郝志強(qiáng)，田小平，章志娟

(連云港市第一人民醫(yī)院，江蘇連云港222002)

人參煎劑對阿霉素致心衰患者血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)及心功能的影響

郝志強(qiáng)，田小平，章志娟

(連云港市第一人民醫(yī)院，江蘇連云港222002)

目的 探討人參煎劑對阿霉素致心衰患者bax、bcl-2蛋白表達(dá)及心功能的影響。方法 選取阿霉素致心衰患者100例，隨機(jī)分為心衰組和人參煎劑組各50例，另取體檢健康對照組50例。兩組心衰患者在相應(yīng)西藥對癥治療的基礎(chǔ)上，人參煎劑組以5～10 g人參按照常規(guī)制成人參水煎劑，每日1劑，早晚各50 mL,治療1個月為1個療程，共治療2個療程。治療結(jié)束后，采用Western blotting法檢測三組血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)，采用無創(chuàng)血流動力學(xué)監(jiān)測系統(tǒng)檢測左心室收縮壓(LVSP)、左心室舒張末期壓(LVEDP)、左心室內(nèi)壓最大上升速率(+ dp/dtmax)、左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)，采用彩色多普勒超聲診斷儀檢測左心室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)、左心室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)、左室短軸縮短率(LVFS)、左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)。結(jié)果 心衰組與健康對照組比較血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)有統(tǒng)計學(xué)差異(P均<0.05)。與心衰組比較，人參煎劑組血清bax、蛋白表達(dá)降低，bcl-2蛋白表達(dá)升高，血流動力學(xué)指標(biāo)LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax以及心功能指標(biāo)LVEDD、LVESD、LVFS、LVEF均明顯改善(P均<0.05)。結(jié)論 人參煎劑能夠明顯改善阿霉素致心衰患者的心臟功能，其機(jī)制可能與影響患者血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)有關(guān)。

心力衰竭；阿霉素 ；bax蛋白；bcl-2蛋白；血流動力學(xué)；心臟功能；人參煎劑；中藥

心力衰竭是由于心臟損傷而引起的心排血量減少不能滿足機(jī)體代謝需要而引起一系列綜合征[1]，臨床表現(xiàn)為呼吸困難、咳嗽、咳痰、紫紺、倦怠和乏力等癥狀。阿霉素是目前常用的有效廣譜抗癌藥物[2]，可導(dǎo)致患者產(chǎn)生心肌病等嚴(yán)重不良反應(yīng)，引發(fā)心衰表現(xiàn)。有研究表明，人參煎劑對阿霉素致心衰患者有顯著的治療效果，但具體機(jī)制卻不明確[3]。因此筆者就人參煎劑對阿霉素致心衰患者血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)及心功能的變化進(jìn)行了研究。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2014年3～9月阿霉素致心衰入院治療患者100例，男47例、女53例，年齡(42.8±8.5)歲，病程(6.2±3.2)年。納入標(biāo)準(zhǔn)：①有呼吸困難、乏力、液體儲留、尿量減少等癥狀；②心電圖檢查可見既往心梗、左室肥厚或心律失常等，胸片可見心臟增大、肺淤血或肺水腫等；③超聲心電圖顯示舒張功能不全和收縮功能不全。采用隨機(jī)數(shù)字表將100例患者分為心衰組和人參煎劑組各50例。另選取體檢健康對照組50例，男26例、女25例，年齡(43.6±7.4)歲。三組性別、年齡構(gòu)成差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)相關(guān)機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)，患者自愿參與本研究并簽署知情同意書。

1.2 治療方法 監(jiān)測心衰組和人參煎劑組患者血壓、心率并給予相應(yīng)西藥對癥治療。氫氯噻嗪口服25 mg/次，1次/d，逐漸增加劑量直至尿量增加，體質(zhì)量每日減輕0.5～1.0 kg；一旦病情穩(wěn)定，水腫消退，即以最小有效劑量長期維持，期間仍需根據(jù)患者液體儲留情況隨時調(diào)整劑量。地高辛口服0.125 mg/次，1次/d；卡托普利口服25 mg/次，2次/d；阿司匹林腸溶片口服100 mg/次，1次/d。在西藥治療基礎(chǔ)上，人參煎劑組以5～10 g人參按照常規(guī)制成人參水煎劑，每日1劑，早晚各50 mL。以上藥物治療1個月為1個療程，共治療2個療程。

1.3 血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)檢測 采用Western blotting法。取患者血液樣本2 mL置于離心管中，4 ℃下800 r/min離心5 min。取上清液1 mL加入RIPA緩沖液3 mL、10 mg/mL PMSF 30 μL，Polytron勻漿，離心、冰上孵育30 min，超聲助溶，放入離心管4 ℃下 800 r/min離心15 min，上清液用于蛋白印記分析。每孔上樣蛋白液30 μL，SDS-PAGE 180 V電泳60 min,隨后100 mA冷卻轉(zhuǎn)膜至PVDF膜上，用麗春紅染色確定蛋白轉(zhuǎn)膜效率。5%脫脂奶粉TBST室溫下封閉3～4 h,洗膜后加入bax(1∶500)、bcl-2(1∶500)室溫孵育2 h，TBST洗膜后加相應(yīng)辣根過氧化酶標(biāo)記的二抗( 1∶2 000) 孵育1 h,洗膜后用Super ECL發(fā)光液, X線片顯影、定影。凝膠分析系統(tǒng)分析譜帶強(qiáng)度，與β-actin比較分析，作為bax、bcl-2蛋白的相對表達(dá)量。

1.4 血流動力學(xué)及心臟功能檢測 采用美國ANALOGIC公司無創(chuàng)血流動力學(xué)監(jiān)護(hù)系統(tǒng)檢測左心室收縮壓(LVSP)、左心室舒張末期壓(LVEDP)、左心室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)。采用彩色多普勒超聲診斷儀測定心功能指標(biāo)，主要包括左心室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)、左心室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)、左室短軸縮短率(LVFS)、左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)。

2 結(jié)果

2.1 三組血清bax、bcl-2蛋白表達(dá) 心衰組血清bax蛋白表達(dá)高于健康對照組，血清bcl-2蛋白表達(dá)低于健康對照組(P均<0.05)。心衰組與人參煎劑組比較，血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。見表1。

表1 三組血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)比較

注：與健康對照組比較，aP<0.05；與心衰組比較，bP<0.05。

2.2 三組血流動力學(xué)指標(biāo)比較 與正常健康對照組相比，心衰組血液動力學(xué)指標(biāo)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)；人參煎劑組與心衰組比較，血流動力學(xué)指標(biāo)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。結(jié)果見表2。

表2 三組血流動力學(xué)指標(biāo)比較

注：與健康對照組比較，aP<0.05；與心衰組比較，bP<0.05。

2.3 三組心臟彩超檢測指標(biāo)比較 與正常健康對照組相比，心衰組心臟彩超檢測指標(biāo)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)；人參煎劑組與心衰組比較，心臟彩超檢測指標(biāo)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。見表3。

表3 三組心臟彩超檢測指標(biāo)比較

注：與健康對照組比較，aP<0.05；與心衰組比較，bP<0.05。

3 討論

心衰是由于各種原因?qū)е碌某跏夹募p傷，引起心肌結(jié)構(gòu)和功能改變，從而導(dǎo)致心臟泵血和充盈功能低下，主要臨床表現(xiàn)為呼吸困難、乏力、液體儲留[4]。阿霉素是抗腫瘤抗生素藥物，有強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性，嵌入DNA序列中從而抑制核酸復(fù)制，能夠抑制RNA和DNA的復(fù)制過程，對RNA的抑制效果尤其顯著[5，6]。阿霉素屬周期非特異性藥物，可作用于細(xì)胞生長周期的各個過程，對多種腫瘤細(xì)胞均有抑制作用。但是該藥物不良反應(yīng)較多，如脫發(fā)、惡心、食欲減退，部分患者可出現(xiàn)心律失常、心肌細(xì)胞變性、心肌炎癥等，嚴(yán)重者可出現(xiàn)心衰，其致心力衰竭的主要機(jī)制是由于心肌組織自由基的生成引起膜脂質(zhì)過氧化，損害了細(xì)胞膜的完整性[7]。

研究發(fā)現(xiàn)，人參中含有揮發(fā)油、維生素類、人參皂苷、人參多糖等成分,能夠促進(jìn)RNA、DNA、蛋白質(zhì)等物質(zhì)合成,增強(qiáng)機(jī)體免疫功能作用[8，9]。中國醫(yī)學(xué)認(rèn)為，人參具有補(bǔ)氣補(bǔ)血的作用。血清bcl-2為抗凋亡蛋白，可以和bax形成異二聚體，抑制bax的促細(xì)胞凋亡作用。本研究表明，心衰患者血清bax蛋白表達(dá)高于健康對照組，血清bcl-2蛋白表達(dá)低于健康對照組。采用人參煎劑治療后，人參煎劑組與心衰組比較，血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)均明顯改變，人參煎劑組治療后血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)更接近健康對照組，說明人參煎劑能夠改變血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)，阻止心臟細(xì)胞凋亡的進(jìn)程。血流動力學(xué)和心臟彩超檢測指標(biāo)顯示，與心衰組比較，人參煎劑組患者LVSP、LVEDP、+ dp/ dtmax、-dp/ dtmax、LVEDD、LVESD、LVFS、LVEF均存在統(tǒng)計學(xué)差異。說明人參煎劑有助于心衰患者血流動力學(xué)指標(biāo)的改善，增強(qiáng)患者的心臟功能。

綜上所述，人參煎劑能使阿霉素致心衰患者的心臟細(xì)胞凋亡減緩、心肌收縮力增加、心功能增強(qiáng)，生活質(zhì)量顯著改善，其機(jī)制可能與人參煎劑影響患者血清bax、bcl-2蛋白表達(dá)有關(guān)。

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2017-01-18)