李海燕，郭 琪

（河南省食品藥品檢驗所，河南 鄭州 450003）

·實驗研究·

頂空進(jìn)樣氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法分析天麻丸中揮發(fā)性成分

李海燕，郭 琪

（河南省食品藥品檢驗所，河南 鄭州 450003）

目的 比較直接粉碎成細(xì)粉和揮發(fā)油測定法提取天麻丸中的揮發(fā)性成分的差異。方法 利用頂空進(jìn)樣氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用（GCMS）儀進(jìn)行鑒定分析，GC－MS條件：HP－5MS石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 m）；起始溫度為40℃，保持1 min后以3℃ ／min的速率升溫至195℃，并保持2 min，再以5℃ ／min的速率升溫至240℃，保持6 min至完成分析；載氣為氦氣；柱流量為1.1 mL／min；分流比為10∶1；進(jìn)樣口溫度為250℃；EI電離源能量為70 eV；離子源溫度為230℃；掃描范圍為 m／z 45～500。結(jié)果 在天麻丸粉末中檢測出37種成分，鑒定出26種成分，占總揮發(fā)性成分的83.48%；在天麻丸揮發(fā)油中檢測出32種成分，鑒定出21種成分，占總揮發(fā)性成分的87.25%。結(jié)論 采用直接粉碎成細(xì)粉和揮發(fā)油測定法提取得到的天麻丸中揮發(fā)性成分有較大差異，為進(jìn)一步闡明該藥的活性物質(zhì)基礎(chǔ)提供了實驗數(shù)據(jù)。該方法為天麻丸氣相色譜指紋圖譜的研究及其質(zhì)量控制提供了依據(jù)。

天麻丸；粉末；揮發(fā)油；揮發(fā)性成分；頂空進(jìn)樣；氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法

天麻丸由天麻、羌活、獨活、鹽杜仲、牛膝、粉萆薢、附子（黑順片）、當(dāng)歸、地黃、玄參等中藥組方，具有祛風(fēng)除濕、通絡(luò)止痛、補益肝腎的功效，用于風(fēng)濕瘀阻、肝腎不足所致的痹病，癥見肢體拘攣、手足麻木、腰腿疼痛。天麻丸收載于2015年版《中國藥典（一部）》[1]，原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅對少部分藥物進(jìn)行質(zhì)量控制，而天麻丸處方中天麻、羌活、獨活、粉萆薢[2]、杜仲、附子[3]、當(dāng)歸等藥材均有揮發(fā)性成分，因此制訂了采用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用(GC－MS)儀測定天麻丸粉末及揮發(fā)油中揮發(fā)性成分的方法，以更好地控制其質(zhì)量。采用頂空進(jìn)樣GC－MS對天麻丸粉末及揮發(fā)油總離子流圖進(jìn)行分析，對2種提取方法所得揮發(fā)性成分進(jìn)行鑒定和比較?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

GCMS－QP 2010 Ultra型氣質(zhì)聯(lián)用儀（日本島津公司）；HP－5MS型石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）。天麻丸(河南省百泉制藥有限公司，批號分別為141001，141002，141003）；試驗所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 氣相色譜條件

色譜柱：HP－5MS石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣：高純度氦氣；柱流量：1.1 mL／min；分流比：10∶1；進(jìn)樣口溫度：250℃；程序升溫：初始溫度40℃（1 min），以3℃ ／min的速率升至195℃，保持2 min，再以5℃／min的速率升至240℃，保持6 min。

2.2 質(zhì)譜條件

電子轟擊離子源：EI源；電離源能量：70 eV；離子源溫度：230℃；四級桿溫度：150℃；掃描范圍：m／z 45～500。

2.3 溶液制備

表1 各化合物相對百分含量

取天麻丸適量，研細(xì)，精密稱取0.5 g，置20 mL進(jìn)樣瓶中，密封，即得天麻丸粉末樣品溶液。取天麻丸適量，研細(xì)，精密稱取 40 g，置揮發(fā)油提取器中，加水250 mL。按2015年版《中國藥典（四部）》通則2204“揮發(fā)油測定法”項下甲法提取揮發(fā)油，得到黃色油體約0.6 mL，得油率為1.5%（mL／g），取揮發(fā)油置25 mL容量瓶中，加正己烷稀釋至刻度，精密量取2 mL，置20 mL進(jìn)樣瓶中，密封，即得天麻丸揮發(fā)油樣品溶液[4－5]。

圖1 天麻丸揮發(fā)性成分的總離子流圖

2.4 測定方法

取2.3項下溶液頂空進(jìn)樣[6]，頂空瓶加熱溫度為70℃，保溫時間為20 min，氣體進(jìn)樣量1 mL，注入GC－MC。

2.5 TIC與百分含量

樣品經(jīng)GC－MS分析，總離子流圖（TIC）見圖1。譜圖數(shù)據(jù)經(jīng)NISTⅡ及NISTⅡS譜圖庫自動檢索，與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照、人工譜圖解析等方法確認(rèn)各化合物，采用面積歸一化法確定各組分的相對百分含量，結(jié)果見表1。

3 討論

本試驗結(jié)果表明，天麻丸粉末頂空進(jìn)樣測定，共分離出37個峰，鑒定出26種成分，占揮發(fā)油相對含量的83.48%，鑒定的化合物主要有萜烯類、酯類、酰胺類等，相對含量較高的成分有2－蒎烯（20.09%）、左旋乙酸冰片酯（14.93%）、正己醛（8.19%）；天麻丸揮發(fā)油測定，共分離出32個峰，鑒定出21種成分，占揮發(fā)油相對含量的87.25%，鑒定的化合物主要有烷烴類、酮類、醛類等，相對含量較高的成分有甲基環(huán)己烷（33.04%）、環(huán)己酮（18.64%）和正己醛（9.89%）。當(dāng)歸揮發(fā)油中含有的花側(cè)柏烯[7]，天麻、杜仲揮發(fā)油中的正庚醛[8－9]，羌活揮發(fā)油中的2－蒎烯、α－水芹烯[10]，獨活揮發(fā)油中的糠醛[11]，均可在天麻丸粉末總離子流圖或天麻丸揮發(fā)油總離子流圖中顯示出來。

本試驗結(jié)果顯示，兩者共有成分5種，直接粉碎成細(xì)粉法特有成分21種，揮發(fā)油測定法特有成分16種。直接粉碎成細(xì)粉法提取的成分基本在30 min前出峰，而揮發(fā)油測定法提取的成分在 38 min時還有成分，30 min后的成分占揮發(fā)性成分總面積的6%。可見，揮發(fā)油測定法得到的揮發(fā)性成分極性較大，沸點較高。

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Analysis of Volatile Constituents from Tianma Pill by Headspace GC－MS

Li Haiyan，Guo Qi
（Henan Provincial Institute of Food and Drug Control，Zhengzhou，Henan，China 450003）

Objective To compare the differences of the volatile components of the Tianma Pill were extracted by direct pulverized into fine powder and steam distillation method.Methods The structures were analyzed and identified by headspace GC－MS.The GC－MS conditions were set as follows：HP－5MS quartz capillary column（30 m×0.25 mm，0.25 μm），the initial temperature was 40℃ and maintained for 1 min，the temperature was heating to 195℃ at a rate of 3℃ ／min and maintained for 2 min，then heating to 240℃at a rate of 5℃ ／min and maintained for 6 min until completion of analysis.The carrier gas was helium，the column flow rate was 1.1 mL／min，the split ratio was 10∶1，the inlet temperature was 250℃，the EI ionization source was 70 eV，the ion source temperature was 230℃，the scan range ofm／z 45－500.Results Totally 37 compounds were detected from Tianma Pill powder，among them，only 26 compounds were identified，which accounted for 83.48% of total volatile composition.Totally 32 compounds were detected from Tianma Pill volatile oil，among them，only 21 compounds were identified，which accounted for 87.25% of total volatile composition.Conclusion The type of constituents contained in the volatile oil extracted by direct pulverized into fine powder and steam distillation methods are totally different，and GC－MS can be used to identify the structures and relative content of volatile components，the results of this study can provide an experimental basis for development and utilization of Tianma Pill.The proposed method could provide useful information for the basic study on gas chromatography fingerprint and the quality evaluation of Tianma Pill.

Tianma Pill；powder；volatile oil；volatile components；headspace；GC－MS

R284.1

A

1006－4931(2017)16－0015－03

2017－04－10)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.16.005

李海燕（1978－），女，碩士研究生，副主任藥師，研究方向為中藥檢驗及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，（電子信箱）kjlhy＠139.com。