孟莉

(蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院，江蘇蘇州215006)

妊娠期糖尿病患者外周血Sfrp5、FoxM1水平與胰島素抵抗的關(guān)系

孟莉

(蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院，江蘇蘇州215006)

目的 探討妊娠期糖尿病(GDM)患者血清分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(Sfrp5)、血漿Fox基因家族成員FoxM1水平與胰島素抵抗的關(guān)系。方法 選擇GDM患者56例(GDM組)及正常產(chǎn)婦56例(對(duì)照組)，采集空腹靜脈血檢測(cè)空腹胰島素(FINS)、空腹血糖(FPG)，并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)，分別采用ELFSA法和實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)血清Sfrp5水平及血漿FoxM1 mRNA水平，并分析其與HOMA-IR的相關(guān)性。結(jié)果 GDM組血清FPG、FINS、HOMA-IR和血漿FoxM1 mRNA水平均高于對(duì)照組(P均<0.05)，GDM組血清Sfrp5水平低于對(duì)照組(P<0.05)。GDM患者HOMA-IR與血清Sfrp5水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.571，P<0.01)，與血漿FoxM1 mRNA水平呈正相關(guān)(r=0.613，P<0.01)。結(jié)論 GDM患者血清Sfrp5水平降低且與胰島素抵抗呈負(fù)相關(guān)，血漿FoxM1水平增加且與胰島素抵抗呈正相關(guān)。

妊娠期糖尿病；胰島素抵抗；FoxM1基因；分泌型卷曲相關(guān)蛋白5

妊娠期糖尿病(GDM)指孕婦在孕前無(wú)糖尿病或僅有糖耐量減退，在妊娠期發(fā)生的糖尿病[1]，是危害母體和胎兒健康的常見(jiàn)妊娠合并癥[2]。流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國(guó)GDM發(fā)生率為1%～5%[3]。除了對(duì)孕婦本身的遠(yuǎn)期危害外，GDM也可對(duì)圍產(chǎn)期胎兒造成危害，導(dǎo)致流產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限、巨大兒、新生兒低血糖、新生兒呼吸窘迫綜合征等[4]。目前尚不清楚GDM的發(fā)病機(jī)制，研究表明胰島素抵抗在GDM所致的不良結(jié)局中發(fā)揮重要作用[5]。血清分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(Sfrp5)是脂肪因子的一種，具有增加胰島素敏感性、調(diào)節(jié)血糖的作用[6]。Fox基因家族成員FoxM1是調(diào)控細(xì)胞周期和有絲分裂的重要基因，近期研究發(fā)現(xiàn)其可能參與了胰島素抵抗[7]。2014年1月～2016年1月，我們檢測(cè)了56例GDM患者血清Sfrp5及血漿FoxM1 mRNA的表達(dá)情況，并分析其與胰島素抵抗的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇同期在我院產(chǎn)檢的GDM患者56例為GDM組，年齡22～38(30.55±4.13)歲，孕周(38.8±1.4)周。GDM診斷標(biāo)準(zhǔn)參照人民衛(wèi)生出版社出版的《婦產(chǎn)科學(xué)》(第8版)[2]。納入標(biāo)準(zhǔn)：①初產(chǎn)婦；②單胎活產(chǎn)；③無(wú)不良生活嗜好；④孕期未使用過(guò)皮質(zhì)激素；⑤非人工輔助生育；⑥孕期在我院進(jìn)行連續(xù)產(chǎn)檢。排除標(biāo)準(zhǔn)：①孕前有糖尿病及糖尿病家族史；②胎兒畸形；③合并高血壓、肝腎功能不全、多囊卵巢綜合征、內(nèi)分泌疾病等。選擇同期在我院體檢的糖耐量正常產(chǎn)婦56例為對(duì)照組，年齡與GDM組配對(duì)，排除孕前BMI≥24 kg/m2和糖尿病家族史，且空腹血糖<7 mmol/L、任意血糖<11.0 mmol/L。兩組產(chǎn)婦年齡、孕周具有可比性。本研究經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)審查，所有研究對(duì)象自愿簽署知情同意書(shū)。

1.2 血糖檢測(cè)及胰島素抵抗水平測(cè)算 抽取兩組空腹肘靜脈血2 mL，應(yīng)用Cobase601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)空腹胰島素(FINS)、FPG。計(jì)算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)=FPG×FINS/22.5。

1.3 血清Sfrp5水平檢測(cè) 兩組患者于清晨空腹時(shí)采集肘靜脈血4 mL，離心取血清。采用ELISA法檢測(cè)血清Sfrp5水平，試劑盒購(gòu)自美國(guó)R&D公司，操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 血漿FoxM1 mRNA檢測(cè) 采用德國(guó)QIAGEN公司的全血RNA試劑盒提取血漿RNA，采用美國(guó)Bio-Rad公司的RT-PCR試劑盒逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，采用Bio-Rad公司的SYBR定量PCR試劑盒進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)FoxM1 mRNA。引物和內(nèi)參基因均通過(guò)GenBank檢索得到，由TAKARA公司合成。mRNA表達(dá)水平采用2-ΔΔCt法進(jìn)行計(jì)算。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清FPG、FINS、HOMA-IR、Sfrp5及血漿FoxM1 mRNA水平比較 GDM組血清FPG、FINS、HOMA-IR和FoxM1 mRNA表達(dá)水平均高于對(duì)照組(P均<0.05)，GDM組血清Sfrp5水平低于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清FPG、FINS、HOMA-IR、Sfrp5及血漿FoxM1 mRNA水平比較

2.2 GDM患者血清Sfrp5、血漿FoxM1 mRNA水平與胰島素抵抗的相關(guān)性 GDM患者HOMA-IR與血清Sfrp5水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.571，P<0.01)，與血漿FoxM1 mRNA水平呈正相關(guān)(r=0.613，P<0.01)。

3 討論

GDM的發(fā)病原因與2型糖尿病(T2DM)相同，與胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能降低有關(guān)[8]。目前許多學(xué)者認(rèn)為，胰島素抵抗可能先于胰島β細(xì)胞功能降低[9]。妊娠過(guò)程中大量孕酮、雌激素、胰島素酶等抵抗胰島素活性的激素增加，這些激素結(jié)合到靶組織上，可降低胰島素的敏感性，導(dǎo)致孕婦出現(xiàn)一過(guò)性的、生理性的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，機(jī)體為了補(bǔ)償胰島素水平的“相對(duì)不足”而上調(diào)胰島素釋放水平，當(dāng)代償分泌的胰島素仍不足以調(diào)節(jié)血糖時(shí)，則出現(xiàn)糖耐量異常[9]，繼而發(fā)生GDM。GDM患者的糖代謝在產(chǎn)后能回復(fù)正常，但會(huì)增加將來(lái)患T2DM的風(fēng)險(xiǎn)，約60%的GDM產(chǎn)婦最終發(fā)展為T(mén)2DM[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，GDM組血清FPG、FINS、HOMA-IR均高于對(duì)照組，提示GDM患者的血糖水平及HOMA-IR增高，可能與胰島素抵抗有關(guān)。

妊娠期孕婦攝入能量增加，為胎兒生長(zhǎng)提供能量和營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)也為母體儲(chǔ)存能量，若沒(méi)有良好的飲食指導(dǎo)，很容易出現(xiàn)脂肪快速積累。目前研究證實(shí)，脂肪組織除了儲(chǔ)存能量外，還可能是體內(nèi)重要的且十分活躍的內(nèi)分泌器官，其分泌的多種脂肪因子直接或間接參與了體內(nèi)多種代謝[11]。Sfrp5是最近研究比較多的一種脂肪因子，動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)其在肥胖小鼠血清中降低，給正常小鼠注入Sfrp5后，可增加胰島素敏感性，促進(jìn)葡萄糖攝入和脂肪合成[12]。研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病患者脂肪組織中的Sfrp5基因表達(dá)水平顯著降低[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，GDM組血清Sfrp5水平低于對(duì)照組，且GDM患者HOMA-IR與血清Sfrp5水平呈負(fù)相關(guān)，表明GDM患者體內(nèi)Sfrp5分泌受到影響，可能是導(dǎo)致胰島素抵抗的一個(gè)重要因素，Sfrp5表達(dá)下調(diào)是胰島素抵抗的特征表現(xiàn)。

胰島素抵抗的發(fā)生除了胰島素敏感性降低，可能還與胰島細(xì)胞的增殖改變有關(guān)。FoxM1是Fox家族的成員，是與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子，在具有分裂活性的細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)，對(duì)調(diào)控細(xì)胞周期和有絲分裂起重要作用[8]。在多種腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)FoxM1異常高表達(dá)，且與預(yù)后不良具有相關(guān)性。最新的研究顯示，F(xiàn)oxM1可能參與了胰島素抵抗的發(fā)展過(guò)程，當(dāng)GDM患者體內(nèi)出現(xiàn)胰島素敏感性降低時(shí)，F(xiàn)oxM1表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)胰島β細(xì)胞增生，分泌更多胰島素以代償胰島素敏感性降低的影響[14]。此外，F(xiàn)oxM1并不是作為單一因素影響胰島細(xì)胞，當(dāng)FoxM1表達(dá)上調(diào)時(shí)，會(huì)激活一系列與胰島β細(xì)胞增殖、分泌及血糖調(diào)節(jié)有關(guān)的基因。已有研究發(fā)現(xiàn)，在肥胖患者胰島組織中FoxM1基因及其靶基因表達(dá)水平均顯著增高[15]，且FoxM1基因的表達(dá)水平與患者BMI具有相關(guān)性。本研究發(fā)現(xiàn)，GDM患者血漿FoxM1 mRNA水平增高，并且與GDM患者HOMA-IR呈正相關(guān),提示FoxM1基因表達(dá)水平增加參與了GDM的發(fā)病過(guò)程，并且與GDM的發(fā)展密切相關(guān)。

綜上所述，GDM患者血清Sfrp5水平降低且與胰島素抵抗呈負(fù)相關(guān)，血漿FoxM1水平增加且與胰島素抵抗呈正相關(guān)；血漿Sfrp5和FoxM1 mRNA可用于早期發(fā)現(xiàn)和診斷GDM，二者之間的關(guān)系和作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

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B

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2017-02-10)