由多重耐藥（MDR）銅綠假單胞菌引起的感染呈現(xiàn)上升趨勢，特別是在危重患者中，導致相關感染的發(fā)病率和病死率增加。目前對MDR銅綠假單胞菌感染的治療可選藥物很少。2014 年和2015 年，美國FDA 和歐洲藥品管理局（EMA ）相繼分別批準了頭孢洛扎-他唑巴坦用于治療復雜性尿路感染和腹腔感染2項適應證。該復合制劑與頭孢他啶相比，對AmpC酶更穩(wěn)定，對銅綠假單胞菌的青霉素結合蛋白（PBP）有較高的親和力，可有效地穿透缺失孔蛋白的外膜蛋白，并在有外排泵存在的細胞周質中發(fā)揮抗菌作用。因此頭孢洛扎-他唑巴坦可用于治療MDR銅綠假單胞菌所致感染。但該復合制劑對產金屬酶（MBL）的菌株無效。本文主要評估MDR和廣泛耐藥（XDR） 銅綠假單胞菌對該藥的耐藥率、潛在的耐藥基因、克隆結構，并比較不同藥敏試驗方法對測試頭孢洛扎-他唑巴坦的準確性。

Frieder 等收集44株MDR和68株XDR銅綠假單胞菌。其中66 株銅綠假單胞菌確定為感染，占58.9%；46 株為定植菌，占41.1%。主要分離標本為血培養(yǎng)、傷口拭子和尿液。采用微量肉湯稀釋法（BMD）為標準方法、比較梯度擴散法（E試驗法）和紙片擴散法進行頭孢洛扎-他唑巴坦的藥敏試驗，根據EUCAST和CLSI藥敏折點判斷結果。微量肉湯稀釋法結果顯示頭孢洛扎-他唑巴坦的MIC50、MIC90和MIC范圍分別為2、256和0.5～＞256 mg/L。計有38 株（33.9%）銅綠假單胞菌對頭孢洛扎-他唑巴坦耐藥，其中17株分離自骨髓移植患者。根據卡方檢驗，MDR株的耐藥率（4.8%）明顯低于XDR株的耐藥率（50%），差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.000 1）。與標準方法（BMD）獲得的結果相比較，BMD檢測7株頭孢洛扎-他唑巴坦敏感的菌株，E試驗法檢測為耐藥；但沒有BMD耐藥的菌株被E試驗法檢測為敏感的菌株。因此E試驗法檢測銅綠假單胞菌對頭孢洛扎-他唑巴坦的敏感性試驗結果中未發(fā)生非常重大錯誤，但有6.3%的主要錯誤。Bland–Altman分析（MIC一致性分析）顯示在頭孢洛扎低濃度時BMD和E試驗法顯現(xiàn)很好的一致性，但當頭孢洛扎高濃度時（≥128 mg/L）兩者結果存在較大差異。

紙片擴散法測得71株銅綠假單胞菌對頭孢洛扎-他唑巴坦敏感、7株中介和34株耐藥。有1株假性耐藥（與標準方法BMD相比），沒有非常重大錯誤，分類一致率為92%（95%CI：86.5%～96.3%）。

采用恒溫擴增PCR方法篩選金屬β內酰胺酶編碼基因（如blaVIM1-37，blaNDM1-7），常規(guī)PCR 用于篩選blaIMP基因。隨機選擇的77株細菌進行全基因組測序（WGS）以用于克隆結構分析。在38株頭孢洛扎-他唑巴坦耐藥細菌中，主要的耐藥基因為blaIMP（n=25），blaVIM（n=4） 和blaGES（n=1），其余8株的基因型暫不清楚。多位點序列分型顯示，主要ST型為235型、274型和395型。頭孢洛扎-他唑巴坦耐藥性與ST235型有很大相關性（P＜0. 001）。

綜上所述，本研究中頭孢洛扎-他唑巴坦對銅綠假單胞菌顯示有較高的抗菌活性（敏感率66.1%）。耐藥性與ST235型相關，主要攜帶blaIMP基因。由于XDR菌株中存在碳青霉烯酶，故XDR菌株中頭孢洛扎-他唑巴坦耐藥率遠遠高于MDR株。紙片擴散法可用于準確測定頭孢洛扎-他唑巴坦的藥敏結果。

SCHAUMBURG F， BLETZ S， MELLMANN A， et al.Susceptibility of MDRPseudomonas aeruginosato ceftolozane/tazobactam and comparison of different susceptibility testing methods[J]. J Antimicrob Chemother， 2017， 72（11）: 3079-3084.