賀海林,陳劍虹,鐘澤艷,楊坤祥,官志揚,鐘國興,董 慧

(廣東省惠州市第一婦幼保健院產前診斷中心，廣東 惠州516007)

地中海貧血(Thalassemia trait,TT)是世界上最常見的單基因遺傳病之一，我國南方地中海貧血基因攜帶率高。重型α-地貧常導致水腫胎，威脅產婦生命；而大部分β-地貧純合子癥狀嚴重需要定期輸血才能維持生命，給社會和家庭造成了巨大的精神和經(jīng)濟壓力，被列為出生缺陷重點干預病種[1]。地貧基因攜帶者可無臨床表現(xiàn)，但血常規(guī)呈典型的小紅細胞低色素性貧血。由于病理生理和治療方法的不同，常需與其他小紅細胞低色素性貧血，主要是缺鐵性貧血(Iron definiency anemia,IDA)相鑒別。雖然，血紅蛋白電泳及PCR技術可準確篩查和診斷TT，但技術條件高，操作復雜，費時費力，尚未能廣泛應用。血常規(guī)檢測因其廉價易得的特點，已成為地貧篩查的一線指標，然而單獨的紅細胞參數(shù)難以鑒別TT及IDA，早有學者提出用紅細胞參數(shù)組成一系列運算公式[2-9]，用于TT及IDA的鑒別診斷。本研究以321例育齡人群的紅細胞參數(shù)，對國外文獻提及最多和新近提出的共計8個計算公式進行比較，以評估運算公式對這兩類貧血鑒別診斷的實際效能。

1 資料與方法

1.1對象本院產檢門診接收的小紅細胞低色素性貧血夫婦321例，MCV<82，MCH<27，其中經(jīng)血清鐵蛋白(男<14 g/L,女<10 g/L)確診為IDA的110例；經(jīng)血紅蛋白電泳HbA2<2.5%，且由基因檢測確診為α-TT的47例；經(jīng)血紅蛋白電泳HbA2>3.5%，且由基因檢測確診為β-TT的102例；經(jīng)血紅蛋白電泳HbA2>3.5%，且由基因檢測確診為α合并β型TT的63例；所有納入人群平均年齡32±14歲。

1.2方法全自動血細胞分析儀(BC-5380)檢測紅細胞參數(shù),全自動毛細管電泳儀(Sebia)檢測HbA2，如HbA2降低(<2.5%)或增高(>3.5%)，則進一步用反向點雜交法進行α、β-地中海貧血基因檢測，基因診斷試劑由潮州凱普生物科技有限公司提供。

1.3本研究采用的紅細胞參數(shù)及計算公式

F1、Shine & Lal Index:MCV2×MCH/100[2]；

F2、Mentzler Index:MCV/RBC[3]；

F3、Srivastava Index:MCH/RBC[4]；

F4、Ehsani formula:(MCV-10×RBC)[5]；

F5、Sirdah formula:(MCV-RBC-0.3×Hb)[6]；

F6、Bordbar & Taghipour formula│80-MCV│×│27- MCH│[7]；

F7、Green & King formula:MCV2×RDW/(Hb×10)[8]；

F8、Matos & Carvalho Index:1.91×RBC+0.044×MCHC[9]。

1.4統(tǒng)計學處理采用SPSS軟件和MedCalc12.7軟件分析8個公式的靈敏度(SEN)、特異度(SPE)、陰性預測值(PNV)、陽性預測值(PPV)、約登指數(shù)(YI)、陽性似然比(LR+)、陰性似然比(LR-)，繪制ROC曲線及計算曲線下面積(AUC)。

2 結果

2.1TT與IDA紅細胞參數(shù)結果比較TT組的RBC、Hb和MCHC均高于IDA組，而在MCV、MCH和RDW上均低于IDA組。差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表1。

表1 TT與IDA紅細胞參數(shù)結果比較(x±s)

*兩組間比較P<0.01

2.28個紅細胞參數(shù)計算公式對TT與IDA的鑒別效能8個公式的靈敏度、特異度、陰性預測值、陽性預測值、約登指數(shù)、陽性似然比、陰性似然比和ROC曲線下面積比較見表2。

表2 8個紅細胞參數(shù)計算公式對TT與IDA的鑒別效能比較

*本次研究數(shù)據(jù)得出的最佳臨界值，符合診斷界值診斷為TT，反之診斷為IDA。

2.38個計算公式的ROC曲線見圖1、圖2；由圖可得出：8個計算公式對TT與IDA的鑒別效能由高至低依次為：F7>F8>F5>F2>F4>F3>F6>F1，其中鑒別效能最高3個公式依次為：F7、F8和F5。

3 討論

地中海貧血是一組高度異質性的遺傳性血液病，其突變類型及頻率分布具有明顯的地域差異和種族特征[10]，本病的遺傳性改變、臨床表現(xiàn)、紅細胞參數(shù)等多項實驗室檢查指標方面呈現(xiàn)高度的異質性[11]。這也許是國內有研究顯示這些紅細胞參數(shù)計算公式診斷準確度低[12]的主要原因。而同時我們也應該進一步探討紅細胞參數(shù)計算公式在實際應用中的適用條件與注意事項，如：國外Hb的常用單位是g/dl，而國內則慣用g/l。雖然此時并不影響診斷準確度，但為了診斷界值與文獻界值不至懸殊，故在應用 Green & King formula公式時，我們仍把原始公式 MCV2×RDW/(Hb×100) 修正為MCV2×RDW/(Hb×10)。

圖1公式F1～F6ROC曲線比較圖圖2公式F2～F8ROC曲線比較圖

本次研究將國外應用最多及近年提出的紅細胞參數(shù)計算公式納入進來，予以比較。發(fā)現(xiàn)8個計算公式對TT與IDA均有一定鑒別效能，其中以公式F7、F8和F5的鑒別效能較好。因為惠州地區(qū)α-TT、β-TT的攜帶率均較高，故且本研究在規(guī)劃時不僅設計了β-TT與IDA的鑒別，還將α-TT、α合并β型TT也一起納入了與IDA的鑒別范圍，結果發(fā)現(xiàn)8個計算公式對α-TT、β-TT及α合并β型TT均能與IDA相鑒別。尤其是F7、F8兩公式所需參數(shù)較少且簡單易得，常規(guī)血球儀即可獲取、無需昂貴設備，特別適合尚無條件開展血紅蛋白電泳及基因檢測的基層醫(yī)療機構鑒別TT與IDA時選用。

同時我們也應注意：目前尚無任一紅細胞參數(shù)計算公式能完全鑒別TT與IDA。因此，在實際應用時必然會出現(xiàn)以下兩種情況：①計算公式提示病人為TT，但實際上是IDA；②計算公式提示病人為IDA，但實際上是TT。對于這兩種情況，我們均應隨訪：前者因為缺鐵，會出現(xiàn)血紅蛋白(Hb)繼續(xù)顯著減低，提示臨床應進一步檢測鐵代謝水平；后者則因為攜帶地貧基因，臨床上會出現(xiàn)鐵劑治療無效的情況。

綜上，紅細胞參數(shù)運算公式可協(xié)助臨床進行TT及IDA的鑒別診斷，但應用時應注意結合種族、TT類別等區(qū)域特征，最好建立適宜本地區(qū)使用的診斷界值，以提高診斷準確度；同時亦應了解其局限性，必要時仍需采用其他確診實驗。

[1]楊金玲,鄭 敏.β地中海貧血實驗室診斷的研究進展[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2016,4:7.

[2]Shine I,Lal S.A strategy to detect beta-thalassaemia minor[J].Lancet,1977,1(8013):692.

[3]Mentzer Wc.Differentiation of iron deficiency from thalassaemia trait.[J].Lancet,1973,1(7808):1514.

[4]Srivastava P C,Bevington J M.Iron deficiency and-or thalassaemia trait.[J].Lancet,1973,1(7807):832.

[5]A Aslani,MA Ehsani A new formula for differentiation of iron deficiency anemia (IDA) and thalassemia trait[J].Turkish Journal of Hematology,2005,22:268.

[6]Sirdah M,Tarazi I,Al N E,et al.Evaluation of the diagnostic reliability of different RBC indices and formulas in the differentiation of the beta-thalassaemia minor from iron deficiency in Palestinian population.[J].International Journal of Laboratory Hematology,2008,30(4):324.

[7]Bordbar E,Taghipour M,Zucconi B E.Reliability of Different RBC Indices and Formulas in Discriminating between β-Thalassemia Minor and other Microcytic Hypochromic Cases[J].Mediterranean Journal of Hematology & Infectious Diseases,2015,7(1):e2015022.

[8]Green R,King R.A new red cell discriminant incorporating volume dispersion for differentiating iron deficiency anemia from thalassemia minor.[J].Blood Cells,1989,15(3):481.

[9]Matos JF,Dusse LM,Borges KB,et al.A new index to discriminate between iron deficiency anemia and thalassemia trait[J].Revista Brasileira De Hematologia E Hemoterapia,2016,38(3):214.

[10]周玉球,徐湘民.中國人β地中海貧血的分子基礎及產前診斷[J].國際遺傳學雜志,1995,3:132.

[11]張學武.地中海貧血的異質性分析[J].國際輸血及血液學雜志,2012,35(3):255.

[12]陶義豐,丘玉鈴,林發(fā)全,等.紅細胞參數(shù)的運算公式對缺鐵性貧血與β-地中海貧血鑒別診斷價值探討[J].中國實驗診斷學,2012,16(3):426.