徐添天， 謝瑞玉

2016年安徽省滁州市第一人民醫(yī)院臨床分離菌耐藥性監(jiān)測

徐添天， 謝瑞玉

目的了解2016年滁州市第一人民醫(yī)院常見臨床分離菌的分布及耐藥情況。方法各類臨床分離菌采用MicroScan WalkAway 96 PLUS進(jìn)行鑒定和藥敏試驗，采用WHONET5.6軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果2016年共分離病原菌1 441株，其中革蘭陽性菌409株，占28.4%； 革蘭陰性菌1 032株，占71.6%。葡萄球菌中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的檢出率分別為37.5%和83.0%。葡萄球菌中未見對萬古霉素、達(dá)托霉素和利奈唑胺耐藥的菌株。腸球菌中屎腸球菌對達(dá)托霉素、萬古霉素和利奈唑胺全敏感，檢出1株耐利奈唑胺糞腸球菌，檢出率為2.6%。肺炎鏈球菌主要來源于兒科，對青霉素全敏感。大腸埃希菌、克雷伯菌屬（肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌）和奇異變形桿菌產(chǎn)ESBL的檢出率分別為49.1%、24.2%和62.5%， 產(chǎn)ESBL株對監(jiān)測藥物的耐藥率均高于非產(chǎn)ESBL株。銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率均為10.4%。不動桿菌屬（鮑曼不動桿菌占95.0%）對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為79.0%和78.2%。結(jié)論2016年該醫(yī)院分離的革蘭陰性桿菌耐藥情況嚴(yán)重，肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類抗菌藥物的耐藥率呈上升趨勢，應(yīng)引起重視。

細(xì)菌耐藥性； 耐甲氧西林葡萄球菌； 超廣譜β內(nèi)酰胺酶

Abstract: ObjectiveTo investigate the distribution and antimicrobial resistance profile of the bacterial strains isolated from Chuzhou First People’s Hospital in 2016.MethodsThe bacterial isolates were identi fi ed and tested for antibiotic susceptibility using MicroScan WalkAway 96 PLUS bacterial identi fi cation system. All the data were analyzed with WHONET 5.6 software.ResultsA total of 1 441 clinical isolates were collected during 2016, of which gram-positive organisms accounted for 28.4% and gram-negative organisms 71.6%. Prevalence of methicillin-resistant strains inS. aureus(MRSA) and coagulase negativeStaphylococcus(MRCNS)was 37.5% and 83.0%, respectively. AllStaphylococcusisolates were susceptible to vancomycin, daptomycin and linezolid. AllE. faeciumisolates were susceptible to daptomycin, vancomycin and linezolid. One strain (2.6%) ofE. faecaliswas resistant to linezolid. AllStreptococcus pneumoniaestrains (mainly isolated from children) were susceptible to penicillin. The prevalence of extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) positive strains was 49.1%, 24.2% and 62.5% inE. coli, Klebsiella(K. pneumoniaeandK. oxytoca) andP. mirabilis, respectively. The resistance rate of ESBLs-positive strains was higher than ESBLs-negative strains to most antibiotics. The percentage of theP. aeruginosaisolates resistant to meropenem and imipenem was all 10.4%. The percentage ofAcinetobacter(A. baumanniiaccounted for 95.0%) strains resistant to imipenem and meropenem was 79.0% and 78.2%.ConclusionsThe situation of antibiotic resistance is still very serious in 2016 in this hospital. The prevalence of carbapenemresistantK. pneumoniaeandA. baumanniiis still increasing,which is of great concern.

Key words:antimicrobial resistance; methicillin-resistantStaphylococcus; extended-spectrum beta-lactamase

隨著廣譜抗菌藥物在臨床上的大量使用以及不合理使用，導(dǎo)致細(xì)菌的耐藥性日趨嚴(yán)峻，多重耐藥（MDR）和廣泛耐藥（XDR）株日益增多，尤其是碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌（CRE）檢出率的增加，這些已成為全球關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。為此，現(xiàn)對我院2016年臨床分離菌的分布及耐藥性進(jìn)行統(tǒng)計分析，報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1菌株來源 收集本院2016年1月1日－12月31日臨床標(biāo)本分離株，剔除同一患者同一部位的重復(fù)菌株，共分離病原菌1 441株。

1.1.2藥敏紙片和培養(yǎng)基 藥敏試驗用的Mueller-Hinton（MH）瓊脂購自法國生物梅里埃公司，補(bǔ)充藥物紙片購自英國OXOID公司。

1.1.3質(zhì)控菌株 質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923、糞腸球菌ATCC29212、大腸埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603和銅綠假單胞菌ATCC27853，均購自衛(wèi)生部臨床檢驗中心。

1.2 方法

1.2.1菌株鑒定及藥敏試驗 所有臨床分離菌株的鑒定和藥敏試驗均使用德國西門子公司的MicroScan WalkAway 96 PLUS全自動細(xì)菌鑒定儀及配套的NC50和PC33檢測卡進(jìn)行。補(bǔ)充藥敏試驗（頭孢唑林、頭孢曲松和厄他培南）采用紙片擴(kuò)散法。藥敏試驗結(jié)果根據(jù)CLSI 2015標(biāo)準(zhǔn)判斷[1]。

1.2.2耐甲氧西林葡萄球菌和產(chǎn)ESBL株的檢測 應(yīng)用MicroScan WalkAway 96 PLUS全自動細(xì)菌鑒定儀根據(jù)藥敏結(jié)果自動判斷耐甲氧西林葡萄球菌和產(chǎn)ESBL菌。

1.2.3MDR、XDR和CRE MDR是指對3類或3類以上的抗菌藥物耐藥；XDR指對所測的抗菌藥物均耐藥；CRE定義為對亞胺培南、美羅培南或多尼培南中任一種藥物耐藥者。

1.2.4統(tǒng)計分析 使用WHONET5.6軟件對菌株分布和藥敏結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌及其分布

2016年共收集臨床非重復(fù)分離株1 441株，其中革蘭陽性菌409株，占28.4%，革蘭陰性菌1 032株，占71.6%；住院患者分離株占98.2%，門診患者分離株占1.8%；菌株主要來源于痰液等呼吸道標(biāo)本、尿液、分泌物和血液，分別占50.9%（733株）、16.4%（236株）、10.8%（156株）和8.3%（119株）。痰液等呼吸道標(biāo)本中分離菌主要為肺炎克雷伯菌175株（23.9%）、銅綠假單胞菌116株（15.8%）、金黃色葡萄球菌110株（15.0%）、鮑曼不動桿菌97株（13.2%）和大腸埃希菌87株（11.9%）；尿液標(biāo)本中的分離菌主要為大腸埃希菌132株（55.9%）、屎腸球菌23株（9.7%）、糞腸球菌17株（7.2%）、肺炎克雷伯菌14株（5.9%）和凝固酶陰性葡萄球菌8株（3.4%）；分泌物標(biāo)本中的分離菌主要為大腸埃希菌32株（20.5%）、金黃色葡萄球菌30株（19.2%）、凝固酶陰性葡萄球菌21株（13.5%）、肺炎克雷伯菌14株（9.0%）和糞腸球菌14株（9.0%）；血液標(biāo)本中分離菌主要為凝固酶陰性葡萄球菌47株（39.5%）、大腸埃希菌20株（16.8%）、金黃色葡萄球菌10株（8.4%）、肺炎克雷伯菌5株（4.2%）和糞腸球菌5株（4.2%）。主要菌株分布見表1。

2.2 主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥率

2.2.1葡萄球菌屬 金黃色葡萄球菌中MRSA的檢出率為37.5%，凝固酶陰性葡萄球菌中MRCNS的檢出率為83.0%。葡萄球菌屬細(xì)菌對達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬古霉素全敏感。見表2。

2.2.2腸球菌屬 74株腸球菌屬細(xì)菌中糞腸球菌39株，占52.7%；屎腸球菌29株，占39.2%；其他腸球菌6株，占8.1%。糞腸球菌對萬古霉素和達(dá)托霉素全敏感，檢出1株耐利奈唑胺糞腸球菌，耐藥率為2.6%；屎腸球菌對萬古霉素、利奈唑胺和達(dá)托霉素全敏感。見表3。

2.2.3 肺炎鏈球菌 共分離20株肺炎鏈球菌，全部對青霉素敏感，對紅霉素和克林霉素的耐藥率達(dá)95%，對甲氧芐啶-磺胺甲唑的耐藥率為85%。見表4。

2.3 主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥率

2.3.1腸桿菌科細(xì)菌 大腸埃希菌、克雷伯菌屬（肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌）和奇異變形桿菌產(chǎn)ESBL的檢出率分別為49.1%（157/320株）、24.2%（58/240株）和62.5%（30/48株）。產(chǎn)ESBL株對青霉素類、頭孢菌素類、喹諾酮類、氨基糖苷類等抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBL株。大腸埃希菌對阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦和碳青霉烯類的敏感率均＞95%；克雷伯菌屬對阿米卡星和碳青霉烯類的敏感率均＞80%；腸桿菌屬細(xì)菌對氨基糖苷類和碳青霉烯類的敏感率均＞ 90%；變形桿菌屬細(xì)菌對哌拉西林-他唑巴坦和碳青霉烯類全敏感，對阿米卡星、頭孢他啶和頭孢西丁的敏感率也均＞90%。見表5。

表1 2016年臨床分離菌株的分布Table 1 Distribution of bacterial isolates in 2016

2.3.2不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌 134株銅綠假單胞菌對阿米卡星和妥布霉素耐藥率分別為3.7%和5.2%，對亞胺培南和美羅培南的耐藥率均為10.4%。119株不動桿菌屬細(xì)菌對氨基糖苷類抗生素的耐藥率均＜45%，對其余監(jiān)測抗菌藥物的耐藥率均＞70%。嗜麥芽窄食單胞菌對甲氧芐啶-磺胺甲唑和米諾環(huán)素100%敏感。銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌中MDR株檢出率分別為14.2%和83.2%。不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌的藥敏結(jié)果見表6。

2.3.3CRE菌株的分布和藥敏結(jié)果 本次監(jiān)測中共檢出CRE 60株，檢出率為8.2%（60/729），其中肺炎克雷伯菌占73.3%（44/60）、大腸埃希菌占8.3%（5/60）、黏質(zhì)沙雷菌6.7%（4/60）、雷氏普羅威登斯菌5.0%（3/60）、陰溝腸桿菌3.3%（2/60）、產(chǎn)氣腸桿菌3.3%（2/60）；標(biāo)本類型主要為痰液標(biāo)本、尿標(biāo)本、切口分泌物，分別占83.3%（50/60）、13.3%（8/60）、3.3%（2/60）；科室主要分布于ICU、呼吸科、神經(jīng)外科，分別占45.0%（27/60）、28.3%（17/60）、8.3%（5/60）；患者年齡均大于 60 歲。60株CRE對阿米卡星、慶大霉素和妥布霉素的敏感率分別為41.7%、28.3%和31.7%，對甲氧芐啶-磺胺甲唑的敏感率為75.0%，對四環(huán)素的敏感率為56.7%，對喹諾酮類抗菌藥物全耐藥。

表2 葡萄球菌屬細(xì)菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Susceptibility ofStaphylococcusstrains to antimicrobial agents（%）

表3 腸球菌屬細(xì)菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 3 Susceptibility ofEnterococcusisolates to antimicrobial agents（%）

表4 肺炎鏈球菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 4 Susceptibility ofS. pneumoniaeto antimicrobial agents（%）

3 討論

本次監(jiān)測結(jié)果顯示，2016年我院共分離出非重復(fù)菌株1 441株，與本院2015年1 499株相比[2]，臨床總分離菌株數(shù)略有下降。從細(xì)菌的分布看，2016年細(xì)菌分離前5位的分別是大腸埃希菌、克雷伯菌屬、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和不動桿菌屬，與2015年CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測網(wǎng)略有不同[3]，CHINET前5位細(xì)菌是大腸埃希菌、克雷伯菌屬、不動桿菌屬、金黃色葡萄球菌和腸球菌屬。

本次分離葡萄球菌中MRSA和MRCNS的檢出率分別為37.5%和83.0%， MRSA的檢出率低于2015年CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測網(wǎng)的42.2%和上海市細(xì)菌耐藥性監(jiān)測的46.9%[3-4]；統(tǒng)計顯示，MRSA對監(jiān)測藥物的耐藥率明顯高于MSSA，葡萄球菌屬細(xì)菌對達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬古霉素全敏感。腸球菌屬中以糞腸球菌和屎腸球菌為主，其中糞腸球菌的分離率高于屎腸球菌，與2015年本院相比，糞腸球菌的分離率有所增加，屎腸球菌對常用抗菌藥物的耐藥率明顯高于糞腸球菌，檢出1株耐利奈唑胺的糞腸球菌。本院2016年檢出的肺炎鏈球菌對青霉素全敏感。

腸桿菌科細(xì)菌中，大腸埃希菌和克雷伯菌屬（肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌）產(chǎn)ESBL的檢出率分別為49.1%和24.2%，與2015年本院相比有所下降，奇異變形桿菌產(chǎn)ESBL的檢出率為62.5%，有所上升。本次監(jiān)測結(jié)果顯示，腸桿菌科細(xì)菌對碳青霉烯類敏感性較好，但CRE的檢出率為8.2%，其中肺炎克雷伯菌耐藥株檢出率為19.3%（44/228），大腸埃希菌耐藥株檢出率為1.6%（5/320），腸桿菌科細(xì)菌耐藥株檢出率為5.3%（4/75），標(biāo)本以呼吸道標(biāo)本為主，科室以ICU和呼吸科為主，可能存在耐藥克隆株的傳播，需進(jìn)行嚴(yán)密監(jiān)測。本院CRE的檢出率低于2015年CHINET的數(shù)據(jù)，但仍相對較高。由于CRE菌株，尤其是耐碳青霉烯類的肺炎克雷伯菌，檢出率呈現(xiàn)逐年增加的趨勢，給臨床治療帶來了極大困難。大量研究表明，CRE菌株對多種抗菌藥物高度耐藥，本結(jié)果顯示，CRE對多數(shù)抗菌藥物高度耐藥，對甲氧芐啶-磺胺甲唑和四環(huán)素的耐藥率為25.0%和43.3%，對其余抗菌藥物的耐藥率均較高。多黏菌素對CRE有效，但有報道隨著治療的進(jìn)展可能出現(xiàn)對多黏菌素的繼發(fā)性耐藥[5-6]。為了有效控制CRE的傳播，應(yīng)該加強(qiáng)醫(yī)護(hù)人員手衛(wèi)生、加強(qiáng)接觸隔離制度、加強(qiáng)環(huán)境表面的消毒，同時對重點科室（比如ICU）的患者進(jìn)行主動篩查，必要時可以通過分子檢測了解傳播途徑，為阻斷

其傳播提供依據(jù)。

表5 腸桿菌科細(xì)菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 5 Susceptibility ofEnterobacteriaceaespecies to antimicrobial agents（%）

表6 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 6 Susceptibility of non-fermentative gram-negative bacilli to antimicrobial agents（%）

本次監(jiān)測結(jié)果顯示，銅綠假單胞菌與過去2年相比[2，7]，對妥布霉素的耐藥率大幅下降，耐藥率僅為5.2%；其次對亞胺培南和美羅培南的耐藥率也有所下降，耐藥率均為10.4%；對其余監(jiān)測抗菌藥物的耐藥率也都有所下降；但隨著抗菌藥物的使用，該菌對抗菌藥物的耐藥性會很快發(fā)生變化，臨床治療該菌感染時要密切注意。不動桿菌屬細(xì)菌對常用抗菌藥物的耐藥率較高，對妥布霉素、阿米卡星和慶大霉素的耐藥率分別為39.5%、40.3%和42.9%，對其余監(jiān)測抗菌藥物耐藥率均＞79%。鮑曼不動桿菌主要來自于呼吸道標(biāo)本和ICU，其多重耐藥率檢出較高，2016年為83.2%高于2015的本院（76.7%）數(shù)據(jù)。嗜麥芽窄食單胞菌對甲氧芐啶-磺胺甲唑和米諾環(huán)素全敏感，對左氧氟沙星的敏感率達(dá)95.7%，對頭孢他啶的敏感率僅為39.1%。

綜上所述，本院分離菌以革蘭陰性桿菌為主，其中呼吸科和ICU的MDR菌和XDR菌檢出率較高，應(yīng)引起高度重視。為有效控制MDR和XDR的產(chǎn)生和傳播，必須將抗菌藥物的臨床應(yīng)用管理和醫(yī)院感染防控措施相結(jié)合。

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Surveillance of antimicrobial resistance in the strains isolated from Chuzhou First People’s Hospital in 2016

XU Tiantian, XIE Ruiyu. （Department of Laboratory Medicine, Chuzhou First People's Hospital, Chuzhou Anhui 239000, China）

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 05-0562-06

10.16718/j.1009-7708.2017.05.015

2017-02-14

2017-06-04

安徽省滁州市第一人民醫(yī)院檢驗科，安徽滁州 239000。

徐添天（1985—），女，本科，檢驗師，主要從事臨床檢驗診斷方面的研究。

徐添天，E-mail：45736443@qq.com。