劉曉瑩，鄒偉，于學(xué)平

中國(guó)因卒中死亡的患者每年有160萬[1-2]，其中有18%～47%是出血性卒中患者[3]。出血性卒中即非外傷性腦出血，是卒中的一個(gè)分型，其病理?yè)p害主要包括原發(fā)性腦損傷和繼發(fā)性腦損傷。原發(fā)性腦損傷是指出血后的占位效應(yīng)，顱內(nèi)容積增大、內(nèi)環(huán)境遭到破壞而導(dǎo)致的顱內(nèi)壓升高等；繼發(fā)性腦損傷是指由初級(jí)損傷誘發(fā)的血液循環(huán)障礙、代謝紊亂、腦水腫、血液分解產(chǎn)物釋放等[4-5]。目前仍無有效的治療方法改善出血性卒中高發(fā)病率和高死亡率的現(xiàn)狀。越來越多的證據(jù)表明先天性免疫應(yīng)答和炎癥損傷參與了腦出血后神經(jīng)功能損傷的病理過程[4，6-9]。巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的C型凝集素受體（macrophage-inducible C-type lectin，Mincle）會(huì)結(jié)合壞死細(xì)胞中釋放的SAP130配體而激發(fā)下游反應(yīng)[10-11]。在壞死或外界刺激下，Mincle使下游脾酪氨酸激酶（spleen tyrosine kinase，Syk）磷酸化，促使NF-κB通路激活，產(chǎn)生促炎因子，并促進(jìn)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)[11-12]。在包括缺血性卒中和腦外傷在內(nèi)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中，Mincle/Syk通路已被證實(shí)作為激發(fā)點(diǎn)參與炎癥反應(yīng)的發(fā)生[13-14]。最新研究表明，抑制Mince/Syk通路有助于控制蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期的炎性腦損傷[10]。本文就Mincle/Syk信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為研究出血性卒中發(fā)病機(jī)制提供新思路，為治療出血性卒中提供新靶點(diǎn)。

1 Mincle的結(jié)構(gòu)與分布

Mincle也叫作CLEC4E，連同Dectin-1、Dectin-2、MCL、MMR及DC-SIGN都隸屬于C型凝集素受體（C-type lectin receptor，CLR）家族[15-17]，是由Makoto Matsumoto等[18]于1999年在小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的。目前對(duì)Mincle受體結(jié)構(gòu)的研究尚不完善，Makoto Matsumoto等[18]指出它是一種含有219個(gè)氨基酸的Ⅱ型跨膜蛋白，其中包括含氨基端的胞內(nèi)區(qū)，一段跨膜區(qū)和含有羧基端的胞外區(qū)。Mincle受體在人類基因組中由于胞外區(qū)缺乏多態(tài)性，而使其生物學(xué)活性處于相對(duì)保守狀態(tài)[19]。Mincle受體主要在髓系細(xì)胞中表達(dá)，特別是某些抗原提呈細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞，在B細(xì)胞及大腦的小膠質(zhì)細(xì)胞中也可發(fā)現(xiàn)受體的表達(dá)[19-21]。Yue He等[10]最新的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Mincle在蛛網(wǎng)膜下腔出血（Subarachnoid Hemorrhage，SAH）大鼠腦組織的小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元中均有表達(dá)，但在星形細(xì)胞中無表達(dá)。Christine Ribbing等[22]發(fā)現(xiàn)肥大細(xì)胞表面也是Mincle受體表達(dá)分布的區(qū)域。

2 Mincle與炎癥反應(yīng)

Mincle已被廣泛證實(shí)，作為致病刺激的受體，隨之引發(fā)了先天的促炎癥反應(yīng)[23]。然而，最新的研究指出，Mincle不單純誘導(dǎo)促炎癥反應(yīng)，還是一種免疫調(diào)節(jié)劑，它參與并促進(jìn)了抗炎細(xì)胞因子的表達(dá)，并對(duì)抗調(diào)節(jié)促炎癥信號(hào)通路[24]。實(shí)驗(yàn)顯示，白細(xì)胞介素10（interleukin-10，IL-10）分泌增多可增強(qiáng)老鼠對(duì)病原菌的易感性[25]。而Mincle在巨噬細(xì)胞上的IL-10表達(dá)中起重要作用[26-27]。除了誘導(dǎo)抗炎細(xì)胞因子分泌外，Mincle最近還被發(fā)現(xiàn)關(guān)系到促炎信號(hào)的下行調(diào)節(jié)。Mincle基因敲除小鼠腹腔感染真菌后炎性細(xì)胞因子及中性粒細(xì)胞募集均較少[28]。Mincle可與結(jié)核分枝桿菌結(jié)合，激活巨噬細(xì)胞產(chǎn)生炎性因子和一氧化碳。此外機(jī)體在受到輻射等刺激時(shí)，會(huì)引發(fā)胸腺細(xì)胞死亡和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，此時(shí)Mincle將發(fā)揮其免疫監(jiān)視的作用，減少炎性浸潤(rùn)造成的組織細(xì)胞損傷，有利于后期恢復(fù)。還有學(xué)者在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血清中檢測(cè)到Mincle信使核糖核酸（ribonucleic acid，RNA）水平升高[29]?？梢奙incle廣泛參與多種免疫反應(yīng)及炎癥反應(yīng)過程，而炎癥反應(yīng)正是出血性卒中后腦水腫加重的誘因，可引起嚴(yán)重的繼發(fā)性腦損傷。由此可見抑制Mincle及其相關(guān)的炎性反應(yīng)通路，可為防止出血性卒中炎性腦損傷、降低腦水腫造成的風(fēng)險(xiǎn)提供新思路。

3 Mincle/Syk信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與出血性卒中

CLR信號(hào)通過Syk-Card9通路生成一個(gè)獨(dú)特的轉(zhuǎn)錄激活程序。Syk與CLR胞內(nèi)磷酸化ITAM基序或銜接蛋白相綁定以啟動(dòng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是通過以下幾種模塊完成的：①PLCγ2，在Dectin-1激活后被磷酸化誘發(fā)Ca2+流出，繼而通過激活鈣調(diào)磷酸酶觸發(fā)了NFAT轉(zhuǎn)錄因子的核外露[30-31]。PLCγ2-DC無法通過激活MAPK來分泌炎性細(xì)胞因子和指導(dǎo)T細(xì)胞Th1/Th17極化[30，32]。②Card9-Bcl10-Malt1復(fù)合體對(duì)由Dectin-1配體凝膠多糖所誘發(fā)的基因表達(dá)及TDM和TDB至關(guān)重要[33-34]。Card9-Bcl10-Malt1導(dǎo)致NF-κB激活而不需要激活MAPKs ERK1/2、JNK和p38[33，35-36]。同時(shí)有證據(jù)表明PLCγ將Syk與Card9相鏈接[30]。③Dectin-1和Syk激活的同時(shí)也激活了Raf-1受體，導(dǎo)致RelA磷酸化，從而介導(dǎo)了NF-kb調(diào)解基因的表達(dá)[37]。SAP130作為Mincle的一種結(jié)合蛋白是U2 snRNP的一個(gè)組件，固定存在于活細(xì)胞的細(xì)胞核中[11，38]，當(dāng)組織損傷、細(xì)胞壞死時(shí)，SAP130將被釋放出來，作為配體與Mincle受體相結(jié)合，使下游Syk磷酸化，進(jìn)而激活Card9依賴的級(jí)聯(lián)信號(hào)。其中Card9含量的多少與免疫反應(yīng)效果直接相關(guān)，而Card9-Bcl10-Malt1復(fù)合體在NF-κB途徑的激活中扮演至關(guān)重要的角色。一旦NF-κB信號(hào)通路被激活，包括腫瘤壞死因子α、IL-6等在內(nèi)的相關(guān)炎性因子將呈現(xiàn)高表達(dá)。已有研究證實(shí)NF-κB參與了出血性卒中的炎性反應(yīng)過程[39]，而關(guān)于其上游的Mincle的研究還比較少見。

4 Mincle參與神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)展

De Rivero Vaccari Juan Carlos等[13]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，腦外傷后Mincle在大腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞中被SAP130激活，并產(chǎn)生腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）。外傷后腦組織及腦脊液中Mincle表達(dá)增多，抑制Mincle通路后，TNF表達(dá)減少。Thiruma V Arumugam等[40]提出Mincle/Syk信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與了缺血性卒中小鼠的病理生理過程。也有實(shí)驗(yàn)表明[14]，Mincle在人和鼠缺血腦組織中的免疫細(xì)胞及非免疫細(xì)胞中均有表達(dá)；Mincle、Syk參與的先天免疫系統(tǒng)在腦缺血及再灌注的病理過程中起關(guān)鍵作用。Yue He等[10]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，Mincle在小膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)元中有表達(dá)；SAH后Mincle/Syk信號(hào)通路被激活，炎性因子及MPO表達(dá)增多，抑制其通路激活則相應(yīng)指標(biāo)表達(dá)降低，并可減輕神經(jīng)功能損傷程度。Yi Xie等[41]在此基礎(chǔ)上，以Mincle/Syk為靶點(diǎn)，利用人白蛋白干預(yù)SAH大鼠，取得了很好的抑制免疫及抗炎的效果。

5 Mincle參與出血性卒中治療的前景展望

Mincle作為CLR家族中“年輕的成員”，人們對(duì)其機(jī)理的研究尚不全面，但因其參與了多種疾病的先天性免疫應(yīng)答過程，并與炎癥反應(yīng)的激活密切相關(guān)而得到了學(xué)術(shù)界廣泛關(guān)注。并且大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，Mincle在腦組織，特別是小膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元中均有表達(dá)。同時(shí)Mincle/Syk信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路也被發(fā)現(xiàn)參與了包含缺血性卒中在內(nèi)的多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的神經(jīng)炎性反應(yīng)，特異性的抑制該通路激活可以抑制神經(jīng)炎癥，抗凋亡及改善神經(jīng)功能損傷。對(duì)于有著相同結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)和相似生理病理機(jī)制的腦出血，Mincle在其發(fā)病及治療中的作用還未得到關(guān)注。基于以上研究成果和本綜述回顧情況，全面而深入地探索Mincle/Syk通路在腦出血神經(jīng)炎性反應(yīng)中的作用可能會(huì)成為理解腦出血發(fā)病機(jī)制和有效治療腦出血的新方法。

[1] JOHNSTON S C，MENDIS S，MATHERS C D.Global variation in stroke burden and mortality：estimates from monitoring，surveillance，and modelling[J]. Lancet Neurol，2009，8（4）：345-354.

[2] CHEN Z. The mortality and death cause of national sample areas[M]. Beijing：Peking Union Medical University Press，2008.

[3] LIU L，WANG D，WONG K S，et al. Stroke and stroke care in China：huge burden，signi ficant workload，and a national priority[J]. Stroke，2011，42（12）：3651-3654.

[4] KEEP R F，HUA Y，XI G. Intracerebral haemorrhage：mechanisms of injury and therapeutic targets[J].Lancet Neurol，2012，11（8）：720-731.

[5] URDAY S，BESLOW L A，GOLDSTEIN D W，et al. Measurement of perihematomal edema in intracerebral hemorrhage[J]. Stroke，2015，46（4）：1116-1119.

[6] FANG H，WANG P F，ZHOU Y，et al. Toll-like receptor 4 signaling in intracerebral hemorrhageinduced in fl ammation and injury[J/OL]. J Neuroin fl ammation，2013，10：27. https：//doi.org/10.1186/1742-2094-10-27

[7] HWANG B Y，APPELBOOM G，AYER A，et al.Advances in neuroprotective strategies：potential therapies for intracerebral hemorrhage[J].Cerebrovasc Dis，2011，31（3）：211-222.

[8] ZHOU Y，WANG Y，WANG J，et al. In fl ammation in intracerebral hemorrhage：from mechanisms toclinical translation[J/OL]. Prog Neurobiol，2014，115：25-44. https：//doi.org/10.1016/j.pneurobio.2013.11.003

[9] LEI C，LIN S，ZHANG C，et al. High-mobility group box1 protein promotes neuroin fl ammation after intracerebral hemorrhage in rats[J/OL].Neuroscience，2013，228：190-199. https：//doi.org/10.1016/j.neuroscience.2012.10.023

[10] HE Y，XU L，LI B，et al. Macrophage-Inducible C-Type Lectin/Spleen Tyrosine Kinase Signaling Pathway Contributes to Neuroin fl ammation After Subarachnoid Hemorrhage in Rats[J]. Stroke，2015，46（8）：2277-2286.

[11] YAMASAKI S，ISHIKAWA E，SAKUMA M，et al.Mincle is an ITAM-coupled activating receptor that senses damaged cells[J]. Nat Immunol，2008，9（10）：1179-1188.

[12] YASUKAWA S，MIYAZAKI Y，YOSHII C，et al. An ITAM-Syk-CARD9 signalling axis triggers contact hypersensitivity by stimulating IL-1 production in dendritic cells[J/OL]. Nat Commun，2014，5：3755. http：//dx.doi.org/10.1038/ncomms4755

[13] DE RIVERO VACCARI J C，BRAND F J 3RD，BERTI A F，et al. Mincle signaling in the innate immune response after traumatic brain injury[J]. J Neurotrauma，2015，32（4）：228-236.

[14] SUZUKI Y，NAKANO Y，MISHIRO K，et al.Involvement of Mincle and Syk in the changes to innate immunity after ischemic stroke[J/OL]. Sci Rep，2013，3：3177. http：//dx.doi.org/10.1038/srep03177

[15] BROWN G D. Sensing necrosis with Mincle[J]. Nat Immunol，2008，9（10）：1099-1100.

[16] KINGETER L M，LIN X. C-type lectin receptorinduced NF-κB activation in innate immune and in fl ammatory responses[J]. Cell Mol Immunol，2012，9（2）：105-112.

[17] HARDISON S E，BROWN G D. C-type lectin receptors orchestrate antifungal immunity[J]. Nat Immunol，2012，13（9）：817-822.

[18] MATSUMOTO M，TANAKA T，KAISHO T，et al. A novel LPS-inducible C-type lectin is a transcriptional target of NF-IL6 in macrophages[J]. J Immunol，1999，163（9）：5039-5048.

[19] FLORNES L M，BRYCESON Y T，SPURKLAND A，et al. Identi fication of lectin-like receptors expressed by antigen presenting cells and neutrophils and their mapping to a novel gene complex[J].Immunogenetics，2004，56（7）：506-517.

[20] MCKIMMIE C S，ROY D，F(xiàn)ORSTER T，et al.Innate immune response gene expression pro files of N9 microglia are pathogen-type speci fic[J]. J Neuroimmunol，2006，175（1-2）：128-141.

[21] KAWATA K，ILLARIONOV P，YANG G X，et al.Mincle and human B cell function[J]. J Autoimmun，2012，39（4）：315-322.

[22] RIBBING C，ENGBLOM C，LAPPALAINEN J，et al. Mast cells generated from patients with atopic eczema have enhanced levels of granule mediators and an impaired Dectin-1 expression[J]. Allergy，2011，66（1）：110-119.

[23] RICHARDSON M B，WILLIAMS S J. MCL and Mincle：C-type lectin receptors that sense damaged self and pathogen-associated molecular patterns[J/OL]. Front Immunol，2014，5：288. https：//doi.org/10.3389/ fimmu.2014.00288

[24] OSTROP J，LANG R. Contact，Collaboration，and Con fl ict：Signal Integration of Syk-Coupled C-Type Lectin Receptors[J]. J Immunol，2017，198（4）：1403-1414.

[25] TURNER J，GONZALEZ-JUARRERO M，ELLIS D L，et al. In vivo IL-10 production reactivates chronic pulmonary tuberculosis in C57BL/6 mice[J].J Immunol，2002，169（11）：6343-6351.

[26] YAMASAKI S，MATSUMOTO M，TAKEUCHI O，et al. C-type lectin Mincle is an activating receptor for pathogenic fungus，Malassezia[J]. Proc Natl Acad Sci USA，2009，106（6）：1897-1902.

[27] ISHIKAWA T，ITOH F，YOSHIDA S，et al.Identi fication of distinct ligands for the C-type lectin receptors Mincle and Dectin-2 in the pathogenic fungus Malassezia[J]. Cell Host Microbe，2013，13（4）：477-488.

[28] BUGARCIC A，HITCHENS K，BECKHOUSE A G，et al. Human and mouse macrophage-inducible C-type lectin（Mincle）bind Candida albicans[J].Glycobiology，2008，18（9）：679-685.

[29] NAKAMURA N，SHIMAOKA Y，TOUGAN T，et al. Isolation and expression pro filing of genes upregulated in bone marrow-derived mononuclear cells of rheumatoid arthritis patients[J]. DNA Res，2006，13（4）：169-183.

[30] XU S，HUO J，LEE K G，et al. Phospholipase Cgamma2 is critical for Dectin-1-mediated Ca2+fl ux and cytokine production in dendritic cells[J]. J Biol Chem，2009，284（11）：7038-7046.

[31] GOODRIDGE H S，SIMMONS R M，UNDERHILL D M. Dectin-1 stimulation by Candida albicans yeast or zymosan triggers NFAT activation in macrophages and dendritic cells[J]. J Immunol，2007，178（5）：3107-3115.

[32] TASSI I，CELLA M，CASTRO I，et al. Requirementof phospholipase C-gamma2（PLCgamma2）for Dectin-1-induced antigen presentation and induction of TH1/TH17 polarization[J]. Eur J Immunol，2009，39（5）：1369-1378.

[33] GROSS O，GEWIES A，F(xiàn)INGER K，et al. Card9 controls a non-TLR signalling pathway for innate anti-fungal immunity[J]. Nature，2006，442（7103）：651-656.

[34] WERNINGHAUS K，BABIAK A，GROSS O，et al. Adjuvanticity of a synthetic cord factor analogue for subunit Mycobacterium tuberculosis vaccination requires FcRgamma-Syk-Card9-dependent innate immune activation[J]. J Exp Med，2009，206（1）：89-97.

[35] SAIJO S，IKEDA S，YAMABE K，et al. Dectin-2 recognition of alpha-mannans and induction of Th17 cell differentiation is essential for host defense against Candida albicans[J]. Immunity，2010，32（5）：681-691.

[36] HARA H，ISHIHARA C，TAKEUCHI A，et al. The adaptor protein CARD9 is essential for the activation of myeloid cells through ITAM-associated and Tolllike receptors[J]. Nat Immunol，2007，8（6）：619-629.

[37] GRINGHUIS S I，DEN DUNNEN J，LITJENS M，et al. Dectin-1 directs T helper cell differentiation by controlling noncanonical NF-kappaB activation through Raf-1 and Syk[J]. Nat Immunol，2009，10（2）：203-213.

[38] DAS B K，XIA L，PALANDJIAN L，et al.Characterization of a protein complex containing spliceosomal proteins SAPs 49，130，145，and 155[J].Mol Cell Biol，1999，19（10）：6796-6802.

[39] LIU H，SUN X，ZOU W，et al. Scalp acupuncture attenuates neurological de ficits in a rat model of hemorrhagic stroke[J/OL]. Complement Ther Med，2017，32：85-90. https：//doi.org/10.1016/j.ctim.2017.03.014

[40] ARUMUGAM T V，MANZANERO S，F(xiàn)URTADO M，et al. An atypical role for the myeloid receptor Mincle in central nervous system injury[J]. J Cereb Blood Flow Metab，2017，37（6）：2098-2111.

[41] XIE Y，GUO H，WANG L，et al. Human albumin attenuates excessive innate immunity via inhibition of microglial Mincle/Syk signaling in subarachnoid hemorrhage[J/OL]. Brain Behav Immun，2017，60：346-360. https：//doi.org/10.1016/j.bbi.2016.11.004