吳俊蘭++錢碧霞

[摘要] 目的 對圍生期孕產(chǎn)婦感染或定植的B族鏈球菌的耐藥情況及基因型進(jìn)行研究，為臨床治療提供科學(xué)依據(jù)。方法 在2015年1月～2016年12月期間，選取780例圍生期孕婦生殖道分泌物，運用GBS培養(yǎng)鑒定和藥敏試驗，統(tǒng)計分析其結(jié)果。 結(jié)果 780例孕婦的GBS攜帶者共檢出245例，帶菌率達(dá)到31.4%。低于30歲組的帶菌率為28.6%，同30歲以上（包括30歲）的帶菌率40.5%對比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=20.124，P<0.05）。D-抑菌圈試驗陽性率23.9%；萬古霉素和利奈唑胺的耐藥率為0%，青霉素為0.7%，氨芐西林為3.2%，頭孢曲松為6.7%，呋喃妥因為9.4%，左氧氟沙星為21.9%，克林霉素為23.7%，紅霉素為29.9%，四環(huán)素為58.2%。 結(jié)論 該區(qū)圍生期孕產(chǎn)婦生殖道的GBS帶菌率較高，感染率最高的是高齡孕婦；同時，圍生期孕婦感染GBS對萬古霉素、頭孢曲松、青霉素、呋喃妥因和氨芐西林的敏感率較高。

[關(guān)鍵詞] B族鏈球菌；圍生期；帶菌率；孕婦；藥敏試驗

[中圖分類號] R714.7 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701（2017）18-0012-04

Resistance and genotype of B streptococcus infected or colonized in perinatal pregnant woman

WU Junlan QIAN Bixia

Department of Breast Surgery， Lishui City Maternal and Child Health Hospital in Zhejiang Province， Lishui 323000， China

[Abstract] Objective To analyze the infection and drug resistance of B group streptococcus（GBS） in perinatal pregnant women， as a basis for clinicians to develop effective prevention and treatment measures. Methods The reproductive tract secretions of 780 perinatal pregnant women from January 2015 to December 2016 were examined by GBS culture and susceptibility testing， and the results were analyzed statistically. Results A total of 245 GBS carriers were detected in 780 pregnant women， and the carrier rate was 31.4%.The carrier rate of the below 30-year-old group was 28.6%， and the difference was statistically significant compared with 40.5% of the more than 30 years old group（including 30 years old） （χ2=20.124， P<0.05）. The resistance rate of vancomycin and linezolid was 0%. And the resistant rates of penicillin， ampicillin， ceftriaxone， nitrofurantoin， levofloxacin， clindamycin， erythromycin and tetracycline were 0.7%， 3.2%， 6.7%， 9.4%， 21.9%， 23.7%， 29.9% and 58.2% respectively. The positive rate of D-inhibition zone test was 23.9%. Conclusion GBS carrier rate of pregnant women in this area is high， and older women are more susceptible to infection. The sensitivity of perinatal pregnant women infected with GBS is higher than that of vancomycin， ceftriaxone， penicillin， nitrofurantoin and ampicillin.

[Key words] Group B streptococci； Perinatal period； Carrier rate； Pregnant women； Drug susceptibility test

B族鏈球菌（GBS）是β溶血需氧革蘭陽性鏈球菌，也被稱為鏈球菌。GBS在人體的定植部位主要是陰道和肛周，GBS病菌極易造成新生兒和孕婦感染，多數(shù)新生兒感染GBS同母嬰遲滯傳播存在聯(lián)系。GBS病菌感染孕婦泌尿系統(tǒng)，同時會引發(fā)產(chǎn)婦的產(chǎn)后敗血癥等，嚴(yán)重的甚至?xí)?dǎo)致孕婦胎膜早破、早產(chǎn)、嬰兒生長受限等情況，GBS屬于生產(chǎn)期感染的首要致病菌[1-3]。本文旨在分析圍生期孕婦生殖道B族鏈球菌感染及耐藥性，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將我院從2015年1月～2016年12月產(chǎn)科門診就診或是住院的圍產(chǎn)期孕婦780例作為研究對象，孕產(chǎn)期36～41周，年齡22～39歲。按照年齡對上述孕婦實施分組，≥30歲185例，孕產(chǎn)期36～40周，年齡30～39歲，平均（35.1±4.2）歲；<30歲595例，孕產(chǎn)期36～41周，年齡22～29歲，平均（25.7±3.8）歲。排除2周內(nèi)攝入抗生素和伴復(fù)雜內(nèi)科疾病的孕婦。此次研究所選的孕婦了解本次研究內(nèi)容并且自愿參與。

1.2 標(biāo)本采集

此次研究中的孕婦生殖道分泌物采集均由婦產(chǎn)科醫(yī)生執(zhí)行，孕婦在采樣前14 d內(nèi)不能使用抗生素，并且取樣位置切忌接觸任何洗液以及栓劑，要在不清潔的情況下用消毒窺陰器擴張孕婦陰道，使用無菌棉拭子對孕婦陰道下部1/3的分泌物進(jìn)行擦拭，然后在半小時內(nèi)送檢。

1.3 標(biāo)本處理

使用血瓊脂對送檢無菌棉拭子接種，并且孵育在35℃、5% CO2培養(yǎng)箱中18～24 h。觀察和挑選特征菌種，分純、培養(yǎng)、涂片、鏡檢（革蘭染色），最后生化鑒定得出結(jié)論。采用生物梅里埃VITEK2細(xì)菌檢定儀對菌株進(jìn)行鑒定，采用配套卡片并實行藥敏試驗。鑒定方法主要依據(jù)全國檢驗操作規(guī)程，質(zhì)控菌株是肺炎鏈球菌ATCC49619，按照2012美國臨床實驗室協(xié)會M100-S22文件判讀。針對紅霉素耐藥、中介GBS菌株實施擴散D-抑菌圈試驗。使用英克林霉素紙片2 μg、紅霉素紙片15 μg、OXOID紙片，紙片內(nèi)含5%綿羊血Mueller-Hinton瓊脂培養(yǎng)基，紙片之間的距離為12 mm，并且孵育在35℃、5%CO2內(nèi)長達(dá)20～24 h。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

所有收集到的數(shù)據(jù)均用WPS表格建立數(shù)據(jù)庫，然后導(dǎo)入SPSS18.0中文版，進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)運算，計數(shù)資料用%表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 圍生期孕婦GBS帶菌率

780例中檢出攜帶GBS共245例，帶菌率高達(dá)31.4%。<30歲組帶菌率是28.6%，與≥30歲（40.5%）帶菌率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2孕婦感染GBS耐藥性

GBS陽性標(biāo)本共245株，進(jìn)行藥敏試驗后得到如下結(jié)果，D-抑菌圈試驗陽性率23.9%；萬古霉素和利奈唑胺的耐藥率為0%，青霉素為0.7%，氨芐西林為3.2%，頭孢曲松為6.7%，呋喃妥因為9.4%，左氧氟沙星為21.9%，克林霉素為23.7%，紅霉素為29.9%，四環(huán)素為58.2%。見表2。

3討論

妊娠期GBS感染易造成嬰兒感染，導(dǎo)致新生兒出現(xiàn)敗血癥、腦膜炎等。為充分降低該病菌圍生期感染，實行孕婦GBS篩查十分有必要，并且對GBS的感染預(yù)防及治療具有重要意義[4-7]。GBS在孕婦身上定植的臨床表現(xiàn)主要有以下3個：陰道瘙癢、陰道的分泌物變多、尿頻。此次研究內(nèi)的GBS陽性者癥狀發(fā)生率明顯要高于GBS陰性者，但是其并沒有較為典型的臨床癥狀，給該病菌感染的確診造成了一定的困難。實驗室在診斷GBS中的經(jīng)典手段為細(xì)菌培養(yǎng)，但是其需要耗費大量時間，GBS分離培養(yǎng)和鑒別診斷操作很復(fù)雜；血清學(xué)GBS檢測耗時短，但假陰性和假陽性率較高[8-10]。而熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)被認(rèn)為是最佳的GBS檢測法，最大的特點是快速、準(zhǔn)確和高敏，受到條件限制，當(dāng)前僅有三級醫(yī)院能夠?qū)嵭性摍z測。

關(guān)于GBS的診斷，細(xì)菌學(xué)檢查是診斷GBS感染的基本方法，借助從血液、腦脊液或是感染病灶內(nèi)分離出的病原菌就能夠被確診。但是從胃液、皮膚、黏膜、氣管吸入物分離的GBS無法被確診為GBS感染。快速抗原檢測法能夠從體液內(nèi)直接檢測出GBS抗原，比較常用的方法為乳膠凝集試驗（LA）、協(xié)同凝集試驗（COA）、對流免疫電泳（CIE）等，其敏感性要比培養(yǎng)低，但是對產(chǎn)前已經(jīng)使用了抗生素治療的母親或是嬰兒以及非菌敗血癥的監(jiān)測很有用?？乖瓩z測具有假陽性，因此抗原檢測的陽性結(jié)果只能提示可能存在GBS感染，無法以此來確診是GBS的全身感染，并且還要結(jié)合感染的臨床表現(xiàn)進(jìn)行綜合判斷，快速的抗原檢測能夠用在婦女分娩時的篩查[11-15]。

在GBS的預(yù)防中，最常用的只有化學(xué)預(yù)防和免疫預(yù)防這兩種，母親帶菌是新生兒早發(fā)GBS感染的主要病因，并且多出現(xiàn)在子宮中，對此美國CDC提出要選擇性地對孕婦實行化學(xué)預(yù)防。化學(xué)預(yù)防策略主要有以培養(yǎng)為依據(jù)的預(yù)防策略[16-19]。全部孕產(chǎn)婦有如下情況，分娩在37周內(nèi)，孕產(chǎn)婦存在GBS菌血癥或前一胎有GBS感染；雖無上述情況但是未做培養(yǎng)或是已經(jīng)做培養(yǎng)結(jié)果未知或是培養(yǎng)結(jié)果是陽性；雖然培養(yǎng)陰性但是產(chǎn)褥期發(fā)熱超過38℃，胎膜早破在12 h以上，必須要給予藥物治療。以危險因素為唯一依據(jù)的預(yù)防策略，胎齡在37周內(nèi)分娩，產(chǎn)前胎膜早破大于12 h，產(chǎn)時體溫≥38℃，以前曾分娩出GBS感染嬰兒，孕期存在GBS菌尿，上述存在一項及以上的病史及癥狀的孕婦都要給予藥物預(yù)防。

免疫預(yù)防主要是使用蛋白-莢膜多糖結(jié)合疫苗預(yù)防。該類疫苗的作用已經(jīng)得到動物實驗的證實，給動物注射疫苗以后可以使其產(chǎn)生特異性IgG抗體，而且吞噬調(diào)理的作用也顯著增強，進(jìn)而能夠有效防止GBS感染。但是當(dāng)前這種蛋白結(jié)合疫苗并未在臨床上被使用，一旦使用將會對全部的育齡婦女實行免疫保護，實現(xiàn)新生兒免受GBS的感染。

妊娠期女性GBS帶菌率受到采集時間、部位和檢測方法等的影響，各國家以及地區(qū)差異很大[20-21]。如北京地區(qū)孕婦帶菌率為7.1%，而上海的孕婦帶菌率為3.7%，桂林為7.5%，南京為4.2%。此次研究在2015年1月～2017年1月期間，對780例圍生期孕婦生殖道分泌物實行GBS培養(yǎng)鑒定和藥敏試驗，同時針對結(jié)果實行統(tǒng)計學(xué)分析。在780例孕婦內(nèi)一共檢出GBS攜帶者245例，帶菌率達(dá)到31.4%。低于30歲組的帶菌率為28.6%，同30歲以上（包括30歲）的帶菌率40.5%對比，差異存在統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=20.124，P<0.05）。高于30歲的孕婦的GBS帶菌率要明顯高于小于30歲的女性，可能是因為超過30歲的女性和低于30歲的女性比較，導(dǎo)致人工流產(chǎn)人數(shù)和概率相應(yīng)的也會增加，在妊娠期女性的雌激素水平相對會高一些，以上因素會造成生殖道細(xì)菌微環(huán)境的變化，在相關(guān)的研究報道中[22-24]，30歲以上的孕婦生殖道中GBS更易滋生及繁殖。

抗生素對防治圍生期孕婦感染GBS十分有效，并且能在一定程度上降低新生兒感染和死亡率。美疾病預(yù)防控制中心建議孕婦GBS感染者借助青霉素G以及氨芐青霉素進(jìn)行防治，若是孕婦對以上藥物存在過敏，則換為克林霉素、紅霉素。此次試驗內(nèi)分離出245株GBS，對其具有抗菌性的10種藥物：萬古霉素和利奈唑胺的耐藥率為0%，青霉素為0.7%，氨芐西林為3.2%，頭孢曲松為6.7%，呋喃妥因為9.4%，左氧氟沙星為21.9%，克林霉素為23.7%，紅霉素為29.9%，四環(huán)素為58.2%；D-抑菌圈試驗陽性率23.9%。依據(jù)藥敏結(jié)果調(diào)整用藥，對于孕婦感染GBS患者的預(yù)防和治療都具有重要意義。

綜上所述，該區(qū)孕婦的GBS帶菌率較高，高齡孕婦的感染者最多，同時，圍生期孕婦感染GBS對萬古霉素、青霉素、頭孢曲松、呋喃妥因和氨芐西林的敏感率較高，可更精確和有效地為圍生期孕婦使用抗生素預(yù)防和治療GBS感染提供有利參考。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 王茜，馬良坤，宋英娜，等.妊娠晚期B族鏈球菌感染的篩查方法及妊娠結(jié)局分析[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2016，96（15）：1188-1191.

[2] 馬勇，李莉.熒光PCR法檢測妊娠孕晚期婦女B族鏈球菌感染的應(yīng)用價值[J].中國實用醫(yī)藥，2016，11（10）：92-93.

[3] 向慧珍，李峰.妊娠晚期婦女B族溶血性鏈球菌帶菌與妊娠結(jié)局的關(guān)系探討[J].實用婦科內(nèi)分泌電子雜志，2016，3（3）：92-93.

[4] 王莉芳，鄧玲，邱國英，等.B 族溶血性鏈球菌帶菌者早期干預(yù)減少胎膜早破早產(chǎn)發(fā)生率的臨床研究[J].山西醫(yī)藥雜志，2016，45（6）：671-673.

[5] Mulla ZD，Annavajjhala V，Gonzalez-Sanchez JL，et al. Group B streptococcal colonization and the risk of pre-eclampsia[J]. Epidemiology and Infection，2013，141（5）：1089-1098.

[6] 王欣，韓淵明.B族鏈球菌感染、預(yù)防及檢測研究進(jìn)展[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（4）：521-523.

[7] 劉曉燕，劉紅云，高延民，等.B族鏈球菌不同菌株對血小板的活化作用[J].中國病理生理雜志，2016，32（2）：333-338.

[8] 曹麗，呂淑英，鮑俊蘭，等.產(chǎn)婦B族溶血性鏈球菌感染的臨床診治分析[J].中國實用醫(yī)藥，2016，11（5）：166-167.

[9] 張靜華，袁應(yīng)華，成潔，等.妊娠末期B族鏈球菌檢測方法的評估[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2016，31（11）：974-977.

[10] 向燕群，范漢恭，袁春雷，等.2種方法在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的價值[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2016， 37（18）：2612-2614.

[11] Herbert Jenny，Thomas Stephen，Brookes Charlotte，et al.Antibody-mediated complement C3b/iC3b binding to group B streptococcus in paired mother and baby serum samples in a refugee population on the Thailand-Myanmar border[J]. Clinical and Vaccine Immunology：CVI，2015，22（3）：319-326.

[12] 張新華，劉克戰(zhàn)，王成虎，等.新生兒B族鏈球菌感染11例臨床分析[J].中國藥物與臨床，2016，16（9）：1360-1362.

[13] 朱燕飛，施美華，王萍，等.妊娠晚期生殖道B族鏈球菌感染對母嬰預(yù)后的影響[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2016， 26（22）：5202-5203，5267.

[14] 李小俠，解娟，詹頡，等.圍產(chǎn)期胎膜早破與生殖道病原菌感染的分析[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2016，31（4）：90-92.

[15] 劉麗，楊文東.圍生期孕婦生殖道 B 族鏈球菌感染與耐藥性分析[J].現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)，2016，42（4）：264-266.

[16] Abrok Marianna，Arcson Agnes，Lazar Andrea，et al.Combination of selective enrichment and MALDI-TOF MS for rapid detection of Streptococcus agalactiae colonisation of pregnant women[J]. Journal of Microbiological Me-thods，2015，114：23-25.

[17] 李麗，吳偉元，吳本清，等.B族鏈球菌基因分型與新生兒侵襲性感染臨床表現(xiàn)的相關(guān)性研究[J].中國新生兒科雜志，2016，31（4）：272-275.

[18] 施云，王蓉，顧偉芳，等.妊娠合并B族鏈球菌感染孕婦分娩前焦慮狀況及擔(dān)心事項分析[J].護理學(xué)報，2016， 23（15）：54-56.

[19] 林新祝，吳健寧，張雪芹，等.晚孕期陰道B族鏈球菌定植與新生兒感染的關(guān)系[J].中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志，2016， 19（7）：491-496..

[20] 陸少顏，徐燁，陳泳言，等.圍產(chǎn)期B族鏈球菌感染婦女進(jìn)行產(chǎn)時抗菌素預(yù)防性治療情況分析[J].中國婦幼保健，2016，31（22）：4653-4655.

[21] 楊笑瓊，肖翔，鐘陽青，等.B族鏈球菌核酸檢測在產(chǎn)前篩查中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代診斷與治療，2016，27（13）：2378- 2380.

[22] 仉英，應(yīng)春妹.B 族鏈球菌檢測在圍產(chǎn)期孕婦感染診斷中的意義[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2016，39（6）：410-412.

[23] 王琴.探究孕婦B族鏈球菌感染與胎膜早破的相關(guān)性分析[J].醫(yī)藥前沿，2016，6（18）：86-87.

[24] Luthander Joachim，Bennet Rutger，Giske Christian G，et al.The aetiology of paediatric bloodstream infections changes after pneumococcal vaccination and group B streptococcus prophylaxis[J]. Acta Paediatrica：International Journal of Paediatrics，2015，104（9）：933-939.

（收稿日期：2017-03-07）