李亞麗，姜 皓，艾麗萍，侯秀偉

(吉林大學(xué)第二醫(yī)院 心血管內(nèi)科，吉林 長(zhǎng)春130041)

心血管疾病是引起全球死亡的首要原因。冠心病是最常見(jiàn)的心血管疾病，表現(xiàn)為急性冠脈綜合征，包括不穩(wěn)定型心絞痛、ST段抬高心肌梗死和非ST段抬高心肌梗死。現(xiàn)有的診斷工具在急性冠脈綜合征患者檢測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)分層的效果不是非常理想。因此，探索可靠的具有高敏感性和特異性的標(biāo)志物,對(duì)于心血管疾病的早期診斷、及時(shí)治療和判斷預(yù)后具有重要意義。微小RNA (miRNA )是一類(lèi)保守的內(nèi)源性非編碼單鏈小分子RNA,參與包含心血管疾病在內(nèi)的多種病理學(xué)過(guò)程，并在不同類(lèi)型的心血管疾病中有顯著改變。此外，miRNAs能夠在外周循環(huán)中穩(wěn)定存在，并易于檢測(cè)。這些特性使miRNAs成為心血管疾病潛在標(biāo)志物,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)了各種心血管疾病的特異性循環(huán)miRNA。本文就循環(huán)microRNAs作為急性冠脈綜合征患者檢測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)分層的新潛在生物標(biāo)志物展開(kāi)綜述。

1 冠心病生物學(xué)標(biāo)志物的現(xiàn)狀

急性胸痛患者需要高度敏感和特異性的診斷工具來(lái)進(jìn)行適當(dāng)?shù)脑\斷[1]?，F(xiàn)有的幾種經(jīng)典生物標(biāo)記物主要用于心梗的診斷，包括肌鈣蛋白T，肌鈣蛋白I，血清肌紅蛋白和肌酸激酶MB。 肌鈣蛋白現(xiàn)在被常規(guī)用于心梗的診斷，雖然具有高靈敏性但特異性差，在不是心梗的患者中也發(fā)現(xiàn)其升高[2]。此外，肌鈣蛋白的釋放延遲，在1-2小時(shí)內(nèi)缺乏敏感性，并且需要在早期時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行連續(xù)測(cè)量。新近開(kāi)發(fā)的高靈敏度心肌肌鈣蛋白敏感性增高，但非心臟冠狀動(dòng)脈病變的假陽(yáng)性率也顯著上升。此外，現(xiàn)有生物學(xué)標(biāo)志物不能區(qū)分肌鈣蛋白陰性的不穩(wěn)定型心絞痛和非冠狀動(dòng)脈性胸痛。目前，可用的預(yù)后診斷工具是N末端前腦利鈉肽，超聲心動(dòng)圖和磁共振成像[3]。但這些工具并不理想，尋找用于急性冠脈綜合征患者檢測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)分層的新潛在生物標(biāo)志物具有積極的臨床意義。

2 微小RNA作為生物學(xué)標(biāo)志物

微小RNA是一類(lèi)長(zhǎng)度為19-25個(gè)核苷酸大小的非編碼RNA，主要在轉(zhuǎn)錄后水平通過(guò)翻譯抑制或降解信使RNA(mRNA)來(lái)發(fā)揮基因表達(dá)調(diào)控作用，影響多種病理生理學(xué)過(guò)程。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，微小RNA參與多種心血管疾病的進(jìn)程。例如，miR-1是心肌和骨骼肌特異性最豐富的miRNA，在心臟發(fā)育過(guò)程中起著調(diào)節(jié)分化和增殖的作用，同時(shí)也是成人心臟心肌細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)因子[4]。miR-143和-145是血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)中表達(dá)最高的微小RNA，對(duì)血管損傷反應(yīng)形成新內(nèi)膜起到促進(jìn)作用，并在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程有顯著變化[5]。

此外，miRNA已經(jīng)在包括血液在內(nèi)的體液中檢測(cè)到。血液中循環(huán)miRNA可以充當(dāng)旁分泌因子，由不同的細(xì)胞類(lèi)型分泌，整合于蛋白質(zhì)復(fù)合物，脂質(zhì)或高密度脂蛋白(HDL)，它們非常穩(wěn)定并且耐受RNA酶降解[6]。因此，miRNA滿足理想生物標(biāo)志物的幾個(gè)標(biāo)準(zhǔn)。已有研究表明，miRNA的適用性作為生物標(biāo)志物用于心血管疾病，甚至可能超過(guò)基于蛋白質(zhì)的生物標(biāo)志物[8]。miRNA研究領(lǐng)域?yàn)樾难苁录纳飿?biāo)志物風(fēng)險(xiǎn)分層創(chuàng)造了潛在的新方法，并且在大規(guī)模的前瞻性臨床研究中收集了有前景的數(shù)據(jù)[7]。

3 微小RNA在診斷冠心病患者中的作用

有研究發(fā)現(xiàn),miR在冠心病患者和非冠心病患者的血清中顯著變化。例如，miR-133a， miR-134， miR-145， miR-122和miR-370在冠心病患者血清中顯著升高，且與冠狀動(dòng)脈狹窄評(píng)價(jià)指標(biāo)Gensini評(píng)分呈正相關(guān)，可以用于預(yù)測(cè)CAD患者冠脈病變的存在和嚴(yán)重程度[9]。此外， 一項(xiàng)研究報(bào)道m(xù)iR-155與復(fù)雜的致動(dòng)脈粥樣硬化代謝風(fēng)險(xiǎn)因子呈負(fù)相關(guān)， miR-126， miR-33A / B，miR-1， miR-16， miR-122， miR-208B，miR-375和miR-499在區(qū)分冠心病患者和非冠心病患者無(wú)顯著的診斷意義[10]。

3.1微小RNA區(qū)分穩(wěn)定心絞痛與急性冠脈綜合征中的診斷作用

miR-1，miR-21和miR-499三個(gè)miRNA 發(fā)現(xiàn)在冠心病患者和急性冠脈綜合征患者顯著變化，與高敏感的肌鈣蛋白聯(lián)用可以顯著提高超敏肌鈣蛋白診斷急性冠脈綜合征的敏感性[11]。此外，這三個(gè)miRs與miR-145還被發(fā)現(xiàn)與CAD的嚴(yán)重程度有關(guān)[12]。還有研究表明。miR-132，miR-150和miR-186的組合作為生物標(biāo)志物，與4種經(jīng)典生物標(biāo)記hsTnI，BNP，C-反應(yīng)蛋白相比(C反應(yīng)蛋白)和半胱氨酸蛋白酶抑制劑C的組合，更具診斷意義[13]。

3.2微小RNA區(qū)分不穩(wěn)定性心絞痛與急性心梗的診斷作用

研究發(fā)現(xiàn)，miR-208A / B在診斷急性心梗方面，與肌鈣蛋白或超敏肌鈣蛋白相比具有更高的敏感性和特異性。此外，miR-133a， miR-320A和miR-499在診斷急性心梗方面也表現(xiàn)出很高的敏感和特異性。但它們不能用于鑒別穩(wěn)定型心絞痛和不穩(wěn)定性心絞痛[14]。而miRNA-337-5p單獨(dú)在穩(wěn)定型心絞痛中增加，但在不穩(wěn)定性心絞痛中不增加;而與健康對(duì)照相比，穩(wěn)定型心絞痛和不穩(wěn)定性心絞痛miRNA-433和miRNA-485-3p均單獨(dú)增加。這三種miRNA在穩(wěn)定型心絞痛中增加，但在不穩(wěn)定性心絞痛中患者中都沒(méi)有顯著差異[15]。

與不穩(wěn)定性心絞痛患者相比，非ST段抬高心?；颊叩膍iRNA-208a和miRNA-146a水平更高，而不穩(wěn)定性心絞痛患者的miRNA-1和miRNA-499水平超過(guò)非ST段抬高心?；颊叩乃?。miRNA-21在非ST段抬高心?；颊吆筒环€(wěn)定性心絞痛患者之間具有可比性[16]。

3.3微小RNA區(qū)分不穩(wěn)定性心絞痛與非心源性胸痛的診斷作用

miRNA-19a，miRNA-19b，miRNA-132，miRNA-140-3p，miRNA-142-5p，miRNA-150，miRNA-186和miRNA-210八個(gè)miRs在不穩(wěn)定性心絞痛患者與非心源性胸痛患者相比顯著升高。其中，單個(gè)miR用于診斷不穩(wěn)定性心絞痛患者時(shí)，MiR-186的診斷效果最佳，當(dāng)與miR-132和miR-150聯(lián)用時(shí)，診斷效果大幅提升[17]。

3.4微小RNA區(qū)分非ST段抬高心梗vs.ST段抬高心梗的診斷作用

以往的研究表明，miR-208B,miR-133a,miR-499,miR-451和miR-134水平在心?；颊咧斜磉_(dá)升高，但在ST段抬高心梗更高。STEMI患者的血漿miRNA-25-3p和miRNA-374b-5p，血小板miRNA-25-3p和miRNA-221-3p以及PBMC miRNA-25-3p和miRNA-221-3p的水平顯著高于非ST段抬高心梗[18]。血漿中miRNA-92a-3p和miRNA-30d-5p的水平在ST段抬高心梗中顯著低于非ST段抬高心梗的患者。

3.5微小RNA在支架再狹窄的作用

支架植入后患者會(huì)面臨幾個(gè)并發(fā)癥。這些并發(fā)癥因植入支架的類(lèi)型而異。裸金屬支架例如誘導(dǎo)由于血管損傷引起的平滑肌細(xì)胞的非典型增殖和遷移。這導(dǎo)致新生內(nèi)膜形成和隨后的支架內(nèi)再狹窄[19]。藥物洗脫支架大大降低了支架內(nèi)再狹窄的風(fēng)險(xiǎn)。然而，他們的主要缺點(diǎn)是晚期支架血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)增加。 研究發(fā)現(xiàn)，在支架miRNA-21敲除(KO)小鼠中，與支架化野生型小鼠相比，新內(nèi)膜至內(nèi)側(cè)比率，新內(nèi)膜厚度和新內(nèi)膜面積均降低。與野生型對(duì)照相比，miRNA-21 KO小鼠具有更多的抗炎性M2巨噬細(xì)胞， 因此miRNA-21在支架植入后促進(jìn)炎癥和血管重塑，可能是改善今天使用的藥物洗脫支架的再狹窄率[20]。

4 展望

盡管如此，miRNA對(duì)ACS患者的識(shí)別和風(fēng)險(xiǎn)分層具有很大的診斷潛力，其與CVD的病理生理今后還需要進(jìn)一步的研究證實(shí)或檢驗(yàn)一些生物標(biāo)志物的臨床意義。

miRNA具有巨大的潛力，可用作臨床適用的診斷以及預(yù)后生物標(biāo)志物。它們?cè)谄鞴俸图?xì)胞特異性表達(dá)，并參與調(diào)控冠心病的不同過(guò)程，這可能導(dǎo)致開(kāi)發(fā)出用于常規(guī)臨床實(shí)踐的強(qiáng)大診斷工具，為臨床診斷提供了新的方法和思路。但miRNA作為冠心病的生物學(xué)標(biāo)志物還需要大規(guī)模的臨床試驗(yàn)。此外，為了更可靠和可重復(fù)的結(jié)果，需要標(biāo)準(zhǔn)化miRNA分離和定量程序。