田紅林 劉兆龍 孫 蕓

(1 新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院藥學(xué)部，烏魯木齊，830000； 2 新疆醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，烏魯木齊，830011)

中藥飲片丹參表里關(guān)聯(lián)的研究

田紅林1劉兆龍1孫 蕓2

(1 新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院藥學(xué)部，烏魯木齊，830000； 2 新疆醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，烏魯木齊，830011)

目的：研究中藥丹參飲片外觀性狀和內(nèi)在成分的相關(guān)性。方法：通過(guò)外觀、色澤、質(zhì)地、大小、氣味等傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別判定飲片質(zhì)量，同時(shí)采用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定飲片中丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量。對(duì)比實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性。結(jié)果：傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別與HPLC測(cè)定結(jié)果對(duì)中藥丹參飲片的判定結(jié)果一致。結(jié)論：傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別方法簡(jiǎn)便、可靠，可用于丹參飲片的質(zhì)量控制。

丹參；傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別；高效液相色譜法；表里關(guān)系

丹參(SalviamiltiorrhizaBge.)是傳統(tǒng)中藥之一,為活血祛瘀、涼血、養(yǎng)血安神的婦科要藥。常用于月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)行困難，產(chǎn)后瘀滯腹痛以及肢體疼痛，心腹刺痛，癥瘕等癥[1]。古人入藥丹參多為野生品，外觀形態(tài)在古典醫(yī)籍均有記載，李時(shí)珍《本草綱目》曰：“處處山中有之，一枝五葉，葉如野蘇而尖，青色，皺皮。小花成穗如蛾形，中有細(xì)子，其根皮丹而肉紫”[2]。

現(xiàn)今丹參的使用以栽培品為主，其主根粗壯，分枝較少，直徑5～15 mm，表面紅褐色，具縱皺，質(zhì)地堅(jiān)實(shí)，折斷面平整，以條粗，色紫紅者為佳[3]。藥典規(guī)定丹參飲片含丹參酮ⅡA不得少于0.20%，丹酚酸B不得少于3.0%[1]。

丹參為臨床重要的常用中藥飲片，醫(yī)院購(gòu)買丹參批次多、批量大，若每批都通過(guò)高效液相色譜法測(cè)定含量，會(huì)使得檢驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng)，影響藥材在臨床中的使用。筆者在醫(yī)院多年從事中藥材鑒定工作，結(jié)合工作經(jīng)驗(yàn)，首先通過(guò)傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別[4]，即性狀鑒別，判定丹參是否合格，然后通過(guò)HPLC考察丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量。通過(guò)對(duì)比2個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別與高效液相色譜法測(cè)定結(jié)果一致。表明傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別方法簡(jiǎn)便、可靠，可廣泛用于日常中藥飲片的驗(yàn)收。由于野生資源不足，本文只討論栽培品。

1材料與方法

1.1 一般材料

1.1.1 儀器 Waters2695高效液相色譜儀(美國(guó)Waters公司)；AG-135電子天平0.01 mg(瑞士)；AL204電子天平0.1 mg(梅特勒-托利多儀器有限公司)；SK3300LH超聲清洗器(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司)；Direct-QTM5超純水儀(MilliPore)；DYQ-188流水式粉碎機(jī)(中國(guó)浙江省瑞安市環(huán)球藥械廠)；KDM型控溫電熱套(山東甄城華魯電熱儀器廠)。

1.1.2 材料 丹參酮ⅡA(批號(hào)：110766-200518)、丹酚酸B(批號(hào)：A0056-12020104)對(duì)照品均由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供；丹參(批號(hào)分別為：(131103-1、131112-1、131120-1、131124-1131129-1、140205-1、140214-1、140302-1、140316-1、140327-1、141010-1、141022-1、141104-1、141128-1、141207-1)由新疆奇康哈博維藥有限公司提供；甲醇、乙腈為色譜純，由美國(guó)Fisher試劑公司提供；其他試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別[5-6]筆者采用傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)分別鑒別15批丹參飲片，通過(guò)丹參飲片表面色澤、質(zhì)地、端面色澤、端面質(zhì)地判斷中藥飲片的質(zhì)量?jī)?yōu)劣[7]。并由新疆維吾爾自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院李延升主任中藥師復(fù)核鑒定結(jié)果。

1.2.2 色譜條件與溶液制備[1]1)丹參酮ⅡA：參照藥典高效液相色譜法(附錄Ⅵ D)測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(75∶25)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270 nm。理論板數(shù)按丹參酮ⅡA峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000。

對(duì)照品溶液的制備：取丹參酮ⅡA對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1 mL含丹參酮ⅡA16 μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備：取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約0.3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

本品含丹參酮ⅡA(C19H18O3)不得少于0.20%。

2)丹酚酸B：參照藥典高效液相色譜法(附錄Ⅵ D)測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為286 nm。理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000。

對(duì)照品溶液的制備：取丹酚酸B對(duì)照品適量，精密稱定，加75%甲醇制成每1 mL含0.14 mg的溶液，即得。

供試品溶液的制備：取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50 mL，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

本品按干燥品計(jì)算，含丹酚酸B(C36H30O16)不得少于3.0%。

1.2.3 方法學(xué)考察[8-11]1)線性關(guān)系考察：依次分別精密量取丹參酮ⅡA、丹酚酸B標(biāo)準(zhǔn)品溶液各0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、3.0 mL置10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，即得系列對(duì)照品溶液。分別進(jìn)樣，記錄色譜圖。2)精密度試驗(yàn)：取同一質(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定。3)穩(wěn)定性試驗(yàn)：精密吸取同一供試品溶液，每2 h進(jìn)樣1次，每次進(jìn)樣10 μL.連續(xù)考察12 h。4)重復(fù)性試驗(yàn)：取樣品，依法制備供試溶液，平行制備5份，測(cè)定。5)回收率試驗(yàn)：精密吸取已知含量的樣品6份，每樣吸取5 mL，分別精密加入丹參酮ⅡA對(duì)照品溶液0.1 mL、丹酚酸B對(duì)照品溶液0.5 mL，依法測(cè)定并計(jì)算回收率。

1.2.4 樣品含量測(cè)定 將上述15批丹參藥材按照《中國(guó)藥典》2010年版一部第70頁(yè)丹參項(xiàng)下含量測(cè)定方法分別測(cè)定了丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量，判斷藥材是否合格。

表1 傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別結(jié)果

2結(jié)果

2.1 傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別

2.1.1 丹參驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn) 1)顏色棕紅色為3分，棕紅色帶黑色2分，桃紅色1分，黑色0分；2)直徑0.2～0.8 cm為3分，0.2～0.4 cm為0分，0.8～1.2 cm為0分；3)斷面顏色類白色2分，斷面白色1分，黑色為0分；4)氣味苦澀味3分，淡苦澀為2分，無(wú)味為0分；5)非藥用部位多為1分。10%以上判為不合格；6)0～6分為不合格，6～10分為合格。非藥用部位過(guò)多為劣藥既為不合格。

2.1.2 依據(jù)丹參驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn) 15批樣品判定其中6批(批號(hào)分別為：131120-1、140214-1、140302-1、140327-1、141022-1、141104-1)為不合格藥材。見(jiàn)表1。

2.2 方法學(xué)考察[12-15]

2.2.1 線性關(guān)系考察 以對(duì)照溶液濃度為橫坐標(biāo)(C，mg/mL)，以峰面積為縱坐標(biāo)(A)作圖，得丹參酮ⅡA、丹酚酸B的回歸方程分別為：Y=1.468 3×10-5X-0.04340(r=0.999 9)；Y=1.323 4×10-7X-0.003175(r=0.999 8)，結(jié)果表明，丹參酮ⅡA在5.2～156 μg、丹酚酸B在28～840 μg、范圍內(nèi)與峰面積均呈良好的線性關(guān)系。

2.2.2 精密度試驗(yàn) 結(jié)果丹參酮ⅡARSD為1.06%(n=5)，丹酚酸BRSD為1.17%(n=5)，表明儀器精密度良好。

2.2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 結(jié)果的丹參酮ⅡARSD為1.79%(n=5)，丹酚酸BRSD為2.01%(n=5)，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.4 重復(fù)性試驗(yàn) 結(jié)果丹參酮ⅡARSD為1.68%(n=5)，丹酚酸BRSD為1.05%(n=5)。表明方法重復(fù)性良好。

2.2.5 回收率試驗(yàn) 結(jié)果測(cè)得的丹參酮ⅡA平均回收率為99.34%，RSD為0.58%(n=6)；丹酚酸B平均回收率為99.79%，RSD為0.66%(n=6)，結(jié)果見(jiàn)表2、表3。

表2 回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

表3 回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

圖1 丹參酮ⅡA、丹酚酸B HPLC色譜圖

注：A.丹參酮ⅡA對(duì)照品,B.丹酚酸B對(duì)照品,C.藥材中丹參酮ⅡA,D.藥材中丹酚酸B;1丹參酮ⅡA,2丹酚酸B

2.3 樣品含量測(cè)定 將上述15批丹參藥材分別測(cè)定丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量，按照藥典規(guī)定，丹參酮ⅡA不得少于0.20%，丹酚酸B不得少于3.0%，判斷藥材是否合格，結(jié)果5批(批號(hào)分別為：131120-1、140214-1、140327-1、141022-1、141104-1)不合格。結(jié)果見(jiàn)表4。含量測(cè)定結(jié)果顯示，有5批不合格的丹參均為丹參酮ⅡA的含量較低，不符合《中國(guó)藥典》規(guī)定，與傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別判定不合格的批次及數(shù)量吻合。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別的可靠性、準(zhǔn)確性高，可以用于日常中藥飲片的驗(yàn)收。

表4 HPLC法測(cè)定丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量結(jié)果

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2.4.1 將高效液相色譜法測(cè)定結(jié)果與傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別結(jié)果的數(shù)據(jù)交易比對(duì)，并采用響應(yīng)面統(tǒng)計(jì)學(xué)公式進(jìn)行含量方程的擬合，得到以下結(jié)果。見(jiàn)表5。

表5 2種鑒別方法的統(tǒng)計(jì)

注：χ2=15.00，P=0.001

2.4.2 利用經(jīng)驗(yàn)擬合丹參酮含量方程

Y=-0.186 6+0.0525*顏色+0.0276*直徑+0.0596 2*斷面顏色+0.117 25*非藥用部位

R2=0.820 881R2s=0.749 234F=11.457 2P=0.0009

2.4.3 丹酚酸B含量預(yù)測(cè)定方程

Y=9.558 7-0.927 4*顏色-0.61480*直徑-1.0871 2*斷面顏色+(顏色-2.266 7)*[(直徑-2.4)*0.906 77]

R2=0.906 296R2S=0.868 814F=24.179 8P=0.0001

結(jié)果顯示，傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別與現(xiàn)代儀器鑒別有較好的相關(guān)性。

3討論

丹參外表顏色主要為棕紅色，有的略帶黑色，斷面角質(zhì)樣。若斷面出現(xiàn)黑色，說(shuō)明丹參未熏過(guò)硫磺。外表顏色為淡的紅棕色，則說(shuō)明飲片大部分經(jīng)過(guò)硫磺熏蒸。丹參飲片的粗細(xì)主要是影響丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量。丹參直徑較粗則丹酚酸B含量符合藥典規(guī)定，丹參酮ⅡA含量不符合規(guī)定。反之，丹參較細(xì)則丹參酮ⅡA符合藥典規(guī)定。因此，丹參飲片批號(hào)為131120-1、140214-1、140327-1、141022-1、141104-1131120-1、140214-1的直徑較粗，丹酚酸B含量符合藥典規(guī)定，丹參酮ⅡA含量不符合規(guī)定。批號(hào)140302-1丹參直徑較小，丹參酮ⅡA符合藥典要求。

本實(shí)驗(yàn)采用傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別和HPLC含量測(cè)定，2種方法比較了15個(gè)批次丹參飲片的質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別和HPLC含量測(cè)定在判定中藥材質(zhì)量方面存在表里關(guān)系。雖然目前有很多研究單位已經(jīng)開(kāi)始使用電子鼻、電子眼、電子舌來(lái)研究中藥材及飲片性狀和內(nèi)在品質(zhì)的相關(guān)性[4]，但是由于中藥材及飲片來(lái)源為礦物藥、植物藥、動(dòng)物藥，使用電子設(shè)備考察中藥材質(zhì)量也在摸索之中，而且設(shè)備價(jià)格昂貴，容易損壞。

對(duì)于全國(guó)各級(jí)醫(yī)療單位來(lái)說(shuō)，尤其是相對(duì)偏遠(yuǎn)的縣級(jí)醫(yī)療單位，由于各種原因使用現(xiàn)代儀器檢驗(yàn)中藥飲片較為困難，故而多采用傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別來(lái)驗(yàn)收中藥飲片。因此傳統(tǒng)中藥材鑒別就顯得更加實(shí)用，傳承傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別就顯的更為迫切。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別方法可靠、快速簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確性高，可以用于日常中藥飲片的驗(yàn)收。

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(2016-09-06收稿 責(zé)任編輯：徐穎)

第三屆中非中醫(yī)藥國(guó)際合作與發(fā)展論壇第二輪會(huì)議通知(2017埃及·開(kāi)羅)

為貫徹落實(shí)《中醫(yī)藥“一帶一路”發(fā)展規(guī)劃(2016-2020年)》要求，促進(jìn)在“一帶一路”沿線國(guó)家的中醫(yī)藥海外中心建設(shè)、中醫(yī)藥國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)可、中藥產(chǎn)品注冊(cè)以及中醫(yī)藥對(duì)外交流合作示范基地的建設(shè)，整合中醫(yī)藥國(guó)際合作資源，構(gòu)建中醫(yī)藥國(guó)際合作平臺(tái)，世界中醫(yī)藥學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)決定在埃及首都開(kāi)羅舉辦“第三屆中非中醫(yī)藥國(guó)際合作與發(fā)展論壇”。論壇期間國(guó)內(nèi)外學(xué)者、埃及以及周邊國(guó)家的醫(yī)藥衛(wèi)生行業(yè)主管部門及企業(yè)代表將進(jìn)行學(xué)術(shù)研討、技術(shù)交流合作及商業(yè)對(duì)接。

現(xiàn)將會(huì)議有關(guān)事項(xiàng)通知如下：

一、大會(huì)主題：推動(dòng)中醫(yī)藥交流合作 服務(wù)非洲人民健康

二、主辦單位：世界中醫(yī)藥學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)

承辦單位：北京東方恒信國(guó)際交流有限公司

三、會(huì)議時(shí)間：2017年11月10日-16日，11月9日?qǐng)?bào)到。

四、會(huì)議地點(diǎn)：埃及·開(kāi)羅

五、論壇內(nèi)容：

(一)學(xué)術(shù)及商業(yè)研討

1、中醫(yī)中藥在埃及以及周邊國(guó)家的現(xiàn)狀與未來(lái)；

2、埃及以及周邊國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理部門醫(yī)藥(包括植物藥等)進(jìn)口的相關(guān)政策、法規(guī)，所在國(guó)家對(duì)接企業(yè)、機(jī)構(gòu)以及相關(guān)商業(yè)程序；

3、埃及以及周邊國(guó)家醫(yī)療行業(yè)的執(zhí)業(yè)要求及進(jìn)口藥品市場(chǎng)銷售業(yè)的要求與規(guī)定；

4、埃及以及周邊國(guó)家使用中藥(中藥飲片、植物提取物、中成藥)的情況、藥品來(lái)源以及主要進(jìn)口商；

5、中國(guó)中醫(yī)藥相關(guān)廠商在埃及以及周邊國(guó)家開(kāi)設(shè)分廠、進(jìn)行二次加工或成品分裝上市的可能性及對(duì)策。

(二)實(shí)地考察與座談

1、考察埃及的醫(yī)藥大學(xué)和制藥企業(yè)；

2、考察埃及中醫(yī)診所及私立醫(yī)院；

3、與埃及以及周邊國(guó)家的經(jīng)銷商、投資商以及有合作意向的企業(yè)座談并商業(yè)洽談。

六、報(bào)名方式

(一)網(wǎng)絡(luò)報(bào)名

登陸網(wǎng)站(http://tcmforum.medmeeting.org/cn)，在個(gè)人代表注冊(cè)專區(qū)中報(bào)名，一次性繳納全部參會(huì)費(fèi)用。

(二)線下報(bào)名

電話報(bào)名，并通過(guò)以下賬戶匯款繳納全部參會(huì)費(fèi)用。

賬戶名：世界中醫(yī)藥學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)

賬號(hào)：110060971018002604480117

開(kāi)戶行：交通銀行北京育惠東路支行

特別提示：請(qǐng)準(zhǔn)確填寫或來(lái)電說(shuō)明住宿要求，單位名稱及相關(guān)信息務(wù)請(qǐng)準(zhǔn)確，以便開(kāi)具發(fā)票。線下匯款者請(qǐng)注明：參會(huì)者姓名+中非論壇。

網(wǎng)絡(luò)報(bào)名截止日期：2017年10月10日12:00。

參會(huì)者須在2017年11月7日統(tǒng)一在北京報(bào)到，報(bào)到時(shí)務(wù)請(qǐng)攜帶報(bào)名表、護(hù)照、身份證。特殊情況請(qǐng)?zhí)崆奥?lián)系說(shuō)明。

七、參會(huì)費(fèi)用

共計(jì)26000元人民幣。費(fèi)用包括：會(huì)議費(fèi)、往返機(jī)票，簽證費(fèi)、地接費(fèi)、英文助理、車費(fèi)、食宿費(fèi)。9月15日前繳費(fèi)：個(gè)人優(yōu)惠500元人民幣；團(tuán)體(10人及以上)每人優(yōu)惠1000元人民幣。

簽證未通過(guò)者退還全部團(tuán)費(fèi)(簽證費(fèi)除外)。簽證已辦妥，因個(gè)人原因不能參加會(huì)議者，團(tuán)費(fèi)退還百分之三十。如需換乘商務(wù)艙或入住酒店單房，須提前告知并支付相應(yīng)差價(jià)。

八、聯(lián)系方式

辦公室電話：+86 10 58239055

張老師：+86 13811425951，魏老師：+86 13621390426

世界中醫(yī)藥學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)

2017年8月1日

ResearchonExteriorPropertiesandContentCorrelationofSalviaeMiltiorrhiza

Tian Honglin1, Liu Zhaolong1, Sun Yun2

(1DepartmentofPharmacy,theSixthHospitalAffiliatedtoXinjiangMedicalUniversity,Urumqi830000,China; 2SchoolofTraditionalChineseMedicine,XinjiangMedicalUniversity,Urumqi830011,China)

Objective:To observe the correlation between properties and tastes of Salviae Miltiorrhiza(Dan shen) and its contents.Methods:To identify the quality of Chinese herbs from its shape, color, texture, size and taste as well as the content of tanshitone IIA and salvianolic B by HPLC. Then compare the results.Results:The two results of assessment conform to each other.Conclusion:Traditional ways in identifying herbs are reliable and convenient.

Salviae Miltiorrhiza; Traditional identifying ways; HPLC; Correlation between interior and exterior

R284

：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2017.09.051

新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院院級(jí)課題(ZYY201311)；全國(guó)中藥特色技術(shù)傳承人才培訓(xùn)項(xiàng)目(2014)

田紅林(1976.03—)，男，本科，副主任藥師，主要從事中藥民族藥研究開(kāi)發(fā)，E-mail:547626727@qq.com

孫蕓(1976.12—)，女，碩士，副教授，研究方向：中藥民族藥創(chuàng)新與研發(fā)，Tel：(0991)4366567，E-mail:sunyun330@163.com