楊佳

·臨床經(jīng)驗(yàn)·

化學(xué)發(fā)光微粒免疫分析法檢測(cè)高敏心肌肌鈣蛋白的分析性能評(píng)價(jià)

楊佳

目的：用化學(xué)發(fā)光微粒免疫分析(CMIA)法測(cè)定血清或血漿高敏肌鈣蛋白(hsTnI)，從而了解其檢測(cè)性能。方法：用雅培公司的ARCHITECT系統(tǒng)i2000SR化學(xué)發(fā)光分析儀,使用配套的試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，參照SOP文件對(duì)該方法的精密度、準(zhǔn)確度、線性、攜帶污染率、靈敏度進(jìn)行評(píng)價(jià)，并驗(yàn)證參考值區(qū)間。結(jié)果：(1)CMIA法測(cè)定hsTnI的批內(nèi)和批間精密度，雙水平的CV值均小于規(guī)定的范圍,即批內(nèi)、批間精密度的CV值均小于7.5%。(2) hsTnI的準(zhǔn)確度測(cè)定值與靶值的偏倚在0.25%～6.31%之間,均低于EQA允許誤差的30%。(3) hsTnI線性范圍0.0-50000.0 pg/mL。(4)攜帶污染率實(shí)驗(yàn)中，hsTnI表現(xiàn)出良好的抗污染能力。(5)ARCHITECT系統(tǒng)i2000SR化學(xué)發(fā)光儀對(duì)hsTnI檢測(cè)的分析靈敏度(最低檢測(cè)限)均在廠家提供的范圍之內(nèi)；hsTnI的參考值區(qū)間的驗(yàn)證，男女均符合廠家提供的參考范圍。結(jié)論：CMIA法測(cè)定hsTnI的結(jié)果評(píng)價(jià)其精密度和準(zhǔn)確度、線性、攜帶污染率、靈敏度，均表現(xiàn)出良好的性能結(jié)果，滿足臨床要求。

高敏肌鈣蛋白； 分析性能評(píng)價(jià)； 化學(xué)發(fā)光微粒免疫分析法

雅培ARCHITECT系統(tǒng)i2000SR是基于化學(xué)發(fā)光微粒免疫分析(CMIA)檢測(cè)技術(shù)的全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)，成功地將磁性粒應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析中，在對(duì)心肌損傷標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)中，尤其是對(duì)特異性指標(biāo)肌鈣蛋白I(TnI)的應(yīng)用，得到了臨床的廣泛認(rèn)可[1]。隨著科技和檢測(cè)水平的發(fā)展以及IFCC對(duì)TnI高靈敏度的新要求[2]，有著第99百分位值總精密度CV≤10%和能在≥50%健康人中檢測(cè)出低于第99百分位值的高敏肌鈣蛋白(hsTnI)檢測(cè)法應(yīng)運(yùn)而生[3]。hsTnI憑借其高一個(gè)數(shù)量級(jí)的靈敏度更有助于急性冠脈綜合征(ACS)患者的病情評(píng)估、預(yù)測(cè)ACS患者的心血管事件風(fēng)險(xiǎn)[4-5]和不穩(wěn)定型心絞痛和非ST段抬高性心?；颊叩闹委煕Q策依據(jù)[6]。本研究通過采用CMIA法測(cè)定hsTnI，驗(yàn)證各項(xiàng)性能指標(biāo)，從而保證為臨床提供可靠的檢測(cè)數(shù)據(jù)，更好的服務(wù)臨床。

1 材料與方法

1.1 材料 雅培ARCHITECT系統(tǒng)i2000SR化學(xué)發(fā)光儀,配套試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

1.2 方法

1.2.2 準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn) 用校準(zhǔn)品評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng),校準(zhǔn)品批號(hào)為hsTnI(453828)。同時(shí)測(cè)定各項(xiàng)目4個(gè)水平校準(zhǔn)品2次,取均值，對(duì)各自檢測(cè)結(jié)果與靶值進(jìn)行比較,計(jì)算檢測(cè)值與靶值的相對(duì)偏倚(%)。計(jì)算公式:Bias=(測(cè)定值-靶值)/靶值×100%[7]。

1.2.3 驗(yàn)證線性范圍評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn) 按照NCCLS EP6 - A2[8]文件,選擇hsTnI的低濃度(L)和高濃度(H)患者標(biāo)本各一份,濃度盡可能覆蓋儀器自身給定的線性范圍。將H和L濃度標(biāo)本，按5L，4L+1H，3L+2H，2L+3H，1L+4H，5H的比例配制成6個(gè)濃度的系列血清,將實(shí)測(cè)值與預(yù)期值作比較，得到回收率。并通過計(jì)算回歸方程Y=ax+b和相關(guān)系數(shù)r來判斷其線性。

1.2.4 攜帶污染率的評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn) 連續(xù)測(cè)定3份相同的高濃度標(biāo)本(H1，H2，H3)，然后再連續(xù)測(cè)定3份低濃度標(biāo)本(L1，L2，L3),按公式計(jì)算攜帶污染率。攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L1)×100%。

1.2.5 靈敏度評(píng)價(jià)和參考區(qū)間驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 取10份各自項(xiàng)目校準(zhǔn)液的空白液連續(xù)測(cè)定10次,取其均值,以均值±2s為檢測(cè)項(xiàng)目的靈敏度。選取來我院體檢人群男女各20例，查閱體檢報(bào)告既往身體健康無(wú)心血管疾病，測(cè)定hsTnI值。

2 結(jié)果

2.1 hsTnl 2個(gè)質(zhì)控水平精密度評(píng)價(jià) 見表1。

表1 hsTnI 2個(gè)質(zhì)控水平精密度評(píng)價(jià)結(jié)果

2.2 hsTnl 4個(gè)水平準(zhǔn)確度評(píng)價(jià) 見表2。

表2 hsTnI 4個(gè)水平準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)結(jié)果

2.3 hsTnl分析測(cè)量線性范圍評(píng)價(jià) 見表3。

表3 hsTnI分析測(cè)量線性評(píng)價(jià)回收結(jié)果

2.4 攜帶污染率評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 hsTnI攜帶污染率%=0.01%

2.5 靈敏度及其他方法學(xué)項(xiàng)目 見表4。

表4 靈敏度及其他方法學(xué)項(xiàng)目驗(yàn)證結(jié)果

注：參考區(qū)間驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中正常男女hsTnI測(cè)定值均在廠家提供的參考區(qū)間內(nèi)。

3 討論

hsTnI是雅培公司近幾年研發(fā)投入臨床使用的替代原有TnI測(cè)定的高敏檢測(cè)方法。雖然它有著更廣闊的臨床應(yīng)用前景，但由于其投入臨床使用時(shí)間尚短，我們對(duì)它的檢測(cè)方法學(xué)性能臨床cut-off值判斷也在實(shí)踐摸索之中,由此開展了本次研究對(duì)hsTnI的性能指標(biāo)進(jìn)行了驗(yàn)證分析。我們測(cè)定hsTnI高、低水平質(zhì)控品的批內(nèi)和批間精密度的CV值均小于規(guī)定的范圍。準(zhǔn)確度低于衛(wèi)生部EQA允許誤差即30%,準(zhǔn)確度可被確認(rèn)。線性范圍評(píng)價(jià)及回收結(jié)果表明，驗(yàn)證結(jié)果與廠家提供的線性范圍相一致，線性范圍寬，線性好。在分析靈敏度、參考區(qū)間驗(yàn)證的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中，我們?nèi)〉昧朔仙a(chǎn)廠家提供的分析靈敏度(最低檢測(cè)限)、參考區(qū)間的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

綜上所述,我們對(duì)雅培ARCHITECT i2000化學(xué)發(fā)光分析儀就hsTnI的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍、攜帶污染率、分析靈敏度(最低檢測(cè)限)和參考區(qū)間進(jìn)行了性能驗(yàn)證,各項(xiàng)性能參數(shù)均取得優(yōu)良結(jié)果。心肌損傷標(biāo)志物hsTnI的檢測(cè)影響著臨床醫(yī)生對(duì)病程的判斷判斷，進(jìn)而影響正確和及時(shí)診療方案。CMIA法檢測(cè)hsTnI在實(shí)驗(yàn)室的推廣應(yīng)用保證了為臨床提供準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)，由于其高靈敏的特點(diǎn)，必將隨著臨床應(yīng)用及cut-off值的摸索，為廣大臨床醫(yī)生提供更好的服務(wù)。

[1] THYGESEN K,ALPERT JS,JAFFE AS,et al.On behalf of the joint ESC/ACCF/AHA/WHF Task Force for the Universal Definition of Myocardial Infacrction.Third universal definition of myocardial infarction[J].J Am Coll Cardiol，2012，60:1581-1598.

[2] APPLE FS,COLLINSON PO.IFCC Task Force on Clinical Applications of Cardiac Biomarkers.Analytical characteristics of high-sensitivity cardiac troponin assays[J].Clin Chem,2012,58(1):54-61.

[3] APPLE FS,LER R,MURAKAMI MM.Determination of 19 cardiac troponin I and T assay 99th percentile values from a common presumably healthy population[J] .Clin Chem,2012,58(11):1574-1581.

[4] HAMM CW,BRAUNWALD E.A Classification of Unstable Angina Revisited[J].Circulation,2000,102(1):118-122.

[5] MILLS NL,CHURCHHOUSE AM,LEE KK,et al.Implementation of a Sensitive Troponin I Assay and Risk of Recurrent Myocardial Infarction and Death in Patients With Suspected Acute Coronary Syndrome[J].JAMA,2011,305(12):1210-1216.

[6] HAMM CW,BASSAND JP,AGEWALL S,et al.ESC guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST segment elevation: The Task Force for the management of acute coronary syndromes (ACS) in patients presenting without persistent ST segment elevation of the European Society of Cardiology (ESC) [J].Eur Heart J，2011，32(23):2999-3054.

[7] 張莉,吳炯,郭瑋,等.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)用前的性能評(píng)價(jià)[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2006,21(6):560-563.

[8] CLSI.EP6-A2 evaluation of the linearity of quantative analyticalmethods[S].Wayne,PA:CLSI,2003,1-47.

R 446.6

A

1008-7044(2017)05-0563-02

2016-11-08)

四川省人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，四川 成都 610072

楊佳(1981-)，男，副主任技師，大學(xué)。

10.14126/j.cnki.1008-7044.2017.05.024