王巖，王培順，李淑琴，王昭昕，周軍,李淑琴

(1連云港市第一人民醫(yī)院，江蘇連云港 222002；2徐州醫(yī)科大學)

乳腺癌組織SATB2 蛋白表達變化及其意義

王巖1，王培順1，李淑琴1，王昭昕1，周軍1,李淑琴2

(1連云港市第一人民醫(yī)院，江蘇連云港 222002；2徐州醫(yī)科大學)

目的 觀察乳腺癌組織中核基質(zhì)結(jié)合蛋白質(zhì)2(SATB2)表達變化，并探討其臨床意義。方法 選擇282例乳腺癌患者，以其手術(shù)切除乳腺癌組織切片為觀察組，以其中43例患者的癌旁組織切片為癌旁組，另取36例乳腺良性病變患者的病變組織切片為乳腺良性病變組。采用免疫組化SP法檢測各組SATB2表達。分析乳腺癌組SATB2表達與與乳腺癌患者臨床病理參數(shù)及生存期的關(guān)系。結(jié)果 乳腺癌組、癌旁組、乳腺良性病變組SATB2蛋白陽性表達率分別為74.39%(61/82)、41.86%(18/43)、36.11%(13/36)。乳腺癌組SATB2蛋白陽性表達率高于癌旁組和乳腺良性病變組(P均<0.05)。乳腺癌組織SATB2蛋白表達與腫瘤體積、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、生存期有關(guān)(P均<0.05)，與年齡、TNM分期、雌激素受體表達、孕激素受體表達、人表皮生長因子受體-2表達無關(guān)(P均>0.05)。結(jié)論 乳腺癌組織中SATB2表達上調(diào)。乳腺癌組織中SATB2陽性表達與乳腺癌組織腫瘤體積、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、生存期有關(guān)。檢測乳腺癌組織中SATB2表達有助于乳腺癌的診斷、病情判斷及生存期評估。

乳腺癌；核基質(zhì)結(jié)合蛋白質(zhì)2；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；遠處轉(zhuǎn)移；生存期

乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程受到多種基因和蛋白的調(diào)控，明確其中那些與乳腺癌的臨床病理參數(shù)有關(guān)有助于乳腺癌的診斷與治療[3]。文獻報道[4～6]，核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白2(SATB2)在正常細胞中幾乎不表達，而高表達于結(jié)直腸癌、胃癌、卵巢癌等腫瘤組織中。SATB2和SATB2有高度同源性。SATB1在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。但關(guān)于乳腺癌組織中SATB2表達變化及其與乳腺癌臨床病理參數(shù)和生存期的關(guān)系鮮見報道。本研究觀察了乳腺癌組織中SATB2表達變化，并分析其與乳腺癌臨床病理參數(shù)和生存期的關(guān)系，探討其作為乳腺癌的診斷、治療及生存期預估指標的可行性。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2005年9月～2010年9月我院收治的82例乳腺癌患者的乳腺癌組織存檔切片為乳腺癌組。82例乳腺癌患者全部為女性，年齡30～78(48.12±7.18)歲，其中<50歲42例，≥50歲40例。根據(jù)2003版WHO乳腺癌組織病理學分類標準[7]：乳腺浸潤導管癌70例，其他組織學類型乳腺癌12例。根據(jù)2002年美國癌癥聯(lián)合會(AJCC)的TNM分期標準[8]，Ⅰ～Ⅱ期38例(Ⅰ期20例，Ⅱ期18例)，Ⅲ～Ⅳ期44例(Ⅲ期36例，Ⅳ期8例)。腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移57例，腋窩淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移25例。有遠處轉(zhuǎn)移8例，無遠處轉(zhuǎn)移74例。所有病例均有完整的臨床隨訪資料，隨訪截止時間為2015年9月，生存時間的計算為手術(shù)日期到隨訪截止日期，或因復發(fā)轉(zhuǎn)移及其他原因死亡的日期。生存期<5年21例，生存期≥5年61例。同時取其中43例患者距離癌組織5 cm處無癌細胞浸潤的癌旁組織切片作為癌旁組。取36例同期就診的乳腺良性病變患者的病變組織切片作為乳腺良性病變組。36例乳腺良性病變病例全部為女性，年齡28～75(46.28±6.67)歲。乳腺增生28例，乳腺纖維瘤8例。乳腺癌患者和乳腺良性病變患者的性別年齡分布差異無統(tǒng)計學意義。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會批準，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 SATB2表達檢測方法 采用免疫組化SP法。68 ℃烤片20 min。經(jīng)常規(guī)二甲苯脫蠟和梯度酒精脫水后將切片完全浸泡于水中待用。在37℃下用3%H2O2孵育切片10 min，以抑制內(nèi)源性過氧化酶活性。PBS沖洗3次，轉(zhuǎn)移至0.01 mmol/L枸櫞酸緩沖液(pH 6.0)中煮沸15～20 min，自然冷卻20 min后，采用物理降溫法加快冷卻至室溫，以修復抗原。PBS沖洗3次，37 ℃下用羊血清工作液封閉10 min，滴加一抗，4 ℃冰箱孵育過夜。PBS沖洗3次，滴加二抗，室溫下孵育30 min。PBS沖洗3次，用新鮮配置的DAB溶液顯色，用自來水沖洗，反藍。用自來水沖洗后，用蘇木素復染30 s，常規(guī)脫水、透明及干燥后封片。

以細胞質(zhì)中出現(xiàn)明顯的棕黃色或棕褐色顆粒定義為SATB2陽性細胞。每個組織切片先于100倍下隨機選擇5個SATB2陽性細胞最密區(qū)，后于400倍下隨機計數(shù)每100個腫瘤細胞中的含有的陽性細胞數(shù)。顆粒為棕黃色且陽性細胞比≥50%，或顆粒為棕褐色且陽性細胞比≥25%為SATB2表達陽性，否則為SATB2表達陰性。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗和Fisher確切概率法。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

乳腺癌組、癌旁組、乳腺良性病變組SATB2蛋白陽性表達率分別為74.39%(61/82)、41.86%(18/43)、36.11%(13/36)。乳腺癌組SATB2蛋白陽性表達率高于癌旁組和乳腺良性病變組(P均<0.05)；癌旁組和乳腺良性病變組SATB2蛋白陽性表達率相比，P>0.05。

乳腺癌組織SATB2蛋白表達與乳腺癌臨床病理參數(shù)及生存期的關(guān)系見表1。由表1可見，乳腺癌組織SATB2蛋白表達與腫瘤體積、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、生存期有關(guān)(P均<0.05)，與年齡、TNM分期、雌激素受體(ER)表達、孕激素受體(PR)表達、人表皮生長因子受體-2(Her-2)表達無關(guān)(P均>0.05)。

3 討論

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤發(fā)展的基本途徑，是一個腫瘤與宿主之間相互作用的多步驟過程，受到多種相關(guān)基因的調(diào)控。SATB2基因位于人類2號染色體2q33區(qū)，其編碼的SATB2蛋白全長733個氨基酸，包含一個同源結(jié)構(gòu)域(氨基酸序列614～677)、一個具有二聚體化功能的 Pfam-B＿10016結(jié)構(gòu)域(57～231)、兩個CUT結(jié)構(gòu)域(352～437和482～560)[9～12]。SATB2也是一種核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白質(zhì)，與SATB1具有高度同源性，通過對染色質(zhì)高級結(jié)構(gòu)的影響實現(xiàn)對目標基因表達的特異性調(diào)控，進一步調(diào)節(jié)細胞分化、凋亡、腫瘤生長與轉(zhuǎn)移[13]。本研究結(jié)果顯示乳腺癌組織中SATB2陽性表達率明顯高于癌旁組織和乳腺良性腫瘤組織。提示SATB2與乳腺癌關(guān)系密切。進一步分析乳腺癌組織SATB2表達與腫瘤體積、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、生存期有關(guān)。提示SATB2參與了乳腺癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的進程，SATB2表達陽性是乳腺癌的一個不良預后因素。檢測乳腺組織SATB2表達有助于乳腺癌的診斷、病情判斷及生存期預估。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組織SATB2蛋白表達與乳腺癌患者年齡、TNM分期、ER表達、PR表達、Her-2表達無關(guān)，與文獻[14]結(jié)果不同，原因可能與入組人群、樣本量大小研究方案及結(jié)果判斷標準不同有關(guān)。

表1 乳腺癌組織SATB2表達與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

但是SATB2在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的分子機制還不明確，或與TNF-α、IL-4、IL-10等多種與腫瘤相關(guān)的細胞調(diào)控因子的表達有關(guān)，這還有待進一步研究證實。SATB1蛋白在乳腺癌中可能發(fā)揮基因組織者的作用，可以顯著的改變?nèi)橄偌毎幕虮磉_譜，使其向乳腺癌細胞轉(zhuǎn)變，并增加其侵襲能力。SATB2可能發(fā)揮類似作用。已有文獻報道，SATB2和SATB1蛋白下調(diào)乳腺癌細胞IL-4、IL-13、MAF1基因及蛋白的表達。另外筆者推測，SATB2在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮的作用可能是一些信號傳導通路，如Wnt通路、PI3K-Akt通路實現(xiàn)的。將來我們將進一步研究這些信號通路在其中發(fā)揮的具體作用。綜上所述，乳腺癌組織中SATB2表達上調(diào)。乳腺癌組織中SATB2陽性表達與乳腺癌組織腫瘤體積、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、生存期有關(guān)。檢測乳腺癌組織中SATB2表達有助于乳腺癌的診斷、病情判斷及生存期評估。

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國家自然科學基金資助項目(81602319)。

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.19.027

R737.9

B

1002-266X(2017)19-0086-03

017-01-20)