郁宏偉,張德寶,朱秀同,劉濤,石勇,何平有,趙玉龍

（1.瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司河北保定071000; 2.河北省獸醫(yī)生物技術工程技術研究中心河北保定071000）

犬狂犬病病毒ELISA抗體檢測試劑盒概述

郁宏偉1,2,張德寶1,2,朱秀同1,2,劉濤1,2,石勇1,2,何平有1,2,趙玉龍1,2

（1.瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司河北保定071000; 2.河北省獸醫(yī)生物技術工程技術研究中心河北保定071000）

在研究與分析我國近年來犬狂犬病流行情況、疫苗使用現狀和市場需求等諸多因素的基礎上，瑞普生物與浙江大學再次合作，成功研制出犬狂犬病病毒ELISA抗體檢測試劑盒-“銳清”。該產品是農業(yè)部批準的三類新獸藥【《新獸藥注冊證書》證號：（2016）新獸藥證字71號】，已獲得農業(yè)部核發(fā)的獸藥生產批準文號【獸藥生字030388829】，目前已成功上市。本文對犬狂犬病病毒ELISA抗體檢測試劑盒-“銳清”的特點進行概述，以期使人們對該產品具有更加清楚的認識。

1 “銳清”特點

1.1 特異性強

近年來的研究表明，狂犬病毒疫苗誘導機體產生中和抗體的免疫應答反應主要與N蛋白和G蛋白有關。本試劑盒采用基因工程技術表達狂犬病毒N蛋白，制備抗N蛋白單克隆抗體對國內流行毒株SRV-9株純化抗原進行鑒定，以鑒定正確的狂犬病毒蛋白作為包被抗原建立ELISA檢測方法，用于檢測犬血清中的狂犬病毒IgG抗體?！颁J清”特異性試驗結果表明，該試劑盒不與犬瘟熱病毒（CDV）抗體陽性血清、犬細小病毒（CPV）抗體陽性血清發(fā)生反應，特異性強（見表1）。

1.2 重復性好

用5個連續(xù)生產批次（151101、151102、151203、151204和160101批）的“銳清”試劑盒對15份質控血清分別進行重復檢測，檢測結果見表2。檢測結果顯示，批間變異系數在2.01%~10.40%之間，表明該方法具有高度的可重復性和穩(wěn)定性，可用于常規(guī)檢測。

表1 “銳清”特異性試驗

1.3 符合率高

1.3.1 “銳清”與熒光抗體病毒中和試驗（FAVN）比較

同時用本試劑盒與FAVN檢測226份臨床分離犬血清，試驗結果見表3。由表3可知，本試劑盒與FAVN法相比陽性符合率為98.74%（157/159），陰性符合率為83.58%（56/67），總符合率為94.25%（213/226），二者符合率較高，表明試劑盒可用于狂犬病毒中和抗體的檢測。

表3 “銳清”與FAVN符合率試驗

表2 “銳清”穩(wěn)定性試驗

1.3.2 “銳清”與進口試劑盒比較同時用本試劑盒與進口試劑盒（法國某公司）檢測244份臨床分離犬血清，試驗結果見表4。由表4可知，兩者陽性符合率為91.35%（95/104），陰性符合率為90.00%（126/140），總符合率90.57%（221/244）。表明本試劑盒與進口試劑盒符合率較高，可用于臨床樣品的大規(guī)模檢測。

表4 “銳清”與進口試劑盒符合率試驗

1.4 檢出限低

分別用5批試劑盒檢測6份陽性參考血清的抗體滴度，檢測結果分別為1:800、1:200、1:3200、1: 1600、1:1600、1:3200。由此可知該試劑盒對于犬血清中的狂犬病毒IgG抗體的檢出下限可達到1: 3200，能夠顯著的檢測犬血清中抗體的水平（表5）。

表5 “銳清”敏感性試驗

2 小結

“銳清”是瑞普生物繼“銳捷”（豬圓環(huán)病毒2-dCap-ELISA抗體檢測試劑盒）后的又一全新產品，大量實驗及臨床應用表明，該試劑盒具有特異性強、穩(wěn)定性好、符合率高、檢出限低等優(yōu)點，適宜臨床樣品的大規(guī)模檢測，對及時發(fā)現狂犬病、清楚疫苗免疫效果、提高畜產品質量具有重大的經濟、社會和公共衛(wèi)生意義。■

10.3969/j.issn.1008-4754.2017.04.052

郁宏偉（1979-04-06），男，河北唐山人，博士，主要從事獸用生物制品方面研究。E-mail:yuhongwei2005@126.com

河北省科技計劃項目（15222907D）