徐美蓉，韓舜愈，寇向龍

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品工程學(xué)院，甘肅 蘭州 730070；2.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所，甘肅 蘭州 730070）

大豆異黃酮是大豆中一類多酚化合物的總稱，是大豆生長(zhǎng)過(guò)程中形成的一類次生代謝物［1-3］。研究表明，大豆異黃酮具有植物類激素的作用，抗癌、抗骨質(zhì)疏松及預(yù)防心血管病。自然界中大豆異黃酮的資源十分有限，僅存在于豆科蝶形花亞科極少數(shù)植物中。大豆是最具營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的食物資源，目前已發(fā)現(xiàn)12種大豆異黃酮，其中3種為苷元結(jié)構(gòu)，9種為糖苷結(jié)構(gòu)。苷元包括染料木素、大豆苷元和黃豆苷元；糖苷以葡萄糖苷、乙酰基葡萄糖苷、丙二酰基葡萄糖苷3種形式存在，其中染料木苷、大豆苷、丙二酰金雀異黃苷和丙二酰大豆苷是大豆異黃酮的主要成分，約占總量的83%～93%［4-7］。分析大豆異黃酮總含量與5種主要組分以及組分之間的相關(guān)性，對(duì)培育高異黃酮大豆新品種及其理論研究都具有重要的意義。

1 材料與方法

1.1 主要儀器設(shè)備

Waters 2595高效液相色譜儀（美國(guó) Waters）；2487紫外檢測(cè)器（美國(guó)Waters）；Waters-sunfire-C18柱（250mm×4.6mm，5.0 μm）；corter1030全自動(dòng)定氮儀（瑞典福斯）；昆山舒美KQ2200E超聲波清洗器（昆山市超聲波儀器有限公司，超聲最大功率600 W）；Sartorius BS124S電子天平（德國(guó)Sartorius）。

1.2 原料與試劑

大豆樣品（采樣時(shí)間分別為2015年、2016年，采自甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院旱地農(nóng)業(yè)研究所國(guó)家大豆實(shí)驗(yàn)站鎮(zhèn)原點(diǎn)，采樣基數(shù)172個(gè)，其中栽培品種和地方品種各86份）。試劑有大豆苷、大豆苷元、染料木苷、染料木素、黃豆苷元5種大豆異黃酮標(biāo)準(zhǔn)品（美國(guó)Sigma，純度≥99%）；甲醇（HPLC）。實(shí)驗(yàn)所用其他試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)室用水為超純水。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品制備 將172份大豆樣品粉碎過(guò)40目篩，放入封口袋，備用。

1.3.2 大豆異黃酮測(cè)定 準(zhǔn)確稱取粉碎好大豆樣品0．500 0 g，以85%的甲醇25mL濕潤(rùn)并溶解，渦旋2min后，超聲提取45min，在此條件下重復(fù)提取2次，合并上清液，以85%的甲醇定溶至100mL，4 000 r/min離心10min，取上清液過(guò)0.45 m有機(jī)濾膜，裝入進(jìn)樣瓶，上機(jī)測(cè)定。

1.3.3 大豆蛋白質(zhì)含量測(cè)定 根據(jù)國(guó)標(biāo)GB5009.5-2016測(cè)定大豆品種的蛋白質(zhì)含量［8］。

1.3.4 大豆脂肪含量測(cè)定 根據(jù)國(guó)標(biāo)GB5009.6-2016測(cè)定大豆品種的脂肪含量［9］。

1.4 數(shù)據(jù)處理

用SPSS 10.0軟件分析大豆異黃酮與各組分以及組分間的相關(guān)性。

2 結(jié)果與分析

2.1 大豆資源主要品質(zhì)性狀及異黃酮含量檢測(cè)分析

2.1.1 大豆異黃酮總量及其5種組分的含量 從表1可以看出，大豆異黃酮平均含量 3 277.3 μg/g，其中地方品種大豆異黃酮平均含量 3 771.9 μg/g，栽培品種大豆異黃酮平均含量2 782.7 μg/g，地方品種異黃酮含量平均值比栽培品種高989.2 μg/g，即35.5%。檢測(cè)的5種大豆異黃酮組分地方品種組分含量均高于栽培品種組分含量，地方品種異黃酮組分含量比栽培品種組分含量高4.8%～48.4%。這是由于大豆異黃酮是產(chǎn)生大豆食品苦澀味的主要因子之一，長(zhǎng)期的人工選擇淘汰了口味不佳的營(yíng)養(yǎng)因子，便形成了栽培大豆品種異黃酮含量低于地方大豆品種的現(xiàn)象。

表1 大豆品種異黃酮含量及其5種組分的含量

2.1.2 大豆資源主要品質(zhì)性狀分析 從表2可以看出，大豆地方品種和栽培品種粗蛋白平均含量相差不大，分別為409.2、403.5 g/kg；而栽培品種粗脂肪含量為201.5 g/kg，較地方品種粗脂肪含量高20.3 g/kg，說(shuō)明栽培品種在脂肪含量上明顯優(yōu)于地方品種。

表2 大豆品種粗蛋白和粗脂肪含量g/kg

2.2 大豆主要品質(zhì)性狀及大豆異黃酮含量變異與分布

2.2.1 大豆主要品質(zhì)性狀及大豆異黃酮含量變異蛋白質(zhì)含量是大豆的主要營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)性狀。從表3可知，供試大豆品種蛋白質(zhì)含量平均為406.3 g/kg，變異幅度為406.3～511.1 g/kg，極差104.8 g/kg，標(biāo)準(zhǔn)差為27.64，變異系數(shù)6.8%。粗脂肪含量平均為191.4 g/kg，變異幅度為 191.4～233.4 g/kg，極差42.0 g/kg，標(biāo)準(zhǔn)差為19.96，變異系數(shù)10.4%。大豆異黃酮含量平均為3 277.3 μg/g，變異幅度在 1 796.5～8 990.9 μg/g，極差 7 194.4 μg/g，標(biāo)準(zhǔn)差為1 328.0，變異系數(shù)40.5%。

表3 大豆資源品質(zhì)及大豆異黃酮含量變異

2.2.2 大豆不同類型品種蛋白質(zhì)含量變異與分布如表4所示，大豆地方品種資源中蛋白質(zhì)含量平均為 409.2 g/kg，變異幅度為343.1～511.1 g/kg，極差 168.0 g/kg，標(biāo)準(zhǔn)差為 26.87，變異系數(shù)6.57%；其中6個(gè)品種蛋白質(zhì)含量在450 g/kg以上，約占地方資源的7.0%。大豆栽培品種資源中蛋白質(zhì)含量平均為403.5 g/kg，變異幅度為340.5～470.2 g/kg，極差 129.7 g/kg，標(biāo)準(zhǔn)差為28.25，變異系數(shù)7.00%；其中6個(gè)品種蛋白質(zhì)含量在450.0 g/kg以上，約占栽培品種資源的7.0%。可見(jiàn)大豆栽培品種中高蛋白質(zhì)含量品種不多。

2.2.3 不同類型大豆品種粗脂肪含量變異與分布通過(guò)表5可以看出，甘肅省大豆地方品種資源中粗脂肪含量平均為181.2 g/kg，變異幅度為153.1～231.1 g/kg，極差78 g/kg，標(biāo)準(zhǔn)差為26.87，變異系數(shù)14.8%。其中粗脂肪含量在210 g/kg以上的高油品種6個(gè)，約占地方資源的7.0%；大豆栽培品種資源中脂肪含量平均為201.5 g/kg，變異幅度為156.7～233.4 g/kg，極差 76.7 g/kg，標(biāo)準(zhǔn)差為16.57，變異系數(shù)8.2%；其中27個(gè)品種脂肪含量在210 g/kg以上，約占栽培品種資源的31.4%?？梢?jiàn)大豆栽培品種資源高脂肪品種比地方品種資源多。

2.3 大豆異黃酮及其組分含量與粗脂肪、蛋白質(zhì)含量相關(guān)性分析

大豆異黃酮含量同蛋白質(zhì)、粗脂肪和其主要組分含量相關(guān)性如表6所示，異黃酮總量與蛋白質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)；與脂肪含量呈顯著負(fù)相關(guān)。粗脂肪含量與大豆苷、大豆苷元、染料木苷和黃豆黃苷4種組分含量呈負(fù)相關(guān)。異黃酮總量與各主要組分含量之間均呈極顯著正相關(guān)。大豆總異黃酮含量與大豆苷、大豆苷元、染料木素和染料木苷含量呈極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.520、0.268、0.462、0.969。大豆苷和大豆苷元、染料木素、染料木苷和黃豆黃苷含量亦呈極顯著正相關(guān)。

3 小結(jié)與討論

對(duì)甘肅省內(nèi)種植的172份地方、栽培大豆品種的分析檢測(cè)表明，大豆異黃酮平均含量為3 277.3 μg/g，變異幅度為 1 796.5～8 990.9 μg/g，極差7 194.4 μg/g。異黃酮總量與蛋白質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)，與脂肪含量呈顯著負(fù)相關(guān)，粗脂肪含量與大豆苷、大豆苷元、染料木苷和黃豆黃苷4種組分含量呈負(fù)相關(guān)。大豆總異黃酮含量與大豆苷、大豆苷元、染料木素和染料木苷含量呈極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.520、0.268、0.462、0.969。同時(shí)明確了甘肅省主要大豆品種及地方品種資源與栽培品種的品質(zhì)現(xiàn)狀和差異。在甘肅省172份地方、栽培大豆品種資源中，高脂肪大豆栽培品種比地方品種多。表明甘肅省大豆品種改良中，注重提高產(chǎn)量和抗病性的同時(shí)，品質(zhì)也得到同步改良，使得大豆品種各項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)有較大改善。

表4 大豆不同類型品種蛋白質(zhì)含量變異與分布

表5 大豆不同類型品種粗脂肪含量變異與分布

表6 大豆異黃酮及其組分含量與脂肪、蛋白含量的相關(guān)系數(shù)

通過(guò)以上分析，總異黃酮含量與其主要組分含量均呈極顯著正相關(guān)是合乎常理的，也是可信的，因?yàn)榭偖慄S酮含量是各種異黃酮含量的總和，每種異黃酮含量增加必然引起總異黃酮含量增加。而大豆苷含量和染料木苷含量都是苷元結(jié)構(gòu)，也呈正相關(guān)關(guān)系，這對(duì)優(yōu)質(zhì)異黃酮育種和開發(fā)功能性異黃酮大豆品種具有意義。

［1］楊茂區(qū)，陳 偉，馮 磊，等．大豆異黃酮的生理功能研究進(jìn)展［J］. 大豆科學(xué)，2006，25（3）：320-324.

［2］殷麗君，李里特，李再貴，等.大豆異黃酮的研究近況與展望［J］. 食品科學(xué)，2002，23（4）：152-154.

［3］劉志勝，李里特，辰已英三.大豆異黃酮及生理功能研究進(jìn)展［J］. 食品工業(yè)科學(xué)，2000，21（1）：78-80.

［4］林 紅，來(lái)永才，齊 寧，等.黑龍江省野生大豆、栽培大豆高異黃酮種質(zhì)資源篩選［J］.植物遺傳資源學(xué)報(bào)，2005，6（1）：53-55.

［5］李衛(wèi)東，王繼安，盧為國(guó)，等.大豆異黃酮含量與主要農(nóng)藝性狀相關(guān)性的研究［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，37（10）：1458-1463.

［6］孫君明，丁安林.地理環(huán)境對(duì)大豆種子異黃酮積累的影響趨勢(shì)［J］. 大豆科學(xué)，1997，16（4）：298-303.

［7］孫君明，丁安林，常汝鎮(zhèn)，等.中國(guó)大豆異黃酮含量的初步分析［J］. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào)，1995，10（4）：51-54.

［8］國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局.GB5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.

［9］國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局.GB5009.6-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪的測(cè)定［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.