王斌星,王 鼎,付洋洋,郭春華*,彭忠利,陳光吉,王 永,蹇尚林

(1.西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川 成都 610041 2.四川省阿壩州畜牧工作站，四川 馬爾康 624000)

日糧中外源纖維素酶添加水平對舍飼牦牛屠宰性能和肉品質(zhì)的影響

王斌星1,王 鼎1,付洋洋1,郭春華1*,彭忠利1,陳光吉1,王 永1,蹇尚林2

(1.西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川 成都 610041 2.四川省阿壩州畜牧工作站，四川 馬爾康 624000)

【目的】本試驗旨在探究不同外源纖維素酶(Exogenous Fibrolytic Enzymes,EFE)添加水平對舍飼牦牛體尺指標(biāo)、屠宰性能、器官指數(shù)和肉品質(zhì)的影響?！痉椒ā坎捎脝我蛩卦囼炘O(shè)計，試驗因素為EFE的添加水平(0、 0.2、0.4 g/kg日糧干物質(zhì))，選取24頭年齡為4周歲左右的麥洼公牦牛，根據(jù)體重按照隨機區(qū)組試驗設(shè)計分為3個處理組(分別記為Con+0，Con+0.2和Con+0.4組)，每個處理8個重復(fù)，每個重復(fù)1頭牛?！窘Y(jié)果】結(jié)果表明：①Con+0.2和Con+0.4組牦牛的胸圍顯著高于對照組(P=0.01)，Con+0.4組的體高有高于其余兩組的趨勢(P=0.09)；②Con+0.4組牦牛的肉骨比(P=0.066)和凈肉率(P=0.072)有高于對照組的趨勢；③隨著EFE添加量的提高，牦牛的瘤胃的器官指數(shù)隨之提高(P=0.006)；④各處理牦牛肌肉pH值熟肉率、滴水損失率和常規(guī)營養(yǎng)指標(biāo)差異均不顯著(P>0.05)；⑤Con+0.4組牦牛的肌肉胱氨酸含量顯著低于其余2組(P=0.025)，但脯氨酸含量則顯著高于其余兩組(P=0.015)。【結(jié)論】因此，本試驗條件下，日糧中EFE提高了牦牛胸圍和凈肉率，對肉質(zhì)無顯著影響，以0.4 g/kg的添加量較優(yōu)。

舍飼牦牛；外源纖維素酶；屠宰性能；肉品質(zhì)

【研究意義】反芻動物瘤胃內(nèi)擁有數(shù)量龐大的細(xì)菌、原蟲和真菌，正是依靠這些微生物分泌的酶類對植物細(xì)胞壁中的纖維類物質(zhì)進(jìn)行消化。然而，高纖維日糧或木質(zhì)化程度較高的日糧由于其結(jié)構(gòu)復(fù)雜及高含量的木質(zhì)素對消化率的干擾導(dǎo)致反芻動物對纖維類物質(zhì)的消化作用受限[1]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】近年來，諸多報道指出，外源纖維素酶(Exogenous fibrolytic enzymes,EFE)可通過加強微生物對食糜的附著、形成酶與飼料的復(fù)合物甚至刺激微生物的定植的作用提高纖維類物質(zhì)的消化率，改善粗料的營養(yǎng)價值[2-4]， 進(jìn)而改善肉牛和奶牛的生產(chǎn)性能[5-6]，還改善了奶牛乳蛋白和乳脂含量[7-9]。但還未見到EFE添加到日糧中對反芻動物屠宰性能和肉品質(zhì)的影響的相關(guān)報道。

【本研究切入點】牦牛是青藏高原的特有畜種，我國是牦牛的主要棲息地。長期以來，牦牛基本還處于“靠天養(yǎng)畜”的生產(chǎn)模式，日糧基本屬于粗料型日糧，因此，有必要通過營養(yǎng)調(diào)控以提高粗料的利用率進(jìn)而提高生產(chǎn)效率?！緮M解決的關(guān)鍵問題】鑒于此，本試驗以舍飼牦牛為研究對象，通過測定不同到水平的EFE添加日糧中對牦牛屠宰性能和肉質(zhì)的影響，旨在為EFE的合理利用及舍飼牦牛體尺指標(biāo)、屠宰性能、器官指數(shù)和肉質(zhì)等指標(biāo)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗時間和地點

試驗在四川省阿壩藏族羌族自治州小金縣(N30°35′，E102°01′)進(jìn)行。該地區(qū)海拔約2500 m，冬季干燥而寒冷，屬高原大陸性氣候。年平均氣溫和降水量分別為12.2 ℃和613.9 mm，本試驗在該地區(qū)最寒冷的12至2月進(jìn)行，用高低溫度計(河北武強縣精達(dá)儀器儀表廠)測得試驗期牦牛圈舍內(nèi)溫度為-3～14 ℃。

1.2 外源纖維素酶及酶活

EFE為纖維素酶和木聚糖酶的復(fù)合粉劑，購自上海尤特爾生化有限公司。試驗前，參照Colombatto等[10]的方法測定了外源酶的纖維素酶和木聚糖酶活力，在pH 5.5和溫度為39 ℃的條件下，纖維素酶和木聚糖酶活力分別為8563.50和3585.60 IU/g。

1.3 試驗動物與設(shè)計

采用單因素試驗設(shè)計，試驗因素為EFE的添加水平(0、 0.2、0.4 g/kg日糧干物質(zhì))，選取24頭年齡為4周歲左右的麥洼公牦牛，根據(jù)體重按照隨機區(qū)組試驗設(shè)計分為3個處理組(分別記為Con+0，Con+0.2和Con+0.4組)，每個處理8個重復(fù)，每個重復(fù)1頭牛。3個處理組分別飼喂3種EFE添加量的日。

表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)成分含量(%)Table 1 Composition and nutrient levels of diets (DM basis,%)

注：①預(yù)混料分別為3個處理組分別提供0、 0.2、0.4 g/kg(日糧干物質(zhì))的EFE。同時預(yù)混料為每千克日糧提供：VA 1500 IU， VD 550 IU， VE 10 IU， Fe (硫酸亞鐵) 20 mg，ME (硫酸錳) 40 mg，Zn (硫酸鋅) 30 mg，I (碘化鉀) 0.50 mg，Se (亞硒酸鈉) 0.30 mg，Co(氯化鈷)0.2 mg；②營養(yǎng)成分為實測值。
Note: (i)The premix provided 0,0.2,and 0.4 g/kg of EFE for diets of the three treatments and provided the following per kg of diets：VA 1500 IU， VD 550 IU， VE 10 IU， Fe (as ferrous sulfate) 20 mg，ME (as manganese sulfate) 40 mg，Zn (as zinc sulfate) 30 mg，I (as potassium iodide) 0.50 mg，Se (as sodium selenite) 0.30 mg，Co(Cobalt chloride)0.2 mg.(ii)Nutrient levels were measured values.

1.4 試驗日糧

各處理組日糧配方參照中國肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(2004)[11]中體重200 kg，日增重(ADG)為500 g的營養(yǎng)需要設(shè)計。粗料為玉米秸稈，各組相同；根據(jù)實驗設(shè)計，首先將EFE添加到預(yù)混料中，再分別制成EFE含量不同的3種精料，并一次性備齊試驗所需的精料量。每天將粗料和精料配制成全混合日糧，現(xiàn)喂現(xiàn)配。試驗日糧組成和營養(yǎng)成分見表1。

1.5 飼養(yǎng)管理

牛進(jìn)場前，將圈舍消毒處理，進(jìn)場后立即用伊維菌素注射液進(jìn)行肌注驅(qū)蟲。稱重分組后對每頭牦牛分欄栓系飼養(yǎng)，每頭牦牛所占地面空間約2 m2。每日飼喂2次飼糧(8:00和16:00)，自由采食，自由飲水，預(yù)飼期7 d，試驗期60 d。

1.6 樣品采集及檢測指標(biāo)

1.6.1 體尺測量 在試驗開始前和結(jié)束后用測杖和卷尺對各處理每頭牦牛進(jìn)行體尺測量。參照李昭等[12]描述的方法分別測量牦牛的胸圍(從肩胛骨后角處用卷尺量取胸部的周徑)、體高(耆甲到地面的高度。將測杖垂直立于左前肢附近，調(diào)節(jié)內(nèi)部鐵尺，使上端橫尺緊貼耆甲的最高點，然后讀數(shù))和體斜長(由肩端到臀端的直線距離，將卷尺一端固定于肩端前緣，然后一直拉卷尺到臀端后緣，拉直卷尺，測量、讀數(shù))。

1.6.2 屠宰性能和器官指數(shù) 試驗結(jié)束后第1天(第61天)，每組隨機選取6頭牦牛進(jìn)行屠宰(遵照當(dāng)?shù)鼗刈迩逭娼塘x進(jìn)行)，屠宰前禁食12 h，禁水2 h。經(jīng)宰殺、放血、去頭和蹄、剝皮、開膛取出內(nèi)臟、劈半、沖洗、修整出凈肉，稱量胴體、骨、凈肉、心臟、肝臟、脾臟、肺臟、瘤胃、大腸和小腸重。

屠宰率 = 胴體重/宰前活重 × 100 %

凈肉率 = 凈肉率/宰前活重 × 100 %

同樣，各器官指數(shù)由器官重量除以宰前活重計算得來。

1.6.2 肉質(zhì) 本試驗擬測定的肉品質(zhì)指標(biāo)包括肌肉的pH值、熟肉率、滴水損失、常規(guī)營養(yǎng)成分、氨基酸組成和含量及脂肪酸組成和含量。其中熟肉率和滴水損失的測定參考Fernandez等[13]描述的方法，常規(guī)營養(yǎng)成分的測定方法參照張麗英[14]的方法。氨基酸組成和含量參考Peterson等[15]的方法。

(1)pH值。用精密pH計(pH-star)于屠宰后45 min測定3～4胸椎處眼肌肉樣pH值，將同一肉樣在4 ℃下貯存24 h后再次測定。

(2)熟肉率。屠宰后取5～6肋間處眼肌新鮮肉樣(沿肌纖維方向切取長×寬×厚=6 × 3× 3 cm3左右)，稱重記為M1，放入水溫為80 ℃的水浴鍋中保持30 min，取出后在室內(nèi)晾15 min，稱重記為M2。

計算公式：熟肉率(%) = (M1-M2)/M1× 100

(3)滴水損失。取5～6肋間處眼肌新鮮肉樣，準(zhǔn)確稱取100 g左右的肉樣(沿肌纖維方向切取長×寬×厚=5 cm× 3 cm× 2 cm左右)，記錄重量記為N1，將肉樣裝入塑料袋中，用絲線將肉樣吊掛起來，一同放入4 ℃冰箱中24 h后再次稱重記為N2。

計算公式：滴水損失(%) = (N1-N2)/N1× 100

(4)常規(guī)養(yǎng)分，包括水分、CP、粗脂肪(EE)、Ca和P。

(5)氨基酸組成和含量。首先取3～4胸椎處眼肌肉樣進(jìn)行脫脂處理，準(zhǔn)確稱取0.03 g，放入玻璃試管中后加入16 mL 6 mol/L的濃鹽酸，抽成真空后封口。放入110 ℃烘箱中水解24 h，率去殘渣后定容至50 mL。取1 mL濾液至25 mL容量瓶中用0.02 mol/L的鹽酸定容，用日立L-8900型氨基酸分析儀進(jìn)行分析。

1.7 數(shù)據(jù)處理

采用EXCEL(2010)辦公軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)初步整理，然后用調(diào)用SPSS(18.0)統(tǒng)計軟件中的GLM程序進(jìn)行方差分析，然后用Duncan 法進(jìn)行多重比較，P<0.05表示差異顯著，0.05

2 結(jié)果與分析

2.1 體重和體尺指標(biāo)

從表2可看出，各處理組初始體重和各體尺指標(biāo)差異均不顯著(P>0.05)，試驗結(jié)束后，2個試驗組牦牛的胸圍顯著高于對照組(P=0.01)，Con+0.4組的體高有高于其余兩組的趨勢(P=0.09)，其他指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。

2.2 屠宰性能

從表3可見，Con+0.4組牦牛的肉骨比(P=0.066)和凈肉率(P=0.072)有高于對照組的趨勢，其他指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。

2.3 器官指數(shù)

由表4可看出，隨著外源纖維素酶添加量的提高，牦牛的瘤胃的器官指數(shù)隨之提高(P=0.006)，各處理的其他器官指數(shù)差異不顯著(P>0.05)。

表2 日糧中添加纖維素酶對舍飼牦牛體尺指標(biāo)的影響Table 2 The effects of exogenous fibrolytic enzymes levels in diet on body size of housing-feeding yaks

2.4 肌肉理化指標(biāo)

表5顯示，各處理牦牛肌肉pH值熟肉率、滴水損失率和常規(guī)營養(yǎng)指標(biāo)差異均不顯著(P>0.05)。

2.5 肌肉氨基酸組成和含量

由表6可見，Con+0.4組牦牛的肌肉胱氨酸含量顯著低于其余2組(P=0.025)，但脯氨酸含量則顯著高于其余2組(P=0.015)，各組的其余氨基酸含量差異均不顯著(P>0.05)。

3 討 論

3.1 日糧中添加纖維素酶對舍飼牦牛體尺指標(biāo)、屠宰性能和器官指數(shù)的影響

體尺指標(biāo)反映的是動物生長發(fā)育情況和體況的表觀指標(biāo)，反芻動物的體尺性狀與遺傳、胴體性狀和繁殖性狀等有很強的關(guān)聯(lián)性[16-17]。本試驗結(jié)果顯示，首先，試驗前后各處理組牦牛的體尺均有不同程度的提高，而本試驗的供試牦牛為成年牛，說明舍飼的方式給予了牦牛較平衡的營養(yǎng)條件，有利于挖掘了牦牛的生產(chǎn)潛能，而這種潛能則提現(xiàn)在體況的恢復(fù)，即肌肉的增長，導(dǎo)致了體尺的變化；其次，日糧中添加EFE顯著提高了牦牛的胸圍，且有提高體高的趨勢，即EFE的添加有效促進(jìn)了牦牛的肌肉沉積，在同樣的動物品種條件下，導(dǎo)致體尺增大，這個結(jié)果得到本試驗中顯示的牦牛的試驗組的凈肉率高于對照組的結(jié)果印證，這充分說明EFE作為促進(jìn)纖維類物質(zhì)消化的添加劑，在試驗期內(nèi)顯示出對產(chǎn)肉性能的表觀影響，是一種良好的促生長添加劑；此外，本試驗中各處理組牦牛的凈肉率和屠宰率介于38.10 %～40.26 %和48.54～49.80，遠(yuǎn)低于集約化肉牛的屠宰性能(凈肉率為50 %左右，屠宰率在55 %左右)[18-19]，這可能與遺傳特性的差異有密切關(guān)系，同時提示在屠宰性能方面還有很大的提升空間。

表3 日糧中添加纖維素酶對舍飼牦牛屠宰性能的影響Table 3 The effects of exogenous fibrolytic enzymes levels in diet on slaughter performance of housing-feeding yaks

表4 日糧中添加纖維素酶對舍飼牦牛器官指數(shù)的影響Table 4 The effects of exogenous fibrolytic enzymes levels in diet on organ index of housing-feeding yaks (%)

表5 日糧中添加纖維素酶對舍飼牦牛肌肉理化指標(biāo)的影響Table 5 The effects of exogenous fibrolytic enzymes levels in diet on physical chemical index of housing-feeding yaks

表6 日糧中添加纖維素酶對舍飼牦牛肌肉氨基酸組成和含量的影響Table 6 The effects of exogenous fibrolytic enzymes levels in diet on the composition and content of amino acid of housing-feeding yaks

注：*表示必需氨基酸。
Note:*represents essential amino acid.

內(nèi)臟器官的重量和器官指數(shù)在一定程度上反映了動物機體的機能狀況，對于理論研究和生產(chǎn)實踐有重要的意義[20]。本試驗的供試牦牛處于同一年齡階段，且體重?zé)o顯著差異，而隨著EFE添加量的提高瘤胃的器官指數(shù)隨之提高則可能是EFE的添加提高了纖維類物質(zhì)的消化率，進(jìn)而提高了瘤胃總揮發(fā)性脂肪酸的產(chǎn)量，為瘤胃上皮細(xì)胞的增殖提供更多可利用能，增大了瘤胃的厚度和重量，但具體機理需要更深一步探究。

3.2 日糧中添加纖維素酶對舍飼牦牛肉質(zhì)的影響

肌肉pH值反映動物屠宰后肌糖原酵解速度的直接指標(biāo)，它與肉的顏色、烹飪特性和保藏期有密切關(guān)系，宰后肌肉pH值的動態(tài)變化趨勢由動物品種、年齡、營養(yǎng)狀況和激素分泌等因素所決定，通常，新鮮牛肉的pH值為6.5～7.2，然后隨著時間的推移呈現(xiàn)先迅速下降又緩慢上升的趨勢，最終達(dá)到6.0左右[21]。本試驗結(jié)果顯示，EFE的添加對屠宰后45 min和24 h的牦牛肉的pH值沒有顯著影響，說明試驗因素沒有影響屠宰后肉的糖原酵解速率和乳酸積累量。肉的熟肉率和滴水損失率是反映肉組織持水能力的常用指標(biāo)，熟肉率越低或滴水損失越大，持水能力則越低，肉的多汁越差，最終導(dǎo)致口感較差。本試驗結(jié)果表明，EFE的添加對牦牛肉的熟肉率和滴水損失率沒有影響，說明試驗因素對牦牛肉的在多汁性的口感方面沒有影響。同樣，本研究結(jié)果顯示，EFE的添加對肌肉常規(guī)營養(yǎng)指標(biāo)沒有直接影響。

氨基酸是蛋白質(zhì)的基本構(gòu)成單位，故蛋白質(zhì)的營養(yǎng)實質(zhì)上指氨基酸的營養(yǎng)。動物或人類從從食物中攝取的氨基酸是構(gòu)建機體組織的主要原料、機體內(nèi)功能物質(zhì)(如酶、激素和抗體等)的主要成分、組織更新和修補的主要原料以及為機體提供能量并轉(zhuǎn)化為糖和脂肪的重要組分。因此，肉中的蛋白質(zhì)的氨基酸組成和含量直接影響肉的營養(yǎng)價值。通常，將人體所攝取的氨基酸被分為必需氨基酸和非必需氨基酸，前者是指人體不能合成或合成速率不能適應(yīng)機體需要而必須從食物中攝取的氨基酸，包括Lys、Tyr、Phe、Met、Thr、Ile、Leu和Val 8種，但研究表明，His是嬰兒的必需氨基酸，因此，對嬰兒來說有9中必需氨基酸[22]。本試驗發(fā)現(xiàn)，牦牛肉中氨基酸種類豐富，含量較高，是較優(yōu)質(zhì)的食物蛋白源，此外，日糧能量水平對牦牛各種必需氨基酸沒有顯著的影響，說明，牦牛肉中必需氨基酸含量與能量因素可能沒有直接關(guān)系。然而，本試驗發(fā)現(xiàn)，EFE的添加沒有影響大部分非必需氨基酸(Ser、Asp、Glu、Gly、Ala和Arg) 含量，但提高了Pro的含量，降低了Cys的含量，可能由于這兩種氨基酸在牦牛消化道內(nèi)的吸收速度和最大吸收量與消化道的營養(yǎng)物質(zhì)消化率有關(guān)，但具體原因需要進(jìn)一步探究。

4 結(jié) 論

本試驗條件下，日糧中添加外源纖維素酶(EFE)提高了牦牛胸圍和凈肉率，對肉質(zhì)無顯著影響，以0.4 g/kg的添加量較優(yōu)。

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EffectsofExogenousFibrolyticEnzymesLevelsinDietonSlaughterPerformanceandMeatQualitywithHousing-feedingYaks

WANG Bin-xing1，WANG Ding1，F(xiàn)U Yang-yang1，GUO Chun-hua1*，PENG Zhong-li1，CHEN Guang-ji1，WANG Yong1，JIAN Shang-lin2

(1.Southwest University for Nationalities,College of Life Science and Technology,Sichuan Chengdu 610041,China; 2.Aba Livestock Workstation,Sichuan Maerkang 624200,China)

【Objective】The objective of this study was to delve into the effects of exogenous fibrolytic enzymes (Exogenous fibrolytic enzymes,EFE) supplementary level on the body size,slaughter performance,organ index and meat quality with housing-feeding yaks.【Method】Single factor experiment design was used,and the factor was the supplementary level of EFE (0,0.2,0.4 g/kg DM ),and 24 4-year-old Maiwa male yaks were divided into 3 treatments (Con+0,Con+0.2,Con+0.4 ) according to randomized block design,with 8 replicates of 1 yak.【Result】(i) The circumference of Con+0.2 and Con+0.4 groups of yaks was significantly higher than the control group (P=0.01),and there was a trend of increasing withers height compared with others; (ii) There was a trend of increasing the meat/bone ratio (P=0.066) and net meat rate (P=0.072) of yaks by EFE supplementation (Con+0.4 group); (iii)With the increasing of EFE dose,organ index of the rumen of yak increased (P=0.006); (iv)No difference were found with the pH value,cooked meat rate,water loss rate and conventional nutrient component of muscle in all treatments; (v)the cystine content in muscle of yak in Con+0.4 group was lower than anther groups(P=0.025),but the proline content was greater (P=0.015).【Conclusion】Under the conditions of this experiment,EFE supplementation in diet of yaks increased the circumference and net meat rate，and no significant effect on the meat quality,and the dose of 0.4 g/kg was better.

Housing-feeding yaks; Exogenous fibrolytic enzymes; Slaughter performance; Meat quality

1001-4829(2017)4-0945-07

10.16213/j.cnki.scjas.2017.4.037

2016-06-06

阿壩州應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)-牦牛優(yōu)質(zhì)高效、規(guī)模化健康養(yǎng)殖模式的研究與推廣應(yīng)用;西南民族大學(xué)2015年研究生“創(chuàng)新型科研項目”(CX2015SZ085)

王斌星(1990-),男,安徽岳西人,碩士研究生,從事反芻動物營養(yǎng)研究,E-mail:1045302767@qq.com，*為通訊作者:郭春華(1957-),女,四川內(nèi)江人,教授,從事反芻動物營養(yǎng)研究,E-mail: www.gch33@aliyun.com。

S823.8+5

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