李妍 劉俊 任麗娜

HE4、NSE、CYFRA21-1聯(lián)合檢測(cè)在肺癌診斷中的應(yīng)用

李妍 劉俊 任麗娜

目的 研究人附睪蛋白4(human epididym is protein 4，HE4)，神經(jīng)元特異性烯醇化酶(2-phospho-D-glycerate hydrolase，NSE)，細(xì)胞角蛋白19片段(cytokeratins19，CYFRA21-1)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肺癌的診斷價(jià)值。方法 檢測(cè)大連市中心醫(yī)院67例肺癌患者，70例健康體檢者，65例肺良性疾病患者血清中HE4，NSE，CYFRA21-1水平，分析各指標(biāo)對(duì)肺癌的診斷價(jià)值。結(jié)果 肺癌患者血清中HE4，NSE，CYFRA21-1水平顯著高于肺良性疾病與健康對(duì)照組(P＜0.05)，與單次檢查比較，聯(lián)合檢查可以提高檢測(cè)的靈敏度。結(jié)論 HE4可以作為新的肺癌腫瘤標(biāo)志物。聯(lián)合檢測(cè)血清中HE4，NSE，CYFRA21-1水平可以提高檢測(cè)的靈敏度，提高肺癌的診斷價(jià)值。

肺癌；人附睪蛋白4；神經(jīng)元特異性烯醇化酶；細(xì)胞角蛋白19片段

肺癌是最常見的惡性腫瘤之一，近年來肺癌的發(fā)病率在逐年上升，五年生存率僅為16%，極大的威脅著人類的健康和生命[1]。腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)具有創(chuàng)傷面小，早期發(fā)現(xiàn)早期治療，操作簡(jiǎn)單快速等優(yōu)點(diǎn)越來越受到人們的重視，合理選取血清中的腫瘤標(biāo)志物，可以有效地提高診斷率。人附睪蛋白4(HE4)是一種20世紀(jì)90年代發(fā)現(xiàn)的新型腫瘤標(biāo)志物，其在正常組織中含量極低，已有大量文獻(xiàn)報(bào)道HE4可用于卵巢癌的早期輔助診斷和療效監(jiān)測(cè)[2-3]。近年來有文獻(xiàn)報(bào)道HE4可用于肺癌的早期輔助診斷[4-5]，本研究旨在探討HE4對(duì)肺癌診斷應(yīng)用價(jià)值及HE4、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、細(xì)胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)聯(lián)合檢測(cè)在肺癌診斷中的意義，為肺癌的早期診斷提供依據(jù)。

作者單位：116033 大連市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科(李妍)；116033 大連市婦幼保健院檢驗(yàn)科(劉俊)；116033 大連市中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科(任麗娜)

1 資料和方法

1.1 研究資料 選取2015-01—2016-12大連市中心醫(yī)院收治的肺癌患者67例，男30例，女37例，平均年齡(60.5±12.2)歲，所有患者均經(jīng)病理組織切片及影像學(xué)確診，未經(jīng)腫瘤治療，其中包括肺小細(xì)胞癌47例(肺鱗癌32例，腺癌15例)，非小細(xì)胞癌20例。健康體檢者70例，男38例，女32例，平均年齡(62.4±13.6)歲，經(jīng)32排螺旋CT掃描，超聲檢查，常規(guī)血液檢驗(yàn)正常者納入對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)。肺良性疾病65例，肺炎30例，慢阻肺20例，肺良性腫瘤15例，男30例，女35例，平均年齡(55.1±14.0)歲。各組在年齡、性別比例等方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 靜脈采血5 mL，3 000 rpm離心15 min，分離血清，－80℃保存待測(cè)。采用羅氏COBAS e601電化學(xué)發(fā)光分析儀及配套試劑進(jìn)行檢測(cè)血清中HE4，NSE，CYFRA21-1水平。實(shí)驗(yàn)前所有檢測(cè)指標(biāo)均經(jīng)過伯樂復(fù)合質(zhì)控品檢測(cè)在控。陽性臨界值定為HE4＞100 pmol/L，NSE＞16.3 ng/L，CYFRA21-1＞3.3 ng/L。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，各種指標(biāo)濃度用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。顯著性檢驗(yàn)用t檢驗(yàn)。接收機(jī)工作曲線用于判斷不同指標(biāo)的診斷效率，以不同指標(biāo)診斷分界點(diǎn)下的敏感性為縱坐標(biāo)，特異性為橫坐標(biāo)，曲線下的面積表示不同指標(biāo)的診斷準(zhǔn)確性。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。敏感性＝真陽/(真陽＋假陰)×100%；特異性＝真陰/(真陰＋假陽)×100%。

2 結(jié)果

2.1 腫瘤患者血清中HE4，NSE，CYFRA21-1的濃度均高于肺部良性疾病和健康對(duì)照組(P＜0.05)。肺良性疾病和健康對(duì)照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1)。

表1 肺癌組、肺良性腫瘤組及健康對(duì)照組HE4、NSE、CYRFA21-1水平比較(±s)

表1 肺癌組、肺良性腫瘤組及健康對(duì)照組HE4、NSE、CYRFA21-1水平比較(±s)

注：與肺良性腫瘤組及健康對(duì)照組比較，*P＜0.05。

組別 例數(shù) HE4/(pmol·L-1) NSE/(ng·L-1) CYFRA21-1/(ng·L-1)肺癌組 67 402.6±134.3* 30.12±12.35* 16.30±7.60*肺良性腫瘤組 65 78.3±22.5 5.13±1.32 2.48±0.86健康對(duì)照組 70 85.5±18.6 5.01±1.23 2.46±0.98

2.2 HE4聯(lián)合常用肺癌檢測(cè)指標(biāo)組合對(duì)肺癌診斷的價(jià)值 在本研究中HE4，NSE，CYFRA21-1單獨(dú)應(yīng)用于肺癌診斷時(shí)特異度均較高，但靈敏度不高，聯(lián)合檢測(cè)可顯著提高靈敏度?？梢姸喾N血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)在肺癌診斷中具有一定診斷價(jià)值(表2)。

表2 不同腫瘤標(biāo)志物對(duì)肺癌的診斷價(jià)值[n(%)]

3 討論

近年來，隨著空氣污染的嚴(yán)重，肺癌的發(fā)病率越來越高，已成為目前威脅全球人類健康和生命的一項(xiàng)公共問題，目前臨床上CT和病理對(duì)癌癥的確診率很高，但對(duì)初期的診斷率很低，而且與良性的肺部疾病鑒別診斷較難。多數(shù)肺癌患者確診時(shí)已經(jīng)進(jìn)入至晚期，失去了最佳的治療時(shí)機(jī)，因此早期診斷，早期治療十分關(guān)鍵。腫瘤標(biāo)志物已成為常用的無創(chuàng)檢查指標(biāo)，在腫瘤篩查、診斷、判斷預(yù)后和轉(zhuǎn)歸方面發(fā)揮越來越重要的作用。

1991年Kirchhoff等[6]發(fā)現(xiàn)HE4蛋白，該基因位于染色體20q12-13.1上，全長(zhǎng)約12 kb，由5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子組成。HE4 mRNA編碼的分泌蛋白與細(xì)胞外蛋白酶抑制劑有同源性，且在男性生殖管上皮細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中合成，可能在精子的成熟過程中有重要作用。目前大量資料研究表明，HE4高濃度表達(dá)于卵巢癌細(xì)胞中，與卵巢癌的診斷和預(yù)后密切相關(guān)[7]。 但是HE4在其他組織如胃腸道、肝臟等組織中并未發(fā)現(xiàn)其表達(dá)。近年來有關(guān)于HE4與肺癌關(guān)系的研究：如Nagy等[8]研究發(fā)現(xiàn)，血清HE4檢測(cè)對(duì)肺癌具有重要的診斷價(jià)值，尤其聯(lián)合CEA、CA125等效果更佳。本文研究大連地區(qū)HE4，NSE，CYFRA21-1聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肺癌的診斷。

本研究發(fā)現(xiàn)：肺癌患者血清中，HE4濃度高于健康體檢者和肺良性腫瘤患者，存在顯著性差異。在腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)中，相比于以前的肺癌腫瘤標(biāo)志物(NSE ，CYFRA21-1)，HE4的靈敏度為63.8%，特異性為74.4%。HE4聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度明顯高于傳統(tǒng)的檢測(cè)指標(biāo)組合，可達(dá)88.6%。

CYFRA21-1被稱為細(xì)胞角蛋白19片段(CK19)，該蛋白主要由細(xì)胞角蛋白的19的兩個(gè)單克隆抗BM19-21和KS19-1組成。角蛋白是組成細(xì)胞骨架的一種中間體，CK19的相對(duì)分子質(zhì)量為10KD，CYFRA21-1主要在單層上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在，如肺泡、子宮內(nèi)膜、胰腺等。腫瘤細(xì)胞在死亡時(shí)，會(huì)激活細(xì)胞中的蛋白酶，使角蛋白快速降解，講解后的碎片釋放到循環(huán)系統(tǒng)，血清中CYFRA21-1含量會(huì)升高，肺癌細(xì)胞中有CYFRA21-1的表達(dá)[9]，尤其是鱗癌，但是這種片段在肺部良性疾病患者中含量極低。與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符合。

NSE神經(jīng)元推行烯醇化酶，是一種用于肝糖分解的多肽類酶，該物質(zhì)特異性存在于大腦神經(jīng)元、周圍神經(jīng)組織及內(nèi)分泌組織中。肺癌組織中也存在NSE，其含量與正常肺細(xì)胞相比高出3～35倍。

但是由于樣本量的局限性，本研究對(duì)HE4在各不同病理類型的肺癌中的診斷價(jià)值沒有進(jìn)行進(jìn)一步分析。有研究表明，在肺腺癌患者血清中HE4高濃度表達(dá)[10]，在鱗癌和小細(xì)胞癌差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這些數(shù)據(jù)都顯示，HE4可能作為肺癌診斷的新指標(biāo)，聯(lián)合檢測(cè)可作為臨床高危人群的臨床篩查指標(biāo)。

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Objective To explore the clinical significance of combined detection of serum HE4，NSE，CYERA21-1 in patients w ith lung cancer.Methods The level of serum HE4，NSE，CYFRA21-1 of 67 patients w ith lung cancer from Dalian Central Hospital，70 cases of healthy people and 65 patients w ith pulmonary diseases were measured and analyzed for their value in the detection of lung cancer.Results The serum level of HE4，NSE，CYFRA21-1 in lung cancer group were significantly higher than those of the other two control groups(P＜0.05).The sensitivity rate of joint detection of three tumor markers were significantly higher than those of single detection.Conclusion HE4 may be used as a new biomarker of lung cancer.The combined detection of serum HE4，NSE，CYFRA21-1 could increase the sensitivity of the patients w ith lung cancer and is of great value in lung cancer detection.

Lung cancer；HE4；NSE；CYFRA21-1

2017-05-03)

1005-619X(2017)10-1081-03

10.13517/j.cnki.ccm.2017.10.031