董婧婧，劉艷菊，陳祥勝，付偉，李鑫

[湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院（湖北省中藥炮制工程技術(shù)研究中心），湖北武漢430065]

三七粉對(duì)四氯化碳（C Cl4）誘導(dǎo)的大鼠慢性肝損傷的保護(hù)作用

董婧婧，劉艷菊，陳祥勝，付偉，李鑫

[湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院（湖北省中藥炮制工程技術(shù)研究中心），湖北武漢430065]

目的探討三七粉對(duì)四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)的慢性肝臟損傷和肝纖維化的保護(hù)作用。方法采用SD大鼠皮下注射10%CCl4花生油溶液，建立慢性肝損傷和肝纖維化模型，分別對(duì)給藥后模型大鼠血清中的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、炎癥因子（IL-1、IL-6及IL-8）和腫瘤壞死因子（TNF-α），以及肝勻漿中的丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和肝藥酶（Cyt.P450、Cyt.b5）等生化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，并通過蘇木精-伊紅染色法（HE）染色后，顯微觀察三七粉對(duì)模型大鼠肝臟病理變化的影響。結(jié)果三七粉降低CCl4模型大鼠ALT和AST水平，促進(jìn)Cyt.P450和Cyt.b5酶的活力，增強(qiáng)肝臟SOD和GSH-Px水平，降低肝臟MDA的水平，并且對(duì)IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α水平具有抑制作用。結(jié)論三七粉具有抗CCl4誘導(dǎo)的肝損傷和肝纖維化作用。

三七粉；四氯化碳；肝纖維化；肝損傷；保護(hù)作用

三七為五加科植物三七[panax notoginseng（Burkill）F.H.Chen ex C.H]的干燥根和根莖。藥性甘、微苦、溫、歸肝經(jīng)和胃經(jīng)，主要功效為止血化瘀、消腫定痛。在《中國藥典》（2015年版）中收載有三七粉飲片[1]，也是在中醫(yī)臨床中常用的組方藥物。近代研究發(fā)現(xiàn)，三七還有抗腫瘤、降血糖等作用[2-9]。本文通過皮下注射四氯化碳溶液建立大鼠肝損傷和肝纖維化模型，評(píng)價(jià)三七粉整體對(duì)慢性肝損傷和肝纖維化的保護(hù)作用，為拓展三七粉的臨床應(yīng)用范圍提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

SD大鼠，雄性，體重180～200g，清潔級(jí)[由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK（皖）2011-002；溫度19～23℃，濕度45%～55%，空調(diào)控制]。

1.2 試驗(yàn)藥物

聯(lián)苯雙酯片（上海信誼天平藥業(yè)有限公司），三七粉[購于云南省文山州（20頭、3年生），三七原料經(jīng)粉碎、過篩后制備得三七粉]。

1.3 試驗(yàn)試劑

細(xì)胞色素P450（cytochrome P450，Cyt.P450）（上海源葉生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：E30118），細(xì)胞色素b5（cytochrome b5，Cyt.b5）（上海源葉生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：E20089），谷胱甘肽（Glutathione，GSH）（上海源葉生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：E31034），谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）（上海源葉生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：E31036），丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）測(cè)定試劑盒、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）測(cè)定試劑盒、丙二醛（malondiadehyde，MDA）試劑盒和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）試劑盒（均購于江蘇省南京建成生物工程研究所）。

1.4 試驗(yàn)儀器

RT-6000酶標(biāo)儀（美國雷杜公司），JW3021HR離心機(jī)（安徽省合肥嘉文儀器裝備有限公司），GL-88B漩渦混合器（江蘇省海門其林貝爾儀器制造公司），移液器（德國eppendorf公司），DNP-9052BS-Ⅲ電熱恒溫箱（上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司），灌胃針頭，注射器，天平。

1.5 方法

1.5.1 動(dòng)物分組及給藥將SD雄性大鼠，隨機(jī)分成6組，每組10只，正常對(duì)照組和損傷對(duì)照組灌胃生理鹽水5mg/kg，陽性對(duì)照組聯(lián)苯雙酯灌胃100mg/kg；受試樣品分高、中、低3個(gè)劑量組，分別給予受試藥按以相當(dāng)2倍臨床常用量、臨床常用量、0.5倍臨床常用量。設(shè)立高、中、低三組；每日1次，灌胃給藥。另外除正常對(duì)照組外，其他各組每周2次皮下注射10%四氯化碳（carbon tetrachloride，CCl4）花生油溶液5 mg/kg，以誘導(dǎo)慢性肝損傷和肝纖維化，給予正常飲食。連續(xù)給予CCl4和三七粉以及聯(lián)苯雙酯12周。

1.5.2 對(duì)肝藥酶誘導(dǎo)的影響取部分肝組織勻漿后，按試劑盒說明書測(cè)定Cyt.P450和Cyt.b5的含量。

1.5.3 抗氧化作用肝臟勻漿后，按試劑盒說明書測(cè)定肝組織中SOD、MDA、GSH和GSH-Px的含量。

1.5.4 對(duì)肝功能的影響末次給藥后，麻醉，腹主動(dòng)脈取血，按試劑盒說明書測(cè)定AST和ALT的水平。

1.5.5 對(duì)炎癥因子的影響末次給藥后，麻醉，腹主動(dòng)脈取血，用ELISA試劑盒檢測(cè)大鼠血清中白細(xì)胞介素（interleukin-1，IL-1）、白細(xì)胞介素6（interleukin-6，IL-6）、白細(xì)胞介素8（interleukin-8，IL-8）和腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的含量。

1.5.6 對(duì)肝臟組織的病理學(xué)觀察切取SD大鼠肝臟右葉0.5 cm×0.5 cm×1.0 cm的組織塊，進(jìn)行蘇木精-伊紅染色法（hematoxylin-eosin staining，HE）染色，并置于顯微鏡下觀察結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用one-way-AVOVA進(jìn)行方差分析，方差不齊，采用Dunnettt檢驗(yàn)；采用LSD-t檢驗(yàn)，組間兩兩比較用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三七粉灌胃后C C l4模型大鼠肝藥酶水平

大鼠連續(xù)灌胃12周后，三七粉對(duì)CCl4模型大鼠肝藥酶的影響水平測(cè)試結(jié)果見表1。各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠肝臟Cyt.b5水平的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=15.375，P=0.003），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組大鼠肝臟Cyt.b5水平低于正常組（t= 6.675，P=0.000），陽性對(duì)照組大鼠肝臟Cyt.b5水平高于模型組（t=4.354，P=0.001），三七粉中劑量組大鼠肝臟Cyt.b5水平高于模型組（t=3.200，P=0.005）。各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠肝臟Cyt.P450水平的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=12.438，P=0.004），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組大鼠肝臟Cyt.P450水平低于正常組（t=7.363，P=0.000），陽性對(duì)照組大鼠肝臟Cyt.P450水平高于模型組（t=2.106，P=0.032），三七粉高、中、低劑量組大鼠肝臟Cyt.P450水平高于模型組（t三七粉高劑量組=4.184，P=0.001；t三七粉中劑量組= 5.491，P=0.000；t三七粉低劑量組=3.110，P=0.006）。

2.2 三七粉灌胃后C C l4模型大鼠肝功能狀況

三七對(duì)CCl4模型大鼠肝功能的影響結(jié)果見表2，各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠肝臟丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=11.530，P=0.004），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組大鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量高于正常組（t=8.628，P=0.000），陽性對(duì)照組大鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量低于模型組（t=5.873，P=0.002），三七粉高劑量組大鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量低于模型組（t=7.965，P=0.000）。各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠肝臟丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F= 9.532，P=0.006），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組大鼠天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量高于正常組（t=7.831，P= 0.000），陽性對(duì)照組大鼠天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量低于模型組（t=4.846，P=0.005），三七粉中、高劑量組大鼠天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量低于模型組（t三七粉中劑量組= 2.712，P=0.014；t三七粉高劑量組=4.211，P=0.001）。

2.3 三七粉灌胃后大鼠肝臟氧化酶水平

三七粉對(duì)大鼠肝臟谷胱甘肽和谷胱甘肽過氧化物酶的影響水平結(jié)果見表3，各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠肝臟谷胱甘肽水平的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=11.800，P=0.004），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組大鼠肝臟谷胱甘肽的水平低于正常組（t=9.832，P= 0.000），陽性對(duì)照組大鼠肝臟谷胱甘肽的水平高于模型組（t=6.547，P=0.001），三七粉中、高劑量組大鼠肝臟谷胱甘肽的水平均高于模型組（t三七粉中劑量組= 4.432，P=0.000；t三七粉高劑量組=13.408，P=0.000），各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠肝臟谷胱甘肽過氧化物酶水平的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=18.406，P=0.002），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組大鼠肝臟谷胱甘肽過氧化物酶的水平低于正常組（t=8.566，P=0.000），陽性對(duì)照組大鼠肝臟谷胱甘肽過氧化物酶的水平高于模型組（t=5.837，P=0.002），三七粉高、中、低劑量組大鼠肝臟谷胱甘肽過氧化物酶的水平均高于模型組（t三七粉高劑量組=3.378，P=0.003；t三七粉中劑量組=4.699，P= 0.000；t三七粉低劑量組=6.637，P=0.000）。

三七粉對(duì)大鼠血漿MDA和SOD的含量檢測(cè)如表4所示，各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠血漿MDA含量的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=24.640，P=0.000），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組大鼠血漿MDA含量高于正常組（t=15.865，P=0.001），陽性對(duì)照組大鼠血漿MDA含量低于模型組（t=23.910，P=0.000），三七粉高、中、低劑量組大鼠血漿MDA含量均低于模型組（t三七粉高劑量組=13.534，P=0.000；t三七粉中劑量組=8.724，P=0.000；t三七粉低劑量組=4.023，P=0.001）。各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠血漿SOD含量的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=25.540，P=0.000），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組大鼠SOD含量低于正常組（t=29.454，P=0.000），陽性對(duì)照組大鼠SOD含量高于正常組（t= 7.618，P=0.021），三七粉高、中、低劑量組大鼠血漿SOD含量高于模型組（t三七粉高劑量組=27.356，P=0.000；t三七粉中劑量組=11.832，P=0.000；t三七粉低劑量組=8.189，P= 0.000）。

表1 各組大鼠肝臟C yt.b5和C yt.P450水平（n=6±s）

表1 各組大鼠肝臟C yt.b5和C yt.P450水平（n=6±s）

注：1）與正常組比較，P＜0.05；2）與模型組比較，P＜0.05

C y t . p 4 5 0 /（n g / L）正常組4 1 9 . 9 4 ± 4 9 . 3 2模型組2 8 4 . 5 5 ± 3 1 . 4 21）三七粉低劑量4 0 4 . 5 3 ± 1 1 8 . 2 61）2）三七粉中劑量4 4 6 . 8 7 ± 8 8 . 8 11）2）三七粉高劑量3 5 2 . 5 3 ± 4 1 . 9 81）2）聯(lián)苯雙酯3 9 7 . 4 7 ± 5 5 . 3 62）F值1 2 . 4 3 8P值0 . 0 0 4組別劑量/（g / k g）C y t . b 5 /（n g / L）1 2 7 . 7 9 ± 1 3 . 0 78 6 . 2 7 ± 1 4 . 2 61）0 . 2 7 1 0 0 . 3 5 ± 1 2 . 5 51）0 . 5 4 1 1 6 . 9 0 ± 1 9 . 9 22）1 . 0 8 9 7 . 7 9 ± 9 . 7 91）0 . 1 0 1 0 5 . 9 1 ± 1 1 . 3 81）2）-1 5 . 3 7 5 -0 . 0 0 3

表2 各組大鼠肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶含量測(cè)定（n=6，±s）

表2 各組大鼠肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶含量測(cè)定（n=6，±s）

注：1）與空白對(duì)照組比較，P＜0.05；2）與模型組比較，P＜0.05

?

表3 各組大鼠肝臟谷胱甘肽和谷胱甘肽過氧化物酶的水平（n=6±s）

表3 各組大鼠肝臟谷胱甘肽和谷胱甘肽過氧化物酶的水平（n=6±s）

注：1）與空白對(duì)照組比較，P＜0.05；2）與模型組比較，P＜0.05

谷胱甘肽過氧化物酶/（n g / L）正常組3 4 . 9 9 ± 2 . 3 9模型組2 3 . 0 7 ± 1 . 4 91）三七粉低劑量3 2 . 3 6 ± 4 . 2 02）三七粉中劑量3 1 . 4 2 ± 5 . 1 72）三七粉高劑量2 5 . 3 8 ± 1 . 1 21）2）聯(lián)苯雙酯2 9 . 6 5 ± 4 . 1 22）F值1 8 . 4 0 6P值0 . 0 0 2組別劑量/（g / k g）谷胱甘肽/（n g / L）7 0 9 . 0 3 ± 7 3 . 2 6 3 6 3 . 7 7 ± 8 4 . 4 11）0 . 2 7 5 2 0 . 8 9 ± 1 7 9 . 3 51）0 . 5 4 5 6 6 . 5 6 ± 1 1 8 . 7 21）2）1 . 0 8 4 4 9 . 4 7 ± 2 4 . 4 11）2）0 . 1 0 6 7 7 . 6 0 ± 1 2 3 . 6 92）-1 1 . 8 0 0 -0 . 0 0 4

2.4 三七粉灌胃后C C l4模型大鼠炎癥相關(guān)因子水平

由表5、6可知，各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠血漿IL-1含量的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=19.843，P=0.002），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組IL-1含量高于正常組（t=25.089，P=0.000），陽性對(duì)照組IL-1含量低于模型組（t=18.762，P=0.000），三七粉高、中、低劑量組IL-1含量低于模型組（t三七粉高劑量組=16.209，P=0.000；t三七粉中劑量組=10.485，P=0.000；t三七粉低劑量組= 7.047，P=0.001）。各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠血漿IL-6含量的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=16.809，P= 0.003），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組IL-6含量高于正常組（t=16.667，P=0.000），陽性對(duì)照組IL-6含量低于模型組（t=9.786，P=0.000），三七粉高、中、低劑量組IL-6含量低于模型組（t三七粉高劑量組=16.812，P=0.000；t三七粉中劑量組=10.304，P=0.000；t三七粉低劑量組=3.982，P=0.001）。各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠血漿IL-8含量的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=22.500，P=0.000），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組IL-8含量高于正常組（t=47.173，P=0.000），陽性對(duì)照組IL-8含量低于模型組（t=20.331，P=0.000），三七粉高、中、低劑量組IL-8含量低于模型組（t三七粉高劑量組=35.531，P=0.000；t三七粉中劑量組=32.527，P=0.000；t三七粉低劑量組= 16.404，P=0.000）。各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大鼠血漿TNF-α含量的比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=13.432，P=0.004），兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，模型組TNF-α含量高于正常組（t=17.454，P=0.000），陽性對(duì)照組TNF-α含量低于模型組（t=18.587，P=0.000），三七粉高、中、低劑量組TNF-α含量均低于模型組（t三七粉高劑量組=6.526，P=0.000；t三七粉中劑量組=12.663，P=0.000；t三七粉低劑量組=8.533，P=0.001）。

表4 各組大鼠血漿M D A和SO D的含量檢測(cè)（n=6±s）

表4 各組大鼠血漿M D A和SO D的含量檢測(cè)（n=6±s）

注：1）與空白對(duì)照組比較，P＜0.05；2）與模型組比較，P＜0.05

S O D /（u / L）正常組1 4 7 . 3 0 ± 5 . 4 2模型組7 6 . 1 7 ± 5 . 3 61）三七粉低劑量9 3 . 2 9 ± 3 . 7 92）三七粉中劑量1 1 6 . 5 0 ± 9 . 2 52）三七粉高劑量1 3 2 . 0 0 ± 3 . 6 32）聯(lián)苯雙酯1 0 6 . 4 3 ± 1 1 . 2 42）F值2 5 . 5 4 0P值0 . 0 0 0組別劑量/（g / k g）M D A /（n m o l / L）1 . 6 6 ± 0 . 1 1 3 . 3 2 ± 0 . 1 91）0 . 2 7 3 . 0 7 ± 0 . 0 51）2）0 . 5 4 2 . 7 4 ± 0 . 0 91）2）1 . 0 8 2 . 1 7 ± 0 . 1 91）2）0 . 1 0 1 . 8 3 ± 0 . 1 02）-2 4 . 6 4 0 -0 . 0 0 0

2.5 三七粉灌胃后C C l4模型大鼠肝組織病理學(xué)改變

肝臟病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果（見附圖）。正常組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)胞無變性、壞死；而CCl4模型大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，肝細(xì)胞明顯腫脹，胞漿內(nèi)可見彌漫性、大小不等的脂肪空泡，可見點(diǎn)狀、灶狀壞死，大量炎性細(xì)胞浸潤，大量纖維組織增生。聯(lián)苯雙酯陽性對(duì)照組及三七粉治療組以上病理改變較模型組均有改善，尤以三七粉高劑量組、中劑量組改變最明顯。

表5 各組大鼠血漿I L-1和I L-6含量（n=6±s）

表5 各組大鼠血漿I L-1和I L-6含量（n=6±s）

注：1）與空白對(duì)照組比較，P＜0.05；2）與模型組比較，P＜0.05

I L -6 /（n g / L）正常組5 2 . 0 0 ± 9 . 1 8模型組1 0 2 . 8 0 ± 3 . 1 11）三七粉低劑量9 4 . 5 6 ± 5 . 6 71）2）三七粉中劑量8 3 . 0 2 ± 5 . 0 61）2）三七粉高劑量7 0 . 9 1 ± 5 . 3 41）2）聯(lián)苯雙酯6 6 . 4 3 ± 1 1 . 2 42）F值1 6 . 8 0 9P值0 . 0 0 3組別劑量/（g / k g）I L -1 /（n g / L）1 5 . 6 7 ± 1 . 9 8 4 0 . 9 4 ± 2 . 5 31）0 . 2 7 3 5 . 1 5 ± 0 . 9 81）2）0 . 5 4 3 1 . 5 7 ± 1 . 4 01）2）1 . 0 8 2 7 . 3 2 ± 1 . 0 81）2）0 . 1 0 2 4 . 4 2 ± 1 . 4 22）-1 9 . 8 4 3 -0 . 0 0 2

附圖各組大鼠肝臟病理學(xué)變化（HE染色×200）

表6 各組大鼠血漿I L-8和TN F-α含量（n=6±s）

表6 各組大鼠血漿I L-8和TN F-α含量（n=6±s）

注：1）與空白對(duì)照組比較，P＜0.05；2）與模型組比較，P＜0.05

T N F -α /（n g / L）正常組1 0 9 . 6 0 ± 9 . 6 0模型組1 8 6 . 4 0 ± 7 . 7 41）三七粉低劑量1 5 5 . 4 0 ± 5 . 1 81）2）三七粉中劑量1 2 6 . 2 0 ± 1 0 . 3 91）2）三七粉高劑量1 2 2 . 0 0 ± 2 7 . 2 02）聯(lián)苯雙酯1 1 0 . 7 ± 8 . 9 42）F值1 3 . 4 3 2P值0 . 0 0 4組別劑量/（g / k g）I L -8 /（n g / L）2 6 9 . 5 0 ± 1 5 . 3 55 1 0 . 2 0 ± 6 . 2 61）0 . 2 7 4 4 5 . 1 7 ± 1 1 . 31）2）0 . 5 4 3 7 2 . 6 4 ± 1 1 . 7 41）2）1 . 0 8 3 1 8 . 8 0 ± 1 6 . 1 91）2）0 . 1 0 3 0 7 . 6 6 ± 3 1 . 9 32）-2 2 . 5 0 0 -0 . 0 0 0

3 討論

CCl4造成肝損傷是因其進(jìn)入肝細(xì)胞后，由于脂質(zhì)過氧化使肝細(xì)胞膜脂質(zhì)溶解，致使肝細(xì)胞變性壞死，肝細(xì)胞膜在受損傷的同時(shí)可產(chǎn)生大量新的活性氧基團(tuán)，促發(fā)脂質(zhì)過氧化的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，由此產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化物可以損傷肝臟中的各種細(xì)胞，因此肝細(xì)胞膜的脂質(zhì)過氧化是肝細(xì)胞損傷時(shí)的主要作用機(jī)制之一，也是在中藥肝損傷的保護(hù)作用研究中得到較為廣泛認(rèn)可的因素之一[10-13]。SOD作為細(xì)胞內(nèi)主要的防御性抗氧化酶，能夠清除自由基和抑制其脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，由GSH-Px轉(zhuǎn)變?yōu)樗宄杂苫?，達(dá)到保護(hù)細(xì)胞免受損傷的作用；MDA作為一種脂質(zhì)過氧化物，導(dǎo)致肝細(xì)胞破壞，其含量的高低可間接反映機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度[14-17]。因而本研究通過測(cè)定MDA的含量評(píng)價(jià)三七粉對(duì)CCl4大鼠體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度的影響，檢測(cè)GSH、GSH-Px和SOD的水平來衡量三七對(duì)CCl4大鼠的抗氧化水平。結(jié)果表明，三七粉能提高四氯化碳模型大鼠肝臟還原型谷胱甘肽的含量，誘導(dǎo)谷胱甘肽還原酶活性，能增強(qiáng)解毒功能。并降低四氯化碳模型大鼠體內(nèi)的過氧化脂質(zhì)水平而起到抗氧化損傷作用。

肝細(xì)胞的平滑內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脂質(zhì)中的微粒體酶是藥物代謝最重要的酶系統(tǒng)，稱為肝藥酶，肝藥酶是動(dòng)物體內(nèi)一種重要的代謝酶，進(jìn)入血液循環(huán)的藥物基本上是經(jīng)肝藥酶代謝的，所以對(duì)肝藥酶有影響的藥物，也會(huì)影響到藥物（毒物）的代謝[18-20]。因而，本研究還檢測(cè)了細(xì)胞色素b5和細(xì)胞色素P450酶的活力，結(jié)果表明三七粉能誘導(dǎo)細(xì)胞色素b5和細(xì)胞色素P450酶活性的增強(qiáng)，進(jìn)而加速機(jī)體內(nèi)毒物在肝臟的代謝速度。

細(xì)胞因子IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α是炎癥反應(yīng)性介質(zhì)，當(dāng)肝組織存在活動(dòng)性炎癥時(shí)，可促進(jìn)細(xì)胞分泌IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α，從而加強(qiáng)細(xì)胞毒性作用，可以間接反映肝損傷的嚴(yán)重程度[21-23]。因此，本研究進(jìn)一步檢測(cè)IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的水平，結(jié)果表明三七粉具有一定抑制肝臟疾病細(xì)胞因子表達(dá)的作用。

綜上所述，三七粉可通過改善谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶水平，促進(jìn)細(xì)胞色素b5和細(xì)胞色素P-450酶的活力，增強(qiáng)肝臟SOD和GSH-PX水平，降低肝臟MDA的水平，并對(duì)IL-1、IL-6、IL-8等多種炎癥因子和腫瘤壞死因子TNF-α產(chǎn)生抑制作用，進(jìn)而對(duì)CCl4誘導(dǎo)的大鼠慢性肝損傷起到保護(hù)作用。

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Protective effect ofpanax notoginsengpowder on CCl4-induced chronic liver injury in rats*

Jing-jing Dong,Yan-ju Liu,Xiang-sheng Chen,Wei Fu,Xin Li
[Pharmacy School(Hubei Research Center of Chinese Materia Medica Processing Engineering and Technology),Hubei University of Chinese Medicine,Wuhan,Hubei 430065,China]

ObjectiveTo investigate the protective effects ofpanax notoginsengpowder on chronic liver injury and liver fibrosis induced by CCl4.MethodsThe model of CCl4-induced chronic liver injury and fibrosis in SD rats was established by hypodermic injection of 10%CCl4in peanut oil.Biochemical criteria were measured respectively,including ALT,AST,IL-1,IL-6,IL-8 and TNF-α in serum,and MDA,SOD,GSH, GSH-PX,Cyt.P450 and Cyt.b5 in liver homogenate.And HE dyeing,histopathological changes in liver were observed on the effects ofpanax notoginsengpowder through the microscope.ResultsThe levers of ALT,AST were decreased,and the activity of Cyt.P450 and Cyt.b5 enzyme was promoted.The levels of SOD,GSH and GSH-Px were enhanced,and the level of MDA were reduced,and the activity of IL-1,IL-6,IL-8 and TNF-α was inhibited observably in liver.ConclusionsPanax notoginsengpowder has been proved to possess significant effects on the liver fibrosis and injury induced by CCl4.

panax notoginsengpowder;CCl4;liver fibrosis;liver injury;protective effect

R282.71；R575

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.08.007

1005-8982（2017）08-0032-06

2016-11-01

國家中醫(yī)藥管理局2015年中醫(yī)藥部門公共衛(wèi)生專項(xiàng)資金（中藥科技類）

劉艷菊，E-mail：1416@hbtcm.edu.cn，Tel：027-68890231