林瑞慶,孫炎戊,王新秋,翁亞彪
(1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院,廣東 廣州 510642;2.佛山市正典生物技術(shù)有限公司,廣東 佛山 528137)
非洲豬瘟(African Swine Fever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)引起的一種臨床上以高熱,皮膚充血,淋巴結(jié)、脾臟、腎臟等內(nèi)臟器官出血,病程短,病死率高達(dá)100%等為主要特征的非人獸共患的烈性傳染性疾病[1]。ASFV可感染家豬、野豬和軟蜱,是唯一一種可以節(jié)肢動(dòng)物為生物媒介的DNA病毒,由于該病毒對(duì)養(yǎng)豬行業(yè)危害甚大,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須報(bào)告的動(dòng)物疫病,我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病[2]。非洲豬瘟是《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃(2012—2020年)》中明確規(guī)定須重點(diǎn)防范的外來(lái)動(dòng)物疫病之一[3]。
非洲豬瘟最早被發(fā)現(xiàn)于20世紀(jì)初東非的肯尼亞,之后逐漸向西非、西歐等歐洲地區(qū)蔓延,至20世紀(jì)90年代末,ASF已在歐洲地區(qū)相繼大范圍暴發(fā)。自1921年以來(lái),全球約有53個(gè)國(guó)家發(fā)生過(guò)ASF疫情或檢測(cè)到病毒[4]。俄羅斯于2007年12月發(fā)生ASF疫情,截至2013年9月,據(jù)俄羅斯農(nóng)業(yè)部統(tǒng)計(jì),已撲殺40多萬(wàn)頭感染病豬,直接經(jīng)濟(jì)損失超過(guò)20億盧布(約5 400萬(wàn)美元),間接經(jīng)濟(jì)損失達(dá)200億~300億盧布(約5億~8億美元)[5]。2012年,非洲豬瘟病毒從俄羅斯流入烏克蘭后,白俄羅斯、波蘭、立陶宛、拉脫維亞、愛(ài)沙尼亞也相繼遭到感染,2018年,匈牙利、捷克等中歐國(guó)家也出現(xiàn)了疫情,而在俄羅斯國(guó)內(nèi),疫情則在逐漸東進(jìn),從其西部邊境地區(qū)向中部腹地?cái)U(kuò)散,2017年3月,西伯利亞伊爾庫(kù)茨克地區(qū)突然出現(xiàn)感染案例,疫情正式帶入亞洲。據(jù)報(bào)道,截至2018年8月,俄羅斯已撲殺感染豬近百萬(wàn)頭。2018年截至8月28日,除中國(guó)外還有11個(gè)國(guó)家報(bào)告發(fā)生3 235起疫情。2018年8月1日左右在我國(guó)遼寧省沈陽(yáng)市沈北新區(qū)某養(yǎng)殖戶的生豬發(fā)生疑似非洲豬瘟疫情,該豬場(chǎng)存欄383頭,發(fā)病47頭,死亡47頭,上報(bào)疫情后,8月2號(hào),國(guó)家派專家到當(dāng)?shù)剡M(jìn)行處理,隨即國(guó)家疾控中心確診非洲豬瘟疫情,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部緊急指導(dǎo)當(dāng)?shù)刈龊酶黜?xiàng)防治措施。截至2018年9月24日,我國(guó)遼寧、河南、江蘇、浙江、安徽、黑龍江、內(nèi)蒙古、吉林等省份已先后發(fā)生21起ASF疫情,疫情已從我國(guó)東北地區(qū)傳入中部地區(qū)、江淮地區(qū)和西北地區(qū)。面對(duì)來(lái)勢(shì)洶洶的ASF疫情,做好生物安全防控,研究其在我國(guó)境內(nèi)唯一的蟲媒介鈍緣蜱的傳播機(jī)制,做好ASFV防控措施刻不容緩。
蜱俗稱草爬子、壁虱、扁虱。中國(guó)已知蜱類117種,包括軟蜱科13種(銳緣蜱屬Argas 7種、敗蜱屬Carios 4種、鈍緣蜱屬Ornithodoros 2種)和硬蜱科104種(硬蜱屬Ixodes 24種、花蜱屬Amblyomma 8種、血蜱屬Haemaphysalis 44種、異扇蜱屬Anomalohimalaya 2種、璃眼蜱屬Hyalomma 6種、革蜱屬Dermacentor 12種、扇頭蜱屬Rhipicephalus 8種),約占世界蜱類總數(shù)的13%[6]。非洲豬瘟的生物媒介鈍緣蜱是蜱的一種,屬蛛形綱(Arachnida),蜱螨目(Acarina),蜱總科(Lxodoidae),軟蜱科(Argasidae),鈍緣蜱屬(Ornithodoros)。
鈍緣蜱發(fā)育過(guò)程包括卵、幼蟲、若蟲和成蟲4個(gè)階段,其中若蟲階段有3~8個(gè)齡期,由最后一個(gè)若蟲期變?yōu)槌上x。軟蜱是大型巢居式吸血?jiǎng)游?,通常在洞穴或有保護(hù)的宿主棲息地中出現(xiàn),吸血時(shí)間很短,多持續(xù)數(shù)10分鐘[7]。除卵期和一些種類的幼蜱外,其余各期均需要吸血才能成功發(fā)育到下一時(shí)期,雌蜱可以多次吸血多次產(chǎn)卵,每次可產(chǎn)卵50~300粒;鈍緣蜱飽血后即可從宿主身上脫落,其吸血行為僅發(fā)生在晚上動(dòng)物休息時(shí)[8]。鈍緣蜱屬多宿主寄生,豬可為其宿主但不常出現(xiàn),常在一些嚙齒動(dòng)物如野鼠、野兔等的巢穴或身體上,隨動(dòng)物的活動(dòng)進(jìn)行移動(dòng)。
鈍緣蜱對(duì)干燥和高溫環(huán)境有較強(qiáng)的適應(yīng)能力,這也是它們能夠在撒哈拉沙漠以南的非洲大陸廣泛分布的原因;不同環(huán)境下的溫度、濕度對(duì)蜱蟲體的發(fā)育有很大影響,低溫或饑餓環(huán)境下,幼蟲發(fā)育減緩,若蟲蛻皮時(shí)間延長(zhǎng),雌蟲延遲產(chǎn)卵;鈍緣蜱在宿主身上多次吸血、多次產(chǎn)卵和超強(qiáng)的耐饑餓等特點(diǎn),使其一般存活時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)5~10年,在適宜條件下其存活時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)15年[8-10]。
ASFV的傳播途徑主要有3種:1)直接接觸傳播:健康豬與患病豬或隱性帶毒豬之間通過(guò)直接接觸傳播;2)生物媒介傳播:鈍緣軟蜱是ASFV極為重要的自然宿主和儲(chǔ)存宿主,ASFV不僅可以在鈍緣蜱體內(nèi)保存,還可以在其體內(nèi)進(jìn)行復(fù)制。鈍緣蜱屬多宿主寄生,通過(guò)吸食動(dòng)物血液維持病毒在自然界中的感染;3)其他傳播途徑:其他小型嚙齒動(dòng)物、蚊子、廄蠅等也都可通過(guò)接觸感染豬傳播ASFV;受污染的水、豬肉及豬肉制品、血液制品、被污染的飼料、泔水、墊料、器具、短距離的氣溶膠傳播等[11-12]。
蜱傳播ASFV的方式主要有兩種,生物性傳播和機(jī)械性傳播,其中生物性傳播分為經(jīng)期傳播、經(jīng)卵傳播和交配傳播;ASFV可在鈍緣蜱體內(nèi)復(fù)制并可存在幾個(gè)月到幾年,感染蜱再叮咬豬時(shí)就會(huì)傳播該病毒,但隨著時(shí)間延長(zhǎng),蜱體的病毒滴度和傳病能力會(huì)下降[8]。在1999年葡萄牙發(fā)生過(guò)非洲豬瘟的疫點(diǎn),在發(fā)病后0、32、64周采集軟蜱樣本中發(fā)現(xiàn),其ASFV DNA檢出陽(yáng)性率分別為42.3%、26.4%、22.4%,雖然大部分蜱類沒(méi)有分離出病毒,但從0~32周之間,大若蟲和成蟲中分離的病毒比例分別從2%增加到9%和5%增加到11.5%,表明32周時(shí)病毒滴度更高,病毒在蜱體內(nèi)發(fā)生了復(fù)制;相比之下,小若蟲的病毒滴度在這個(gè)時(shí)期有所下降,從5%下降到1.3%;在63周,所有階段感染率都下降。實(shí)驗(yàn)室感染時(shí)表明通過(guò)吸血感染病毒的蜱,在感染后20周內(nèi),病毒有較高滴度,在41和61周后病毒滴度和感染率下降,試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明隨著時(shí)間的延長(zhǎng),ASFV在鈍緣蜱內(nèi)的病毒滴度和感染率會(huì)下降[13]。
根據(jù)近幾年國(guó)內(nèi)外流行病學(xué)調(diào)查及實(shí)驗(yàn)室感染研究結(jié)果證明能作為ASF媒介的蜱僅局限于軟蜱科中的鈍緣蜱屬(Ornithodors)[14]。發(fā)生非洲豬瘟的地區(qū)大部分都已發(fā)現(xiàn)作為該生物媒介的軟蜱分布[15]。目前國(guó)際上已證實(shí)至少有下列鈍緣蜱可以感染并傳播ASFV,即:非洲鈍緣蜱(O.moubata)、游走鈍緣蜱(O.erraticus)、皮革鈍緣蜱(O.coriaceus)、土氏鈍緣蜱(O.turicata)、波多黎各鈍緣蜱(O.puertoricensis)、摩洛哥鈍緣蜱(O.marocanus)、松雷鈍緣蜱(O.sonrai)、薩氏鈍緣蜱(O.savignyi)和帕克鈍緣蜱(O.parkeri)[8]。
在未發(fā)生非洲豬瘟前,我國(guó)對(duì)其媒介鈍緣蜱的關(guān)注較少,幾乎沒(méi)有進(jìn)行過(guò)關(guān)于軟蜱在我國(guó)的分布調(diào)查,關(guān)于我國(guó)鈍緣蜱的記錄僅限于20世紀(jì)70年代,分布調(diào)查地區(qū)也僅限于我國(guó)新疆、山西、陜西等地的荒漠、半荒漠地區(qū),在濕潤(rùn)、多雨的華中地區(qū)、華南地區(qū)、華北地區(qū)尚無(wú)報(bào)道[16-17]。目前已知我國(guó)分布有2種鈍緣蜱:特突鈍緣蜱(O.tartakovskyi)和左氏鈍緣蜱(O.tholozani,為乳突鈍緣蜱O.papillipes Birula 1895的同物異名),其中左氏鈍緣蜱可能是ASFV的潛在媒介[8]。此外,主要分布于新疆、甘肅及青海地區(qū)的拉合爾鈍緣蜱(Ornithodoros Lahorensis),在國(guó)外俄羅斯、巴基斯坦和伊朗等也有分布,從其生物學(xué)特性和生活環(huán)境分析,具有傳播ASFV的潛能[18]。對(duì)于拉合爾鈍緣蜱的分類地位存在一定爭(zhēng)議,國(guó)外一些學(xué)者及國(guó)內(nèi)陳澤等[16]將其修訂為拉合爾銳緣蜱,但國(guó)內(nèi)很多學(xué)者接受其鈍緣蜱的分類地位,呂繼洲等[18]通過(guò)對(duì)其形態(tài)學(xué)及16S rDNA與線粒體cox1序列的分析,也將其歸類為拉合爾鈍緣蜱。
劉建等根據(jù)軟蜱的生物學(xué)特性和收集的軟蜱世界范圍內(nèi)的分布資料,采用Climex軟件地點(diǎn)比較模型分析得出,軟蜱在我國(guó)云南、貴州、四川北部、重慶、陜西南部、湖南、湖北、江西東北部、安徽、河南、浙江、江蘇、山東、河北南部等地適生性很強(qiáng),為高發(fā)生區(qū);以硬蜱的生物學(xué)數(shù)據(jù)作為軟蜱的生物學(xué)數(shù)據(jù)參照,推測(cè)軟蜱的最適生存溫度為22~30℃,最適濕度為75%~95%之間[15]。
2017年3月27日,俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)的伊爾庫(kù)茨克州發(fā)生多起非洲豬瘟疫情,從地理距離來(lái)看,伊爾庫(kù)茨克州距離蒙古國(guó)只有約100千米,距中國(guó)邊境滿洲里地區(qū)只有約1 000千米。2018年8月1日,我國(guó)發(fā)生第1例ASF疫情,后國(guó)家外來(lái)動(dòng)物疫病研究中心采集病料進(jìn)行檢測(cè),確診為非洲豬瘟病毒核酸陽(yáng)性,基因測(cè)序結(jié)果顯示,其B646L/p72基因序列417個(gè)堿基與俄羅斯毒株100%匹配,與俄羅斯和東歐目前流行的格魯吉亞毒株(Georgia 2007)屬于同一進(jìn)化分支[19],表明中國(guó)沈陽(yáng)首發(fā)的ASF與俄羅斯ASF有淵源關(guān)系。截至2018年9月24日農(nóng)業(yè)部通告我國(guó)已發(fā)現(xiàn)ASF疫情的省份有遼寧、河南、江蘇、浙江、安徽、黑龍江、內(nèi)蒙古、吉林。對(duì)比劉建等[15]的研究結(jié)果,截至目前,已暴發(fā)ASF的地區(qū)與劉建等通過(guò)軟件分析得出的軟蜱適生區(qū)域高度接近,河南、江蘇、浙江、安徽均為高發(fā)生區(qū),遼寧、黑龍江、內(nèi)蒙古、吉林雖非軟蜱適生區(qū)的高發(fā)生區(qū),但均為我國(guó)邊境地區(qū)。
我國(guó)目前對(duì)軟蜱的分布和種類有所缺失,不可低估可能存在但尚未發(fā)現(xiàn)的軟蜱尤其是鈍緣蜱對(duì)ASF疫情的潛在威脅,一旦某些地區(qū)存在鈍緣蜱并感染ASFV,作為ASFV的自然宿主和儲(chǔ)存宿主在疫區(qū)長(zhǎng)期存在,該地區(qū)很容易形成ASFV的自然疫源地。當(dāng)前我國(guó)應(yīng)立即著手對(duì)各個(gè)地區(qū)內(nèi)蜱尤其是對(duì)鈍緣蜱的種類、分布進(jìn)行調(diào)查和監(jiān)測(cè),建立蜱的大數(shù)據(jù),以利于對(duì)ASF在我國(guó)的疫情發(fā)展情況作出更準(zhǔn)確的判斷,為防控ASF疫情提供生物媒介數(shù)據(jù)支撐,及時(shí)有效地做好疫情的防控。
國(guó)內(nèi)外尚無(wú)針對(duì)ASF的疫苗。我國(guó)是養(yǎng)豬大國(guó),養(yǎng)豬數(shù)量在這幾十年中快速增長(zhǎng)。但該行業(yè)發(fā)展分化,一方面是傳統(tǒng)的、小規(guī)模、自給自足的養(yǎng)殖方式還分散存在,另一方面是集約化、規(guī)?;?、工業(yè)化的養(yǎng)殖方式不斷增加。這兩種完全不同的養(yǎng)殖方式在生物安全防控方面的重視程度完全不同,前者由于生物安全重視程度低、技術(shù)落后、對(duì)動(dòng)物衛(wèi)生法規(guī)認(rèn)識(shí)不足,對(duì)非洲豬瘟和其他疫病的入侵、傳播起重要作用,截至2018年9月24日已發(fā)生的21起ASF疫情中,除1起發(fā)現(xiàn)于屠宰場(chǎng)外,其余全部集中于散戶或小型豬場(chǎng)發(fā)病。后者雖然重視生物安全防控,但對(duì)國(guó)內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)國(guó)外常發(fā)的疫病重視程度不夠,針對(duì)性的檢測(cè)措施缺失,對(duì)非洲豬瘟傳播媒介—蜱的滅殺不到位,ASFV感染風(fēng)險(xiǎn)也不容忽視。ASFV經(jīng)蜱傳播,也是目前對(duì)我國(guó)ASF疫情防控最大威脅之一,提高生物安全防控,做好消毒和滅蜱工作,是當(dāng)前切斷ASFV傳播途徑的重要措施。
根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2015年制定的《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范(試行)》和OIE推薦,目前戊二醛(如戊二醛癸甲溴銨溶液)、2.3%次氯酸鹽(次氯酸)、堿類(0.8%氫氧化鈉、氫氧化鉀等)、10%苯及苯酚、氯化物及酚化合物是最有效的消毒藥,這些消毒劑適用于對(duì)建筑物、木質(zhì)結(jié)構(gòu)、水泥地面、車輛和相關(guān)設(shè)施設(shè)備消毒,酒精(75%)和碘化物(枸櫞酸碘等)適用于對(duì)人員和豬的消毒。
對(duì)于養(yǎng)豬場(chǎng)、生豬批發(fā)市場(chǎng)和屠宰場(chǎng)使用的有效滅蜱藥物,國(guó)家尚無(wú)出臺(tái)相應(yīng)指引或標(biāo)準(zhǔn),對(duì)此廣東省畜牧獸醫(yī)局組織有關(guān)專家制定并于2018年9月11日發(fā)布了《防控非洲豬瘟消毒殺蜱流程與用藥指引》,指出目前可用于養(yǎng)豬場(chǎng)、生豬批發(fā)市場(chǎng)和屠宰場(chǎng)等對(duì)蜱有效的藥物為40%辛硫磷澆潑溶液、氰戊菊酯溶液等。
當(dāng)前形勢(shì)下,一是要做好已發(fā)生ASF疫情的區(qū)域及周邊臨近區(qū)域的滅蜱工作,從疫情源頭消滅ASFV的自然宿主和儲(chǔ)存宿主;二是需對(duì)蜱尤其是鈍緣蜱在我國(guó)的種類、分布、生物學(xué)特性等進(jìn)行研究、調(diào)查和監(jiān)測(cè);三是有條件的實(shí)驗(yàn)室可開(kāi)展ASFV對(duì)鈍緣蜱的感染機(jī)制及在其體內(nèi)增殖,群體之間的傳播機(jī)制等深入的研究;四是要對(duì)鈍緣蜱進(jìn)行藥物篩選,找出更多更安全、高效的殺蟲藥物,建立藥物防治機(jī)制;五是開(kāi)展鈍緣蜱的疫苗研制工作,避免過(guò)多使用藥物使其產(chǎn)生耐藥性。
除對(duì)蜱進(jìn)行防治外,環(huán)境中的廄蠅、蚊子及其他吸血?jiǎng)游飳?duì)ASFV的傳播作用也不容忽視,要做好滅蚊、蠅的措施,同時(shí)也要加強(qiáng)環(huán)境中帶蜱野生動(dòng)物(野鼠、野兔、狐貍、鳥類)的管理,盡量避免因上述動(dòng)物的遷移活動(dòng)傳播ASF。