李 媛 施歡賢

陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西 咸陽(yáng) 712046

藥物研究

文冠果殼總多酚的含量測(cè)定

李 媛 施歡賢*

陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西 咸陽(yáng) 712046

目的：測(cè)定文冠果殼中總多酚含量。方法：用紫外分光光度法對(duì)文冠果殼總多酚含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：沒(méi)食子酸標(biāo)品濃度在0.05～0.25mg范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好(R2=0.9998)，回歸方程為：Y=4.184X-0.0008，樣品平均回收率分別為101.3%，穩(wěn)定性RSD為2.50%，重復(fù)性RSD為1.27%，精密度RSD為1.88%。測(cè)得文冠果殼中總多酚含量為2.14mg/g。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)單，穩(wěn)定，可靠，可作為測(cè)定文冠果殼中總多酚的方法。

文冠果殼；總多酚；福林酚法

多酚是一類(lèi)重要的植物次生代謝產(chǎn)物，研究表明多酚類(lèi)化合物擁有抗腫瘤、抗病毒、抑菌、抗氧化等作用，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、日化等領(lǐng)域[1]。文冠果又名文官果、僧燈毛道、溫旦革子、崖木瓜樹(shù)、土木瓜等，為無(wú)患子科(Sapindaceae)植物。主要分布于東北、華北、陜西、甘肅、青海、寧夏等地[2]。研究表明，文冠果殼95%乙醇提取物中含有黃酮類(lèi)、皂苷類(lèi)、苯丙素類(lèi)、多酚類(lèi)等化合物，并具有良好的生物活性[3-6]。然而，關(guān)于文冠果殼中多酚含量的研究尚未見(jiàn)報(bào)道，對(duì)其開(kāi)發(fā)和利用有一定阻礙。目前，多酚含量測(cè)定的方法有很多，包括高錳酸鉀法[7]、酒石酸亞鐵法[8]、Folin-Ciocalteu比色法[9]等，其中Folin-ciocalteu法顯色明顯，操作簡(jiǎn)單，誤差小、回收率高而得到廣泛運(yùn)用。筆者利用 Folin-ciocalteu法對(duì)文冠果殼中總多酚含量進(jìn)行測(cè)定，旨在建立一種快速，準(zhǔn)確的測(cè)定文冠果殼總多酚含量的方法，為文冠果多酚類(lèi)化合物資源的開(kāi)發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 電子天平(上海佑科儀器儀表有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠(chǎng))；UV-2600紫外分光光度計(jì)(日本島津公司)。1.2 材料 沒(méi)食子酸對(duì)照品(批號(hào): 140509，陜西樂(lè)博生化科技有限公司)；Folin -Ciocalteau試劑(批號(hào): P/N F-9252，美國(guó)Sigma公司)；Na2CO3(批號(hào): 20120210，廊坊鵬彩精細(xì)化工有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液制備 精密稱(chēng)取文冠果殼粉末約2.50g，按1:10的料液比加入95%乙醇回流提取3次，每次1h，合并濾液，在轉(zhuǎn)速為10000rpm/min條件下離心10 min，取上層清液，即得。

2.2 對(duì)照品溶液制備 精密稱(chēng)取標(biāo)準(zhǔn)品沒(méi)食子酸6.25mg于25.00mL容量瓶中，95%乙醇溶解并定容至刻度，得終濃度為0.25mg/mL沒(méi)食子標(biāo)準(zhǔn)品溶液，備用。

2.3 線(xiàn)性范圍考察[10]分別精密吸取沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL，加入Folin-Ciocalteau試劑1.50mL，搖勻，再加入6.00mL7.5%的Na2CO3，40℃水浴保溫90min，在波長(zhǎng)766nm處測(cè)定吸光度，結(jié)果制得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)如圖1所示，沒(méi)食子酸對(duì)照品在濃度(x)與吸光度(y)線(xiàn)性回歸方程為Y=4.184X-0.0008，相關(guān)系數(shù)R2=0.9998，沒(méi)食子酸濃度在0.05～0.25 mg/mL區(qū)間內(nèi)與吸光度線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 精密度試驗(yàn) 精密稱(chēng)取沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液0. 50 mL，按“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定吸光度，重復(fù)測(cè)定6次，沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液吸光度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.88%。表明該方法的精密度較良好。2.4.2 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一文冠果殼供試品(文冠果殼)，按“2.1”方法平行制備6份，按“2.3”項(xiàng)下方測(cè)定其吸光度，文冠果殼總多酚吸光度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.27%，說(shuō)明該方法重復(fù)性良好。

2.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量取同一文冠果殼供試品溶液0.5mL，按“2.3”項(xiàng)下方法分別于0、2、4、6、8、10 h測(cè)定吸光度，文冠果總多酚溶液吸光度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為2.50%。說(shuō)明該方法在一定時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定性較好。2.4.4 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱(chēng)取文冠果殼粉末6份，每份約1.25g，按照Folin-Ciocalteu法測(cè)定吸光度，計(jì)算得平均回收率為101.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.96%，說(shuō)明該方法具有較高的準(zhǔn)確性和可靠性。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收率實(shí)驗(yàn) (n=6)

2.5 樣品含量的測(cè)定 吸取0.50mL的文冠果殼供試液，按“2.3”測(cè)定方法測(cè)定吸光度，計(jì)算文冠果殼提取物中總多酚的含量為2.14mg/g。

3 討論

利用Folin-Ciocalteau法測(cè)定了文冠果殼總多酚的含量，測(cè)得文冠果殼總多酚含量2.14 mg/g。該方法簡(jiǎn)單，精密度，重復(fù)性，穩(wěn)定性良好等優(yōu)點(diǎn)。為后期開(kāi)發(fā)和利用文冠果殼多酚類(lèi)成分提供了一定的理論基礎(chǔ)。

[1]陳為鈞,萬(wàn)圣勤.茶葉中多酚類(lèi)物質(zhì)的研究進(jìn)展[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā),1994, 6(3): 74-80.

[2]萬(wàn)國(guó)盛，王曉波，吳立軍，等，文冠果的化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J].中草藥，2013，44(3)：1842-1850.

[3]毛迪銳,姜貴全,張卓睿,等.超聲波輔助提取文冠果殼總黃酮的工藝及其抗氧化性研究[J]. 食品工業(yè)科技,2015,36(19):237-242.

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[5]萬(wàn)國(guó)盛,任宇豪,高慧媛,等.文冠果果殼化學(xué)成分的分離與鑒定[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 2015, 32(1):18-21.

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[8] 丁友昌.分光光度法測(cè)定茶多酚保健品中茶多酚[J].中國(guó)公共衛(wèi)生, 1998,14(9)：62.

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[10]王曉林,鐘方麗,孫威,等.東北鐵線(xiàn)蓮總多酚的超聲提取工藝研究[J].河北科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2012,33(01),32-35.

Determination the Total Polyphenol Content ofXanthocerasSorbifoliaBunge’s Husk

LI Yuan SHI Huanxian*

Shanxi University of traditional Chinese medicine,Xianyang 712046,China

Objective To determine the total polyphenol content(TP) in the husks ofXanthocerassorbifoliaBunge. Methods UV spectrophotometric was used to determine the total polyphenol content ofXanthocerassorbifoliaBunge husks. Results The results showed that TP content of standard samples (counted by gallic acid) was 2.14mg/g .The standard of gallic acid concentration in 0.05～0.25mg/g range and the linear relations were good (R2=0.9998), and the regression equation wasy=4.184x-0.0008. The average recovery rates ofXanthocerassorbifoliaBunge was 101.3%.The stability ofRSDwas 2.50%, the repeatabilityRSDwas 1.27%, and the precisionRSDwas 1.88%.Conclusions The method was simple, accurate and suitable for measuring TP content inXanthocerassorbifoliaBunge husks.

XanthocerassorbifoliaBunge Husk；Total Polyphenol；Folin-ciocalteu

李媛(1991-)，女，漢族，碩士研究生，研究方向?yàn)橹嗅t(yī)外科學(xué)(肛腸病)。E-mail：1182546093@qq.com

施歡賢(1991-)，男，漢族，碩士研究生，研究方向?yàn)橹兴幩巹W(xué)。E-mail：ssshily@163.com

R284.2

A

1007-8517(2017)16-0013-02

2017-06-13 編輯：鄧佳麗)