史家文，關(guān)煥玉，何 洋，王小明，覃文婷,3，雒曉梅，宿美鳳,3，岳佳菁，石 鉞

（1.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193； 2.山東省泰安市中心醫(yī)院，山東 泰安 271000；3.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100102）

·實(shí)驗(yàn)研究·

半夏瀉心湯不同配伍組分對(duì)伊立替康致小鼠遲發(fā)性腹瀉的影響

史家文1，2，關(guān)煥玉1，何 洋1，王小明1，覃文婷1,3，雒曉梅1，宿美鳳1,3，岳佳菁1，石 鉞1

（1.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193； 2.山東省泰安市中心醫(yī)院，山東 泰安 271000；3.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100102）

目的 觀察半夏瀉心湯不同配伍組分對(duì)伊立替康所致小鼠遲發(fā)性腹瀉的防治效果，并探討其配伍機(jī)制。方法 給ICR小鼠腹腔注射伊立替康40 mg／kg，連續(xù)4 d，復(fù)制伊立替康所致小鼠遲發(fā)性腹瀉。將健康雌性ICR小鼠90只隨機(jī)分為正常組、模型組、陽(yáng)性藥組、半夏瀉心湯全方組(簡(jiǎn)稱全方組)及5種不同配伍組分組，各10只。腹瀉模型造模方法同上，正常組腹腔注射等體積生理鹽水，陽(yáng)性藥組、全方組及5種不同配伍組分組于注射伊立替康前4 d開始，每天1次灌胃給藥，共用藥8 d。對(duì)各組大鼠腹瀉情況進(jìn)行評(píng)分，記錄體質(zhì)量；實(shí)驗(yàn)小鼠于第8天處死，取盲腸及結(jié)腸組織，光鏡下觀察腸黏膜組織結(jié)構(gòu)，測(cè)定腸道 －葡萄糖醛酸酶的活性和血清白細(xì)胞介素15（IL－15）水平。結(jié)果 小鼠腹腔注射伊立替康后均出現(xiàn)明顯的腹瀉，全方組、苦寒組、辛溫＋苦寒組、苦寒＋補(bǔ)益組腹瀉指數(shù)較模型組明顯降低（P＜0.01），體質(zhì)量下降得到明顯改善，且光鏡下腸黏膜損壞程度較模型組輕微，小腸內(nèi)容物 －葡萄糖醛酸酶活性降低(P＜0.01)，血清IL－15水平升高。結(jié)論 半夏瀉心湯全方組及苦寒組、辛溫＋苦寒組、苦寒＋補(bǔ)益組分對(duì)伊立替康所致小鼠遲發(fā)性腹瀉具有良好的預(yù)防作用，也體現(xiàn)了該方“寒熱同調(diào)”的配伍特點(diǎn)。

伊立替康；遲發(fā)性腹瀉；半夏瀉心湯；配伍機(jī)制

遲發(fā)性腹瀉是伊立替康（irinotecan，CPT－11）臨床劑量的限制性毒性反應(yīng)，研究表明，接受本品治療的患者可出現(xiàn)3～4度腹瀉，并致化學(xué)治療(簡(jiǎn)稱化療)方案提前終止的比例超過(guò)40%[1－2]，如何預(yù)防和治療遲發(fā)性腹瀉成為近些年腫瘤臨床研究的一個(gè)熱門課題。臨床已證實(shí)，半夏瀉心湯能有效預(yù)防CPT－11所致遲發(fā)性腹瀉[3－4]，但其作用機(jī)制尚不明確。半夏瀉心湯出自張仲景所著《傷寒雜病論》，為瀉心湯類代表方，由半夏、黃芩、干姜、黨參、炙甘草、黃連、大棗7味中藥組方，具有調(diào)和肝脾、寒熱平調(diào)、消痞散結(jié)功效，用藥具有寒熱、苦辛、補(bǔ)瀉并用的特點(diǎn)。前期研究表明，半夏瀉心湯可通過(guò)改變CPT－11及其代謝物的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)發(fā)揮防治CPT－11所致遲發(fā)性腹瀉的作用[5]。本研究中著重考察了半夏瀉心湯及其不同配伍組分（辛溫、苦寒和補(bǔ)益）對(duì)遲發(fā)性腹瀉的改善作用，同時(shí)對(duì)其配伍機(jī)制進(jìn)行了初步探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 動(dòng)物與試藥

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

ICR小鼠90只，清潔級(jí)，雌性，體質(zhì)量30～35 g（北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證號(hào)為SCXK 2013007），動(dòng)物飼養(yǎng)房間（SPF級(jí)）內(nèi)的溫度控制在（25±1）℃，相對(duì)濕度為55% ～70%，12 h光照和12 h黑暗交替，給予普通飼料，自由飲水。適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d，實(shí)驗(yàn)前12 h禁食不禁水。實(shí)驗(yàn)遵循動(dòng)物倫理學(xué)原則。

1.2 藥材與藥品

清半夏（pinellia ternate）、黃芩（scutellaria baicalensis）、黃連（coptis chinensis）、炙甘草（glycyrrhiza uralensis）、干姜（zingiber officinale）、黨參（codonopsis pilosula）和大棗（ziziphus jujuba）均購(gòu)自北京華邈中藥工程技術(shù)開發(fā)中心；CPT－11注射液(CAMPTO，美國(guó)輝瑞公司，進(jìn)口藥品注冊(cè)證號(hào)H20080574，批號(hào)為EJ23M）；鹽酸洛哌丁胺膠囊（西安楊森制藥公司，批號(hào)為130219290）。

1.3 半夏瀉心湯及其不同配伍組分的制備

1.3.1 全方提取物

按處方比例稱取清半夏、黃芩、黃連、炙甘草、干姜、黨參和大棗，加8倍量水，冷浸30 min，微沸回流40 min，傾出藥液，再加6倍量水，微沸回流30 min，傾出藥液，合并2次的藥液，濾紙過(guò)濾，減壓濃縮，冷凍干燥，備用。

1.3.2 各配伍組提取物

按各單味藥在復(fù)方中的配比，分別稱取各單味藥，加8倍量水，冷浸30 min，微沸回流40 min，傾出藥液，再加6倍量水，微沸回流30 min，傾出藥液，合并2次的藥液，濾紙過(guò)濾，減壓濃縮，冷凍干燥，制成辛溫組（半夏＋干姜）、苦寒組（黃芩 ＋黃連）、辛溫 ＋苦寒組（半夏＋干姜＋黃芩＋黃連）、辛溫＋補(bǔ)益組（半夏＋干姜＋黨參＋大棗＋甘草）和苦寒＋補(bǔ)益組（黃芩＋黃連＋黨參＋大棗＋甘草），備用。

2 方法與結(jié)果

2.1 動(dòng)物分組及給藥

將90只小鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、陽(yáng)性藥組、半夏瀉心湯全方組(簡(jiǎn)稱全方組)及辛溫組、苦寒組、辛溫＋苦寒組、辛溫＋補(bǔ)益組、苦寒＋補(bǔ)益組，各10只。正常組：蒸餾水等量灌胃，1次／天，第4天起腹腔注射等體積生理鹽水，連續(xù)用藥 4 d；模型組：以 CPT－11 (40 mg／kg)代替生理鹽水，其余與正常組同步處理；陽(yáng)性藥組：以洛哌丁胺懸濁液代替蒸餾水[按正常人（體質(zhì)量70 kg）每日最大藥量18 mg計(jì)算小鼠所需口服藥量]，其余與模型組同步處理；全方組：以半夏瀉心湯全方代替蒸餾水（按小鼠等效劑量的4倍計(jì)算半夏瀉心湯提取物的每天用量），其余與模型組同步處理；辛溫組、苦寒組、辛溫＋苦寒組、辛溫＋補(bǔ)益組、苦寒＋補(bǔ)益組：以各配伍組提取物代替半夏瀉心湯全方（按小鼠等效劑量的4倍及在原方中的比例計(jì)算半夏瀉心湯熱藥組提取物的每天用量），其余與全方組同步處理。

2.2 腹瀉情況觀察

末次腹腔注射CPT－11后出現(xiàn)的腹瀉為遲發(fā)性腹瀉，每天觀察各組小鼠遲發(fā)性腹瀉狀況6 h。腹瀉評(píng)定按照《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》[6]，以腹瀉指數(shù)作為評(píng)定腹瀉的主要指標(biāo)。1）腹瀉率：一組動(dòng)物中排稀便的動(dòng)物占該組動(dòng)物總數(shù)的百分率；2）稀便率：每只動(dòng)物所排的稀便數(shù)與總便數(shù)之比；3）稀便級(jí)：表示稀便程度，以稀便污染濾紙形成污染面積的大小定級(jí)；4）腹瀉指數(shù)：稀便率與稀便級(jí)的乘積。數(shù)據(jù)分析采用 t檢驗(yàn)。末次CPT－11注射后24 h內(nèi)，模型組大部分小鼠解淡黃色稀便，陽(yáng)性藥組、全方組及苦寒＋補(bǔ)益組稀便不明顯，其余各組部分小鼠解淡黃色稀便，計(jì)算各組小鼠的腹瀉指數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表1。

24 h后，模型組小鼠腹瀉率達(dá)到100.00%，并持續(xù)到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。與模型組比較，全方組、苦寒組、辛溫＋苦寒組、苦寒＋補(bǔ)益組和陽(yáng)性藥組腹瀉指數(shù)明顯降低（P＜0.01），辛溫組和辛溫＋補(bǔ)益組腹瀉指數(shù)無(wú)顯著性差異；與陽(yáng)性藥組比較，全方組、苦寒組、辛溫＋苦寒組和苦寒＋補(bǔ)益組腹瀉指數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，辛溫組和辛溫＋補(bǔ)益組腹瀉指數(shù)顯著升高（P＜0.05）。

腹瀉指數(shù)的變化與小鼠體質(zhì)量的變化基本一致，小鼠體質(zhì)量變化見(jiàn)表2。

2.3 腸組織學(xué)觀察

于第8天處死小鼠，剝離小腸，盲腸連同結(jié)腸上段約 2 cm處切斷取下，用生理鹽水沖洗干凈，快速置10%福爾馬林溶液中固定，組織經(jīng)修塊，梯度酒精脫水，石蠟包埋，切片厚度5 μm，常規(guī)蘇木素－伊紅(HE)染色，光學(xué)顯微鏡下觀察小鼠腸黏膜組織結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，正常組腸壁各層結(jié)構(gòu)清晰，黏膜內(nèi)腺體形態(tài)規(guī)則，腺體間質(zhì)未見(jiàn)明顯異常。模型組的盲腸和結(jié)腸均出現(xiàn)腸黏膜上皮細(xì)胞變性壞死，杯狀細(xì)胞增多，黏膜下層水腫，少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等病變。陽(yáng)性藥組腸壁各層結(jié)構(gòu)清晰，黏膜內(nèi)腺體形態(tài)規(guī)則，腺體間質(zhì)未見(jiàn)明顯異常。全方組有1例結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞發(fā)生腫脹變性，1例結(jié)腸杯狀細(xì)胞增多，其余各受檢臟器未見(jiàn)明顯病理改變。其他組盲腸和結(jié)腸出現(xiàn)不同程度的組織病理變化，其中苦寒組、辛溫＋苦寒組、苦寒＋補(bǔ)益組動(dòng)物病變緩解較明顯，表現(xiàn)為上皮腫脹變性，杯狀細(xì)胞增多，水腫等輕微病變；辛溫組及辛溫＋補(bǔ)益組小鼠腸形態(tài)病變緩解作用輕微，表現(xiàn)為腸黏膜上皮細(xì)胞變性壞死，杯狀細(xì)胞增多，黏膜下層水腫，少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等病變。

表1 各組小鼠腹瀉指數(shù)比較（±s，n＝10）

表1 各組小鼠腹瀉指數(shù)比較（±s，n＝10）

注：與模型組比較， P＜0.01；與陽(yáng)性藥組比較，＃P＜0.05。

組別正常組模型組陽(yáng)性藥組全方組辛溫組苦寒組辛溫＋苦寒組辛溫＋補(bǔ)益組苦寒＋補(bǔ)益組平均稀便率（%）0 44.72 40.53 41.87 43.74 42.09 41.86 43.32 42.16平均稀便級(jí)0 1.054 0.944 1.003 1.096 1.024 1.032 1.076 1.008腹瀉指數(shù)0 0.471±0.072 0.382±0.031 0.420±0.026 0.479±0.043＃0.431±0.037 0.432±0.047 0.466±0.045＃0.425±0.025

表2 各組小鼠體質(zhì)量變化比較（±s，g，n＝10）

表2 各組小鼠體質(zhì)量變化比較（±s，g，n＝10）

組別正常組模型組陽(yáng)性藥組全方組辛溫組苦寒組辛溫＋苦寒組辛溫＋補(bǔ)益組苦寒＋補(bǔ)益組第1天32.63±1.12 32.63±1.57 32.80±1.85 32.30±1.01 32.08±1.17 31.48±1.97 32.00±1.10 31.73±1.77 32.30±1.54第5天33.10±2.10 31.66±1.06 31.05±2.09 31.84±1.01 31.58±1.66 29.82±1.91 30.93±1.46 31.49±1.81 31.62±2.07第8天33.13±2.10 26.99±2.11 31.84±1.38 31.90±1.49 27.01±2.03 27.80±2.49 28.81±1.87 28.96±3.25 31.72±2.50體質(zhì)量變化0.50±0.12－5.64±2.42－0.86±1.30－0.65±1.82－0.16±0.05－0.12±0.07－3.43±1.98－2.77±2.87－0.58±1.25

2.4 腸道 －葡萄糖醛酸酶測(cè)定

取盲腸、結(jié)腸內(nèi)容物，稱定質(zhì)量，用9倍生理鹽水勻漿，以4 000 r／min的速率離心10 min，得到腸內(nèi)容物勻漿上清，分離上清液，置無(wú)菌EP管中，進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法（ELISA）檢測(cè)，檢測(cè)方法和步驟嚴(yán)格按照試劑盒附件說(shuō)明書進(jìn)行。光密度(OD)值測(cè)定：應(yīng)用酶標(biāo)儀（MQx200型微孔板酶標(biāo)儀）在405 nm波長(zhǎng)處測(cè)定β－葡萄糖醛酸酶的 OD值，繪制β－葡萄糖醛酸酶標(biāo)準(zhǔn)曲線（r＝0.999 7），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)腸道中β－葡萄糖醛酸酶的活性。數(shù)據(jù)分析采用 t檢驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表3。結(jié)果顯示，與模型組相比，全方組、苦寒組、辛溫＋苦寒組、苦寒＋補(bǔ)益組酶活性顯著降低（P＜0.01），其中苦寒＋補(bǔ)益組與全方組作用相當(dāng)。

表3 各組小鼠 －葡萄糖醛酸酶活性比較（±s，U／mL，n＝10）

表3 各組小鼠 －葡萄糖醛酸酶活性比較（±s，U／mL，n＝10）

注：與模型組比較， P＜0.01；與苦寒組比較， P＜0.01。

組別正常組模型組陽(yáng)性藥組全方組辛溫組苦寒組辛溫＋苦寒組辛溫＋補(bǔ)益組苦寒＋補(bǔ)益組－葡萄糖醛酸酶638.21±14.40 632.28±29.52 238.33±15.68 322.18±12.28 645.92±39.66 399.32±45.07 403.45±47.66 647.96±36.78 327.14±22.19

2.5 血清白細(xì)胞介素15（IL－15）測(cè)定

小鼠于第8天脫臼處死前，摘眼球取血0.5 mL，室溫靜置1 h，4℃下以3 000 r／min的速率離心15 min，分離血清，進(jìn)行ELISA檢測(cè)。檢測(cè)方法和步驟嚴(yán)格按照試劑盒附件說(shuō)明書進(jìn)行。OD值測(cè)定：應(yīng)用酶標(biāo)儀（MQx200型微孔板酶標(biāo)儀）在 450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定IL－15的 OD值，繪制IL－15標(biāo)準(zhǔn)曲線（r＝0.999 2），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)血清中IL－15水平。數(shù)據(jù)分析采用 t檢驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表4。結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組、辛溫組、辛溫＋補(bǔ)益組IL－15水平明顯降低（P＜0.01）；與模型組相比，全方組、苦寒組、辛溫＋苦寒組、苦寒＋補(bǔ)益組的IL－15水平明顯升高（P＜0.01）。

表4 各組小鼠血清IL－15水平比較（±s，pg／mL，n＝10）

表4 各組小鼠血清IL－15水平比較（±s，pg／mL，n＝10）

注：與正常組比較， P＜0.01；與模型組比較， P＜0.01。

組別正常組模型組陽(yáng)性藥組全方組辛溫組苦寒組辛溫＋苦寒組辛溫＋補(bǔ)益組苦寒＋補(bǔ)益組IL－15 89.66±6.07 49.40±9.74 80.91±8.68 190.93±15.83 54.42±5.92 140.96±10.32 157.87±22.99 50.11±7.76 186.87±16.19

3 討論

遲發(fā)性腹瀉是化療藥CPT－11的常見(jiàn)不良反應(yīng)，影響化療進(jìn)程和生存質(zhì)量。目前認(rèn)為，其發(fā)生機(jī)制主要是CPT－11在肝羧基酯酶作用下轉(zhuǎn)化為活性代謝產(chǎn)物SN－38，后者隨膽汁排泄至腸腔，重吸收時(shí)產(chǎn)生腸毒性，發(fā)生遲發(fā)性腹瀉，同時(shí)造成腸黏膜免疫屏障功能的損傷[7]。

本研究中按 Melo方法[8]，對(duì) ICR小鼠腹腔注射CPT－11造模進(jìn)行了考察，結(jié)果表明，劑量調(diào)整至40 mg／kg進(jìn)行腹腔注射時(shí)，連續(xù)用藥4 d，小鼠一般在用藥后第4天開始腹瀉，第5天腹瀉率達(dá)100.00%，平均腹瀉次數(shù)約為16次／天，建立的模型結(jié)果與大鼠遲發(fā)性腹瀉模型一致[9]。采用腹瀉指數(shù)評(píng)價(jià)腹瀉等級(jí)，既能兼顧稀便量的變化，又能考慮到質(zhì)的因素，使觀察指標(biāo)較全面、客觀。選擇ICR小鼠，腹腔給藥，用腹瀉指數(shù)評(píng)定，可提供一種成本可以接受、觀察指標(biāo)全面客觀的CPT－11遲發(fā)性腹瀉模型。

有研究認(rèn)為，CPT－11腸毒性的發(fā)生機(jī)制是由其活性代謝物SN－38對(duì)腸黏膜的直接組織損傷引起。SN－38通過(guò)干擾DNA的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ(TopoⅠ)而對(duì)腸黏膜產(chǎn)生毒性作用[10]。腸道內(nèi)的細(xì)菌和羧酸酯酶在腸黏膜損傷機(jī)制中起重要作用，研究揭示了細(xì)菌β－葡萄糖醛酸酶在遲發(fā)性腹瀉發(fā)生中的作用，腸道微生物菌群能在腸道中將SN－38G轉(zhuǎn)化為SN－38，從而導(dǎo)致腸黏膜損害[11]。實(shí)驗(yàn)大鼠預(yù)防性應(yīng)用抗生素，能降低腸腔內(nèi)SN－38的濃度，并減少腹瀉的發(fā)生，緩解體質(zhì)量的減輕[12]。

IL－15是與IL－2功能相似的免疫抗炎性因子，可促進(jìn)B細(xì)胞的分化增殖，誘導(dǎo)自然殺傷（NK）細(xì)胞增殖、細(xì)胞因子產(chǎn)生，與IL－12協(xié)同作用對(duì)增強(qiáng)NK細(xì)胞的功能和機(jī)體免疫力有重要作用。有研究發(fā)現(xiàn)，IL－15可降低CPT－11所致腹瀉的發(fā)生率，并防止十二指腸微絨毛的縮短和破壞，減輕結(jié)腸隱窩杯狀細(xì)胞的損傷[13]。

研究顯示，中醫(yī)藥在治療CPT－11所致遲發(fā)性腹瀉中顯現(xiàn)出獨(dú)特的療效，以整體觀為指導(dǎo)，運(yùn)用臟腑辨證、氣血津液辨證的理論，可明顯改善化療所致腸毒性出現(xiàn)的腹瀉、腹痛，改善患者的生存質(zhì)量[14－15]。中醫(yī)中藥的成分及其配伍規(guī)律相對(duì)復(fù)雜，而相關(guān)的現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)研究較少，仍然處在探索階段。半夏瀉心湯組方寒熱并用，辛開苦降，具有和胃降逆、開結(jié)除痞、補(bǔ)氣和中等功效，對(duì)于腸的運(yùn)動(dòng)功能有雙相調(diào)節(jié)作用，可使異常運(yùn)動(dòng)的腸道功能趨于正常。

本研究中，在成功建立小鼠遲發(fā)性腹瀉模型的基礎(chǔ)上，從腹瀉指數(shù)、腸組織學(xué)病理變化、腸道β－葡萄糖醛酸酶活性、血清IL－15水平多個(gè)角度，考察了半夏瀉心湯及不同配伍組分的相互作用。結(jié)果顯示，半夏瀉心湯全方組、苦寒組、辛溫＋苦寒組、苦寒＋補(bǔ)益組的小鼠體質(zhì)量減輕較小，腹瀉指數(shù)降低；盲腸和結(jié)腸HE染色腸黏膜情況發(fā)生的病變較輕，提示半夏瀉心湯及其不同配伍組分灌胃給藥后，對(duì)腸黏膜結(jié)構(gòu)損傷的病理變化有不同程度的治療作用，治療效果由強(qiáng)到弱依次為：全方組＞苦寒＋補(bǔ)益組＞辛溫＋苦寒組＞苦寒組＞辛溫＋補(bǔ)益組＞辛溫組，可見(jiàn)，半夏瀉心湯全方的作用不可替代，苦寒組與補(bǔ)益組或辛溫組配伍，具有增效作用；腸道β－葡萄糖醛酸酶活性降低；血清IL－15水平升高。提示半夏瀉心湯具有防治CPT－11所致遲發(fā)性腹瀉的作用，全方使用效果最好，苦寒組（黃芩＋黃連）在預(yù)防遲發(fā)性腹瀉方面起主導(dǎo)作用，而在保護(hù)腸黏膜結(jié)構(gòu)、降低腸道β－葡萄糖醛酸酶活性、增高血清IL－15水平方面，苦寒組與補(bǔ)益組或辛溫組配伍，則具有增效作用，體現(xiàn)出半夏瀉心湯“寒熱同調(diào)”（黃芩 ＋黃連，半夏＋干姜）、“相須相使”（黃芩＋黃連）的配伍特點(diǎn)。

目前的多數(shù)研究認(rèn)為，CPT－11化療后腹瀉可能與UGT1A1基因的多態(tài)性及腸道菌群的改變有關(guān)。有研究表明，UGT1A1基因多態(tài)性可降低UGT1A1活性，從而對(duì)SN－38的滅活能力下降，腸道內(nèi)大量聚集的具有腸黏膜毒性的 SN－38，可直接作用于腸上皮細(xì)胞內(nèi)TopoⅠ，引起DNA雙鏈斷裂，腸上皮細(xì)胞壞死、凋亡，進(jìn)而破壞小腸黏膜結(jié)構(gòu)，引起小腸吸收功能和分泌功能紊亂，導(dǎo)致腹瀉發(fā)生[16]。病理學(xué)主要表現(xiàn)為腸壁變薄，伴空腔形成、血管擴(kuò)張、炎細(xì)胞浸潤(rùn)及回腸細(xì)胞凋亡，小腸絨毛萎縮，腸黏膜損害，通常以結(jié)腸和盲腸段的損傷更嚴(yán)重[17]。國(guó)外的研究表明，CPT－11化療所致腹瀉還與腸道細(xì)菌產(chǎn)生的β－葡萄糖醛酸酶有關(guān)[18]，SN－38G易被β－葡萄糖醛酸酶水解，重新轉(zhuǎn)變成SN－38，損傷腸道黏膜，引起腹瀉[19]。因此，產(chǎn)β－葡萄糖醛酸酶的細(xì)菌及β－葡萄糖醛酸酶均參與了CPT－11化療所致遲發(fā)性腹瀉的發(fā)生。之前對(duì)生姜瀉心湯的相關(guān)研究結(jié)果顯示，降低腸道β－葡萄糖醛酸苷酶的活性，促進(jìn)小鼠血清中IL－15的表達(dá)，提升UGT1A1蛋白的表達(dá)，從而降低腸道SN－38的濃度和接觸時(shí)間，維持腸道正常結(jié)構(gòu)和功能，可能是生姜瀉心湯治療CPT－11導(dǎo)致結(jié)直腸癌小鼠遲發(fā)性腹瀉多作用靶點(diǎn)的體現(xiàn)[20]。半夏瀉心湯與生姜瀉心湯為類同方，藥味組方基本相同，從而推測(cè)，半夏瀉心湯在治療CPT－11所致遲發(fā)性腹瀉中也應(yīng)具有類似的作用機(jī)制。

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Clinical Evaluation of Different Combinations of Banxia Xiexin Decoction for Treating Delayed Diarrhea Caused by Irinotecan in Mice

Shi Jiawen1，2，Guan Huanyu1，He Yang1，Wang Xiaoming1，Tan Wenting1，3，Luo Xiaomei1，Su Meifeng1，3，Yue Jiajing1，Shi Yue1
（1.Institute of Medicinal Plant Development，Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College，Beijing，China 100193；2.Tai′an City Central Hospital，Tai′an，Shandong，China 271000； 3.College of Traditional Chinese Pharmacy，Beijing University of Traditional Chinese Medicine，Beijing，China 100102）

Objective To observedifferent combinations of Banxia Xiexin Decoction（BXD） for treating delayed diarrhea caused by irinotecan（CPT－11）in mice，and to investigate the mechanism of compatibility.Methods ICR mice were intraperitoneal injected with CPT－11 40 mg／kg for 4 consecutive to establish models of delayed diarrhea.Totally 90 ICR female mice were randomly assigned to normal group，model group，positive drug group，BXD group，and 5 different compatibility groups，10 cases in each group.The diarrhea models were established as the same above.The normal group was injected with the same amount of normal saline instead of CPT－11，and the positive drug group，BXD group，and different compatibility groups were treated with loperamide hydrochloride every day respectively for 8 days starting 4 days before CPT－11 was injected.The diarrhea index of each group was calculated and their body weight was recorded.Mice were killed on the 8th day after experiments and intestinal tissues were removed for histological studies.Contents of serum IL－15 and β－glucuronidase of intestine were investigated.Results Delayed diarrhea after injected CPT－11 was observed on mice.Compared to model group，the diarrhea index of mice for BXD group，Kuhan group，Xinwen ＋ Kuhan group，and Kuhan ＋ Buyi group were obviously decreased（P＜0.01），the weight loss also had obvious improvements，and the damage degree of intestinal mucosa under light microscope was milder than that in the model group，the content of β－glucuronidase of intestine were significantly decreased（P＜0.01），the levels of serum IL－15 were increased.Conclusion BXD group，Kuhan group，Xinwen ＋ Kuhan group and Kuhan ＋ Buyi group can prevent the delayed diarrhea caused by CPT－11.The results reflected the characteristics of″symptoms caused by cold factors and symptoms caused by heat factors were recuperated at the same time″in Banxia Xiexin Decoction.

irinotecan；delayed diarrhea；Banxia Xiexin Decoction；mechanism of compatibility

R285.5

A

1006－4931(2017)16－0001－05

2017－01－24；

2017－05－24)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.16.001

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目[81274054]；“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)[2012ZX09301002－001－027]。

史家文（1988－），男，山東泰安人，博士研究生，研究方向?yàn)橹兴幩幮镔|(zhì)基礎(chǔ)，（電子信箱）jiawen86712＠163.com。

石鉞（1963－），男，河北張家口人，研究員，博士研究生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幩幮镔|(zhì)基礎(chǔ)及其質(zhì)量控制，（電子信箱）yshi＠implad.ac.cn。