王國(guó)慶，陶 陶 ，蘇 歡，王雪晴 ，陳恕求，陳 明，張麗華

M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與前列腺癌惡性程度的相關(guān)性分析

王國(guó)慶1，陶 陶2，蘇 歡3，王雪晴1，陳恕求3，陳 明3，張麗華1

目的探討前列腺癌組織M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與前列腺癌病理分級(jí)和分期的相關(guān)性。方法選取58例行根治性前列腺癌切除患者，對(duì)病理標(biāo)本行HE和免疫組化SP法染色，確定腫瘤分期、病理分級(jí)及有無M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，采用χ2檢驗(yàn)分析M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與腫瘤分級(jí)和分期的相關(guān)性。結(jié)果M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的前列腺癌組≥T2c為71.4%，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為60.0%，明顯高于無M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)組(χ2=5.97，P=0.015；χ2=10.28，P=0.001)；M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與無M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的前列腺癌組的病理分級(jí)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)可能參與前列腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移；其相關(guān)病理、生理機(jī)制有待進(jìn)一步分析。

前列腺腫瘤；巨噬細(xì)胞；病理分級(jí)；臨床分期

前列腺癌是男性泌尿生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，有數(shù)據(jù)顯示2009年我國(guó)前列腺癌的發(fā)病率為9.92/10萬，2015年我國(guó)前列腺癌發(fā)病率增至60.3/10萬，病死率達(dá)26.6/10萬[1]。前列腺癌已成為威脅中國(guó)男性健康的主要疾病之一，其發(fā)生和進(jìn)展機(jī)制亟待深入分析。

既往研究表明，炎癥反應(yīng)的主要作用是促進(jìn)傷口愈合、組織修復(fù)以及對(duì)抗各類感染。近年研究發(fā)現(xiàn)，炎癥反應(yīng)尤其是慢性非可控炎癥反應(yīng)中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)于腫瘤組織中可顯著促進(jìn)腫瘤的惡性進(jìn)展。在肝癌、胃癌、食管癌、結(jié)腸癌和膀胱癌等多種實(shí)體腫瘤中，人們發(fā)現(xiàn)炎癥細(xì)胞可以促進(jìn)腫瘤滋養(yǎng)血管生成、DNA損傷、改變微環(huán)境以促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移和逃避免疫應(yīng)答[2]。這些炎癥細(xì)胞包括巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞等[3-6]。文獻(xiàn)報(bào)道[7-8]循環(huán)血液中的炎癥細(xì)胞比值(中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞)可以作為預(yù)測(cè)前列腺癌臨床分期、病理分級(jí)和預(yù)后的重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)58例前列腺癌，分析腫瘤組織有無炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)與臨床病理特征的關(guān)系，探討前列腺癌炎癥微環(huán)境與前列腺癌的惡性表型之間的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1臨床資料選取2014～2015年東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院泌尿外科58例前列腺癌標(biāo)本(均行腹腔鏡前列腺癌根治+淋巴清掃)，平均年齡(72.3±7.2)歲；Gleason評(píng)分≤7分者35例，8～10分者23例。臨床分期

1.2方法腫瘤組織行HE染色和免疫組化SP法染色，200倍顯微鏡下觀察腫瘤組織周圍有無M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)。

2 結(jié)果

2.1臨床特征HE染色示部分前列腺癌組織間質(zhì)內(nèi)存在M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，巨噬細(xì)胞體積較大，形態(tài)不規(guī)則，胞質(zhì)嗜酸性染色，核稍偏位，核卵圓形，染色質(zhì)深染(圖1)；部分前列腺癌組織間質(zhì)內(nèi)無M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)(圖2)。免疫組化SP法染色示M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD163蛋白呈陽性(圖3)；M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD163蛋白呈陰性(圖4)。

①②③④

圖1有M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的前列腺癌病理組織HE染色，可見典型的M2型巨噬細(xì)胞，細(xì)胞體積較大，形態(tài)不規(guī)則，核稍偏位，染色質(zhì)深染圖2無M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的前列腺癌病理組織HE染色圖3巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD163蛋白呈陽性，SP法圖4巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD163蛋白呈陰性，SP法

2.2M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與前列腺癌局部進(jìn)展的相關(guān)性M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的前列腺癌組≥T2c為71.4%，鏡下未見M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的前列腺癌組≥T2c為39.1%(χ2=5.97，P=0.015，表1)。

2.3M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與前列腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的前列腺癌組發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為60.0%；鏡下無M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的前列腺癌組發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為17.4%(χ2=10.28，P=0.001，表1)。

表1 M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與前列腺癌局部進(jìn)展和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

*P<0.05

2.4M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與前列腺癌病理分級(jí)的相關(guān)性M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與無M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的前列腺癌組的病理分級(jí)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

3 討論

目前，根治性切除和放療是治愈局限性前列腺癌的主要方法。但是，對(duì)于已有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、不適宜手術(shù)或治療后復(fù)發(fā)(轉(zhuǎn)移)等情況，通常選擇內(nèi)分泌治療。研究表明，80%以上的患者可通過雄激素剝奪治療獲得疾病的緩解，但經(jīng)過14～30個(gè)月的中位時(shí)間后，大部分患者的病變均逐漸發(fā)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer, CRPC)。患者一旦發(fā)生去勢(shì)抵抗和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差[9]。雖然多種藥物包括多西紫杉醇、阿比特龍、恩雜魯胺等可用于CRPC的治療，但其療效仍然有限。目前，CRPC已成為晚期前列腺癌患者主要死因[10]。因此，探討前列腺癌的進(jìn)展機(jī)制，尋找新的分子靶點(diǎn)，對(duì)延緩疾病進(jìn)程和降低晚期腫瘤的病死率具有重大作用。

近年越來越多的研究證實(shí)腫瘤相關(guān)炎癥反應(yīng)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，很多腫瘤起源于感染、慢性炎性刺激和炎癥反應(yīng)：腫瘤相關(guān)炎癥反應(yīng)的主要特點(diǎn)是炎性細(xì)胞的滲透、細(xì)胞因子產(chǎn)生、組織重建以及血管生成。其中，中性粒細(xì)胞可以分泌大量血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)，而內(nèi)皮細(xì)胞分泌的趨化因子又可以誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞向腫瘤趨化，為腫瘤生長(zhǎng)和增殖提供適宜的環(huán)境，促使腫瘤血管形成，進(jìn)而加快腫瘤的生長(zhǎng)[2]。Nonomura等[11]發(fā)現(xiàn)在接受內(nèi)分泌治療的前列腺癌患者病理切片中，腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumour-associated macrophage,TAM)計(jì)數(shù)較低組的預(yù)后明顯優(yōu)于計(jì)數(shù)較高組。Lanciotti等[12]通過對(duì)93例前列腺癌根治術(shù)后的病理切片與生化復(fù)發(fā)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)，高密度的TAM浸潤(rùn)是前列腺癌復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險(xiǎn)因子。

巨噬細(xì)胞有兩種已經(jīng)明確的分化表型，即M1型和M2型。M1型巨噬細(xì)胞常分泌引起輔助性T細(xì)胞(Th)1型免疫反應(yīng)的細(xì)胞因子，M2型巨噬細(xì)胞則常分泌引起Th2型免疫反應(yīng)的細(xì)胞因子。研究表明，TAM具有M2型巨噬細(xì)胞特性，高表達(dá)CD163、CD206、Arg-1等M2型巨噬細(xì)胞的標(biāo)記分子，同時(shí)主要組織相容性復(fù)合體低表達(dá)，并且介導(dǎo)VEGF、MMP-9、殼多糖酶樣蛋白等細(xì)胞因子的分泌，促進(jìn)腫瘤的血管生成、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等[13]。本組回顧性分析58例前列腺癌患者術(shù)后病理切片中炎性細(xì)胞浸潤(rùn)與腫瘤臨床分期、病理分級(jí)的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)M2型巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)與腫瘤的局部生長(zhǎng)和淋巴轉(zhuǎn)移呈顯著的正相關(guān)，與腫瘤的病理分級(jí)未見明顯相關(guān)性。本組由于樣本量較少，且可能存在地域差異；M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)是否影響前列腺癌患者的生化復(fù)發(fā)，以及M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的相關(guān)分子機(jī)制尚有待于進(jìn)一步深入探討。

[1] Chen W, Zheng R, Baade P D,etal. Cancer statistics in China, 2015[J]. CA Cancer J Clin, 2016,66(2):115-132.

[2] Khan S, Jain M, Mathur V,etal. Chronic inflammation and cancer: paradigm on tumor progression, metastasis and therapeutic intervention[J]. Gulf J Oncol, 2016,1(20):86-93.

[3] Coffelt S B, Lewis C E, Naldini L,etal. Elusive identities and overlapping phenotypes of proangiogenic myeloid cells in tumors[J]. Am J Pathol, 2010,176(4):1564-1576.

[4] Denardo D G, Andreu P, Coussens L M. Interactions between lymphocytes and myeloid cells regulate pro-versus anti-tumor immunity[J]. Cancer Metastasis Rev, 2010,29(2):309-316.

[5] Egeblad M, Nakasone E S, Werb Z. Tumors as organs: complex tissues that interface with the entire organism[J]. Dev Cell, 2010,18(6):884-901.

[6] Johansson M, Denardo D G, Coussens L M. Polarized immune responses differentially regulate cancer development[J]. Immunol Rev, 2008,222:145-154.

[7] 晉學(xué)飛，李宏巖，劉恒昌，等. 根治性前列腺癌切除術(shù)患者外周血中性粒細(xì)胞-淋巴細(xì)胞比值與預(yù)后的關(guān)系[J]. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志, 2015,32(12):2967-2969.

[8] 付 凱，陳楚杰，林藩雄，等. 術(shù)前中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值與前列腺癌惡性度的關(guān)系探討[J]. 中華腔鏡泌尿外科雜志(電子版), 2015,9(5):13-16.

[9] Tao T, Liu D, Liu C,etal. Autoregulatory feedback loop of EZH2/miR-200c/E2F3 as a driving force for prostate cancer development[J]. Biochim Biophys Acta, 2014,1839(9):858-865.

[10] Tyson M D, Bryce A. The effect of enzalutamide and bicalutamide on patient-reported quality of life outcomes: results from the TERRAIN study[J]. Eur Urol, 2016,71(4):543-544.

[11] Nonomura N, Takayama H, Nakayama M,etal. Infiltration of tumour-associated macrophages in prostate biopsy specimens is predictive of disease progression after hormonal therapy for prostate cancer[J]. BJU Int, 2011,107(12):1918-1922.

[12] Lanciotti M, Masieri L, Raspollini M R,etal. The role of M1 and M2 macrophages in prostate cancer in relation to extracapsular tumor extension and biochemical recurrence after radical prostatectomy[J]. Biomed Res Int, 2014,2014:486798.

[13] Chen Y, Zhang S, Wang Q,etal. Tumor-recruited M2 macrophages promote gastric and breast cancer metastasis via M2 macrophage-secreted CHI3L1 protein[J]. J Hematol Onco, 2017,10(1):36.

RelationshipbetweenM2microphageinfiltrationandthemalignantdegreeofprostatecancer

WANG Guo-qing1, TAO Tao2, SU Huan3, WANG Xue-qing1, CHEN Shu-qiu3, CHEN Ming3, ZHANG Li-hua1

(1DepartmentofPathology,3DepartmentofUrology,ZhongdaHospital,MedicalSchool,SoutheastUniversity,Nanjing210009,China;2DepartmentofUrology,AnhuiProvincialHospital,AnhuiMedicalUniversity,Hefei230001,China)

PurposeTo investigate the relationship between M2 microphage infiltration and the pathological grading and staging of prostate cancer.Methods58 patients who accepted the radical resection of prostate cancer were selected. After operation, pathologic specimens were hematoxylin eosin stained and immunohistochemical of SP stained to identify the pathological grading, staging, and M2 microphage infiltration. Then, Chi-squared test was used to analyze the relationship between M2 microphage infiltration and the pathological grading and staging of prostate cancer.ResultsThere were 71.4% high stage (≥T2c) cases and 60% lymph node metastasis cases in M2 microphage infiltration group, which was significantly higher than those in non M2 microphage infiltration group. However, there was no relationship between M2 microphage infiltration and pathological grading.ConclusionM2 macrophage infiltration may participate in the prostate cancer cell growth and metastasis, whose pathophysiological mechanism needs further exploration.

prostate neoplasm；macrophage；pathological grading; clinical stage

時(shí)間：2017-9-18 6:23 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170918.0623.006.html

R 737.25

A

1001-7399(2017)09-0969-03

10.13315/j.cnki.cjcep.2017.09.006

接受日期：2017-07-24

江蘇省自然科學(xué)基金(BK20160705)

1東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院病理科、3泌尿外科，南京 210009

2安徽醫(yī)科大學(xué)附屬安徽省立醫(yī)院泌尿外科，合肥 230001

王國(guó)慶，男，醫(yī)師。Tel:(025)83272037，E-mail: wanggq130@sina.com

張麗華，女，博士，主任醫(yī)師，通訊作者。E-mail：15905179393@126.com

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2017-9-18 6:23 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170918.0623.007.html