致心肌細(xì)胞嚴(yán)重持久缺血缺氧，心肌細(xì)胞壞死，心肌纖維斷裂溶解，從而出現(xiàn)明顯的心功能不全，這是導(dǎo)致急性心肌梗死患者死亡的重要因素之一。另外，當(dāng)急性心肌梗死發(fā)生時(shí)，很多炎癥因子如TNFα、IL10、ICAM1等參與其病理生理過(guò)程，使心室重構(gòu)，進(jìn)一步加重心功能的惡化[2～3]。我們從本次實(shí)驗(yàn)心肌組織HE染色結(jié)果圖中不難看出，假手術(shù)組家兔心肌組織結(jié)構(gòu)清晰，肌節(jié)明顯，染色濃淡均勻（如圖2A），而心肌梗死組心肌組織HE染色中可見染色顏色明顯加深，肌纖維水腫明顯，排列結(jié)構(gòu)明顯紊亂，符合心肌梗死后心肌組織改變圖像（如圖2B）。龍血竭干預(yù)組心肌組織的HE染色中可見組織染色顏色濃淡較均勻，纖維結(jié)構(gòu)比較清晰，肌纖維水腫不明顯，明顯好于心肌梗死組（如圖2C）。這提示龍血竭對(duì)急性心肌梗死家兔心肌組織起到很好的保護(hù)作用，能明顯提高心肌纖維耐受缺血缺氧的能力。

LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax都是反映心臟功能狀態(tài)的指標(biāo)，其中+dp/dtmax較好地反映心臟收縮功能，而-dp/dtmax較好反映心臟舒張功能，LVSP水平高體現(xiàn)左心室收縮功能好，LVSP水平低體現(xiàn)左心室收縮功能下降，而LVEDP水平高體現(xiàn)左心舒張功能下降，LVEDP水平低體現(xiàn)左心舒張功能好[4]。當(dāng)發(fā)生急性心肌梗死時(shí)，左心室功能會(huì)明顯下降，LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax均明顯降低，而LVEDP會(huì)明顯升高[5]。本次實(shí)驗(yàn)中我們也應(yīng)用LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax等指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)急性心肌梗死家兔左心功能的變化情況。研究發(fā)現(xiàn)，心肌梗死組、龍血竭干預(yù)組與假手術(shù)組比較，其LVSP均明顯下降、LVEDP均明顯升高，而心肌梗死組與龍血竭干預(yù)組比較，其LVSP下降更明顯、LVEDP升高更明顯（P<0.05或0.01）。心肌梗死組和龍血竭干預(yù)組其+dp/dtmax和-dp/dtmax均較假手術(shù)組明顯下降，且心肌梗死組較龍血竭干預(yù)組下降更明顯（均P<0.01）。說(shuō)明急性心肌梗死后左心功能均有明顯下降，左心收縮功能和舒張功能均受到不同程度的影響，但龍血竭干預(yù)組其左心收縮和舒張功受影響明顯減小，這提示龍血竭對(duì)急性心肌梗死家兔左心功能具有較好的保護(hù)作用。我們的研究還發(fā)現(xiàn)，心肌梗死組和龍血竭干預(yù)組其心率較假手術(shù)組明顯減慢，而龍血竭干預(yù)組心率減慢更明顯，兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或0.01），其具體機(jī)制尚不明確，有待進(jìn)一步深入研究。

龍血竭是廣西傳統(tǒng)名貴中藥，從百合科植物劍葉龍血樹分泌樹脂中提取得到，具有改善微循環(huán)、增加冠狀動(dòng)脈血流、抑制血小板聚集及降低血液黏滯度等作用[6]。鮑文菁等研究發(fā)現(xiàn)[7]，服用復(fù)方龍血竭膠囊治療急性心肌梗死，可以縮小左心室末徑。Foroogh Namjoyan等學(xué)者進(jìn)行的隨機(jī)雙盲觀察研究發(fā)現(xiàn)[8]，龍血竭能明顯縮短治療傷口的愈合時(shí)間。Nian Xin等學(xué)者在大鼠局灶性腦缺血模型中發(fā)現(xiàn)[9]，龍血竭能夠提高大鼠的抗氧化活性，去除過(guò)多的自由基，并減少脂質(zhì)過(guò)氧化。林洪瑞等研究也發(fā)現(xiàn)[10]，龍血竭能減輕皮瓣中性粒細(xì)胞的聚集，促進(jìn)血管新生，改善血液供應(yīng)，能提高隨意皮瓣的成活率。以上這些研究表明，龍血竭藥理作用機(jī)理較為復(fù)雜，可能從活血化瘀、清除氧自由基、減少炎癥反應(yīng)等多方面發(fā)揮其藥理作用，而我們的研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)急性心肌梗死家兔左心功能具有較好的保護(hù)作用。

綜上所述，我們認(rèn)為龍血竭對(duì)急性心肌梗死家兔心肌組織起到很好的保護(hù)作用，能明顯提高心肌纖維耐受缺血缺氧的能力，從而對(duì)急性心肌梗死左心功能具有更好的保護(hù)作用，對(duì)急性心肌梗死的防治具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，但其機(jī)理尚未明確，值得我們廣大學(xué)者進(jìn)一步去深入研究和探索，為心血管疾病的防治提供新的思路和理論依據(jù)。

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（收稿日期：2016-12-04修回日期：2017-02-09）

（編輯：潘明志）