黃顥+韋鳳英+潘國剛+鄧益斌

【摘要】目的探討血清胱抑素C（Cys C）、同型半胱氨酸（Hcy）、β2微球蛋白（β2MG）及尿微量白蛋白（mAlb）聯(lián)合檢測在糖尿病腎?。―N）早期診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

方法選取264例2型糖尿?。═2DM）患者為研究對象，分為兩個觀察組，即132例糖尿病腎病患者為DN組，132例單純糖尿病患者為T2DM組；另選取132例同期健康體檢者為對照組。在貝克曼庫爾特AU680型全自動生化分析儀上采用乳膠增強(qiáng)免疫散射比濁法測定血清中的Cys C、β2MG及尿液mAlb水平；羅氏Cobas E411型全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上采用酶動力學(xué)法測定血清Hcy水平。對比分析各組指標(biāo)的檢測結(jié)果。

結(jié)果與對照組比較，DN組和T2DM組的Cys C、Hcy、β2MG、mAlb四項(xiàng)觀察指標(biāo)的檢測結(jié)果均明顯增高（P<0.01），且DN組的四項(xiàng)指標(biāo)檢測結(jié)果增高更明顯 （P<0.01）；相關(guān)性分析結(jié)果顯示，Cys C與Hcy呈正相關(guān)（r=0.663， P<0.05），Cys C、Hcy與 mAlb均呈負(fù)相關(guān)（r=-0.712、-0.632， P均<0.05），而Cys C、Hcy、mAlb均與β2MG相關(guān)不顯著；ROC曲線分析結(jié)果也顯示，Cys C、Hcy、β2MG及mAlb的ROC曲線下面積分別為0.815、0.916、0.807和0.783，標(biāo)準(zhǔn)誤（s〖AKx-D〗）分別為0.050、0.023、0.045和0.018，95%置信區(qū)間分別為0.736～0.893、0.875～0.965、0.733～0.885和0.712～0.865；四項(xiàng)指標(biāo)（Cys C+Hcy+β2MG+mAlb）聯(lián)合檢測的陽性率為96.21%（127/132），三項(xiàng)指標(biāo)（Cys C+Hcy+β2MG）聯(lián)合檢測的陽性率為90.15%（119/132），兩項(xiàng)指標(biāo)（Cys C+Hcy）聯(lián)合檢測的陽性率為84.10%（119/132），均明顯高于單項(xiàng)指標(biāo)（Cys C）檢測的陽性率71.96%（95/132）。

結(jié)論定期監(jiān)測血清Cys C、Hcy、β2MG及尿液mAlb等多項(xiàng)指標(biāo)變化，有助于了解糖尿病腎病患者的病情發(fā)展，其臨床應(yīng)用價(jià)值優(yōu)于單項(xiàng)觀察指標(biāo)，值得推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】血清胱抑素C；同型半胱氨酸；β2微球蛋白；尿微量白蛋白；糖尿病腎病

中圖分類號：R446.1文獻(xiàn)標(biāo)識碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2017.02.003

【Abstract】Objective To investigate the clinical value of combined detection of serum cystatin C（Cys C），homocysteine（Hcy），β2microglobulin （β2MG） and microalbuminuria（mAlb） in early diagnosis of diabetic nephropathy（DN）.

Methods 264 cases of type 2 diabetes mellitus（T2DM） patients were selected as research objects and divided into two observation groups，that was，132 DN patients were selected as DN group，and 132 patients with simple diabetes mellitus as T2DM group.And another 132 healthy subjects were selected as control group.And then，serum levels of Cys C，β2MG and mAlb were determined by latex enhanced immune scattering turbidimetry on Beckman Kurt AU680 automatic biochemical analyzer.Serum level of Hcy was measured by enzyme kinetic method on Roche Cobas E411 automatic electrochemiluminescence immunoassay analyzer.Test results of each index were compared and analyzed among all groups.

ResultsCompared with the control group，detection results of Cys C，Hcy，β2MG，mAlb of the DN group and T2DM group all significantly increased（P<0.01），and the detection results of the four indexes of the DN group increased more significantly（P<0.01）.Correlation analysis showed that the Cys C was positively correlated with Hcy（r=0.663，P<0.05），Cys C，Hcy and mAlb were negatively correlated（r=-0.712，-0.632，all P<0.05），while Cys C，Hcy，mAlb were all not significantly correlated with β2MG.ROC curve analysis results also showed that area under the ROC curve of Cys C，Hcy，β2MG and mAlb were 0.815，0.916，0.807 and 0.783，respectively，standard errors（s〖AKx-D〗） was 0.050，0.023，0.045 and 0.018，respectively，95% confidence intervals was 0.736～0.893，0.875～0.965，0.733～0.885 and 0.712～0.865，respectively.The positive rate of combined detection of the four indicators （Cys C+Hcy+β2MG+mAlb） was 96.21%（127/132），that of combined detection of the three indicators （Cys C+Hcy+β2MG） was 90.15%（119/132），and that of combined detection of the two indicators （Cys C+Hcy） was 84.10%（119/132），all significantly higher than that 71.96%（95/132） of single index （Cys C）.

ConclusionRegular monitoring for changes of indexes like Cys C，Hcy，β2MG and urine mAlb can help to understand the development of diabetic nephropathy patients，and its clinical value is better than that of single observation index.Thus， it is worthy of popularization and application.

【Key words】Cys C；Hcy；β2MG；mAlb；DN

根據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟（IDF）的最新統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，我國糖尿病患者已高達(dá)1.14億，居世界首位。糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）是糖尿病發(fā)展過程中導(dǎo)致的終末期病變，是2型糖尿?。═2DM）最常見的嚴(yán)重并發(fā)癥，其對人體健康的危害程度居慢性非傳染性疾病的第三位[1]。DN隱蔽性強(qiáng)，當(dāng)患者出現(xiàn)典型臨床癥狀時(shí)，通常為時(shí)已晚，即使通過治療也難以達(dá)到理想效果[2～3]。因此，尋找糖尿病腎病早期診斷指標(biāo)對早期預(yù)防腎功能衰竭具有重要的意義。本文探討血清胱抑素C（Cys C）、同型半胱氨酸（Hcy）、β2微球蛋白（β2MG）、尿微量白蛋白（mAlb）等多指標(biāo)聯(lián)合檢測在DN早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值，以期為DN早期診斷與治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2014年2月～2016年9月我院內(nèi)分泌科收治的2型糖尿病患者264例為研究對象，其中糖尿病腎病患者132例（DN組），男84例，女48例，平均年齡（53.5±8.3）歲，平均病程（6.5±3.3）年；單純糖尿病患者132例（T2DM組），男76例，女56例，平均年齡（52.5±8.6）歲，平均病程（5.1±3.5）年。選取同期健康體檢者132例為對照組，男70例，女62例，平均年齡（55.8±8.9）歲，經(jīng)糖耐量試驗(yàn)排除糖尿病，血壓、血脂均正常，無糖尿病及高血壓家族史。三組對象一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2儀器與試劑

Cys C和β2MG檢測試劑盒購自上海執(zhí)誠生物科技有限公司；Hcy檢測試劑盒購自上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司；mAlb試劑盒購自寧波美康生物科技有限公司；貝克曼庫爾特AU680型全自動生化分析儀購自美國貝克曼庫爾特有限公司；羅氏Cobas E411型全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀購自德國ROCHE有限公司。

1.3入組標(biāo)準(zhǔn)

（1）2型糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)符合1999年世界衛(wèi)生組織（WHO）規(guī)定的診斷與分型標(biāo)準(zhǔn)；（2）近期無經(jīng)常熬夜、吸煙、飲酒、飲咖啡等不良影響因素；（3）排除患有嚴(yán)重心、肝、肺、腎、腦等臟器功能不全患者；（4）排除血液系統(tǒng)疾病及急性感染性疾病患者。

1.4方法

所有觀察對象均空腹?fàn)顟B(tài)下采集靜脈血5 ml，留取中段尿2 ml。血液標(biāo)本2000 r/min離心10 min，取血清檢測；尿液標(biāo)本2000 r/min離心5 min，取上清液檢測。其中Cys C、β2MG、mAlb采用乳膠增強(qiáng)免疫散射比濁法測定，在貝克曼庫爾特AU680型全自動生化分析儀上樣檢測；Hcy采用酶動力學(xué)法測定，在羅氏Cobas E411型全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上樣檢測。所有檢測項(xiàng)目在實(shí)驗(yàn)前均進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控分析，高、中、低值質(zhì)控均在控。結(jié)果判斷采用試劑盒說明書中的參考范圍：Cys C為0～1.25 mg/L；Hcy為0～15.0 μmol/L；β2MG為0～2.8 mg/L；mAlb為0～30 mg/L。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（〖AKx-D〗±s）表示，多個樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用q檢驗(yàn)（NewmanKeuls法），計(jì)數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson檢驗(yàn)；診斷效能評價(jià)采用ROC曲線，檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1各組觀察指標(biāo)檢測結(jié)果的比較

與對照組比較，DN組和T2DM組的Cys C、Hcy、β2MG、mAlb四項(xiàng)觀察指標(biāo)的檢測結(jié)果均明顯增高（P<0.01），且DN組增高更明顯 （P<0.01）。見表1。

2.2DN組中各觀察指標(biāo)間的相關(guān)性分析

DN組中Cys C與Hcy呈正相關(guān)（r=0.663， P<0.05）；Cys C、Hcy與 mAlb均呈負(fù)相關(guān)（r=-0.712、-0.632，P均<0.05）；Cys C、Hcy、mAlb均與β2MG相關(guān)不顯著。

2.3DN組中各觀察指標(biāo)對DN的診斷效能

根據(jù)DN組和對照組的各指標(biāo)檢測結(jié)果繪制出ROC曲線圖，并計(jì)算曲線下面積、標(biāo)準(zhǔn)誤和置信區(qū)間。結(jié)果顯示，Cys C、Hcy、β2MG及mAlb的ROC曲線下面積分別為0.815、0.916、0.807和0.783，標(biāo)準(zhǔn)誤（s）分別為0.050、0.023、0.045和0.018，95%置信區(qū)間分別為0.736～0.893、0.875～0.965、0.733～0.885和0.712～0.865，均具有較高的診斷效能。見圖1。

2.4DN組中多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測與單項(xiàng)指標(biāo)的陽性率比較

四項(xiàng)指標(biāo)（Cys C+Hcy+β2MG+mAlb）聯(lián)合檢測的陽性率為96.21%，三項(xiàng)指標(biāo)（Cys C+Hcy+β2MG）聯(lián)合檢測的陽性率為90.15%，兩項(xiàng)指標(biāo)（Cys C+Hcy）聯(lián)合檢測的陽性率為84.10%，單項(xiàng)指標(biāo)（Cys C）檢測的陽性率71.96%，四組診斷陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），單項(xiàng)指標(biāo)診斷陽性率低于聯(lián)合檢測，并且診斷陽性率隨著聯(lián)合指標(biāo)數(shù)量增多而有遞增趨勢。見表2。

3討論

Cys C是一種低分子量堿性糖化蛋白質(zhì)，在所有有核細(xì)胞中恒定持續(xù)表達(dá)，生成速度和循環(huán)水平較為恒定，不受肌肉、感染、蛋白排泄率的影響，且與年齡、性別、腫瘤、免疫性和內(nèi)分泌疾病無關(guān)，是腎功能早期損傷較好的內(nèi)源性標(biāo)志物[4～5]。Hcy是一種與血管損傷密切相關(guān)的氨基酸，DN早期往往會發(fā)生血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，從而導(dǎo)致Hcy增高，是腎功能早期損傷的另一內(nèi)源性標(biāo)志物[6]。β2MG是一種小分子量蛋白質(zhì)，生成量恒定，不與血漿蛋白結(jié)合，可自由通過腎小球，幾乎全被近曲腎小管完全吸收，繼而在腎臟進(jìn)行分解代謝，能較早反映腎小球?yàn)V過功能的損傷情況，也作為早期腎功能損傷的敏感指標(biāo)物[7]。正常情況下，腎小球?yàn)V過膜上的負(fù)電荷屏障會阻止mAlb通過，尿液中幾乎檢測不到mAlb的存在，但腎損傷早期主要破壞腎小球?yàn)V過膜的負(fù)電荷屏障，致使尿液中出現(xiàn)大量的mAlb，因此，檢測尿液中的mAlb含量變化也可反映腎功能的早期損傷情況[8]。盡管這些觀察指標(biāo)都能從不同角度反映腎功能早期變化情況，但單一指標(biāo)的診斷效能比較低，因此推測，多指標(biāo)聯(lián)合檢測有可能會提高其臨床診斷效能。

本研究結(jié)果顯示，與對照組比較，DN組和T2DM組的Cys C、Hcy、β2MG、mAlb四項(xiàng)觀察指標(biāo)的檢測結(jié)果均明顯增高，且DN組的增高更明顯；相關(guān)性分析結(jié)果顯示，Cys C與Hcy呈正相關(guān)，Cys C、Hcy與 mAlb均呈負(fù)相關(guān)，而Cys C、Hcy、mAlb均與β2MG相關(guān)無顯著性。說明當(dāng)腎小球功能出現(xiàn)輕微損傷時(shí)，血漿Cys C、Hcy、β2MG及尿mAlb濃度均可出現(xiàn)異常變化，且會隨著病情加劇不斷加重。ROC曲線分析結(jié)果也顯示，Cys C、Hcy、β2MG及mAlb的ROC曲線下面積分別為0.815、0.916、0.807和0.783，標(biāo)準(zhǔn)誤（s〖AKx-D〗）分別為0.050、0.023、0.045和0.018，95%置信區(qū)間分別為0.736～0.893、0.875～0.965、0.733～0.885和0.712～0.865，說明這四項(xiàng)觀察指標(biāo)均具有較高的診斷效能，都可以用于DN的早期診斷，而且四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測的陽性率（96.21%）明顯高于單項(xiàng)指標(biāo)檢測的陽性率（71.96%）。

綜上所述，定期監(jiān)測Cys C、Hcy、β2MG、mAlb等多項(xiàng)指標(biāo)變化，有助于了解DN患者的病情發(fā)展，其臨床應(yīng)用價(jià)值優(yōu)于單項(xiàng)觀察指標(biāo)，值得推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1]Pasala SK，Rao AA，Sridhar GR，et al.Built environment and diabetes[J].Int J Diabetes Dev Ctries，2010，30（2）：6368.

[2]李自順，黃共產(chǎn).多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測在糖尿病腎病早期診斷中的臨床應(yīng)用[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2016，10（4）：1920.

[3]鄭利平.血清游離脂肪酸、胱抑素C與2型糖尿病腎病關(guān)系研究[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2014，41（1）：128129，133.

[4]Inker LA，Okparavero A，et al.Cystatin C as a marker of glomerular filtration rate：prospects and limitations[J].Curr Opin Nephrol Hypertens，2011，20（6）：631639.

[5]Hojs R，Bevc S，Ekart R，et al.Serum cystatin Cbased equation compared to serum creatininebased equations for estimation of glomerular filtration rate in patients withchronic kidney disease[J].Clin Nephrol，2008，70（1）：1017.

[6]劉成功.胱抑素C、同型半胱氨酸與早期糖尿病腎病的關(guān)系[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2016，10（4）：1819.

[7]張鵬飛.尿胱抑素C在診斷老年2型糖尿病腎小管早期損傷中的臨床意義[J].中國老年學(xué)雜志，2013，33（6）：14041405.

[8]陳翠蘭，張興坤，車樹強(qiáng)，等.糖腎康膠囊對糖尿病腎病Ⅲ期尿微量白蛋白的影響[J].天津中醫(yī)藥，2014，31（10）：596598.

（收稿日期：2016-11-23 修回日期：2017-03-27）

（編輯：梁明佩）

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金（81460123）；百色市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（百科計(jì)字〔2016〕14號）；百色市右江區(qū)科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（右科計(jì)字〔2016〕1號）

作者簡介：黃顥，男，主管技師，研究方向：臨床檢驗(yàn)診斷技術(shù)研究與開發(fā)。Email：77278652@qq.com

▲通信作者：鄧益斌。Email：dengyb75@163.com