沈 君，王開泰，陸紅娟

(上海市第一人民醫(yī)院寶山分院，上海 200940)

非霍奇金淋巴瘤(NHL)是一組高度異質(zhì)性的淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤，起源于B淋巴細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞或自然殺傷(NK)細(xì)胞[1]。NHL的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體系統(tǒng)的免疫功能狀態(tài)密切相關(guān)，通常伴有免疫功能的抑制和損害，包括細(xì)胞免疫功能以及體液免疫功能紊亂[2]。T淋巴細(xì)胞在體內(nèi)的數(shù)量和比例相對(duì)比較穩(wěn)定，一旦出現(xiàn)數(shù)量變化或比例失調(diào)可引起免疫機(jī)制紊亂[3]。本文通過檢測(cè)NHL患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化，探討其臨床價(jià)值。

1 臨床資料

1.1一般資料 選取我院2010年1月—2015年12月初治NHL患者105例作為NHL組，均經(jīng)淋巴結(jié)活檢組織病理學(xué)檢查確診，診斷及分類符合WHO 2008淋巴瘤分類標(biāo)準(zhǔn)?；颊吣?1例，女44例；中位年齡66(26～88)歲，彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤80例，套細(xì)胞淋巴瘤9例，伯基特淋巴瘤6例，濾泡性淋巴瘤10例；病理分期Ⅲ/Ⅳ期72例，Ⅰ/Ⅱ期33例;化療后緩解(部分緩解或完全緩解)60例，未緩解(無效或疾病進(jìn)展)45例。選擇同時(shí)期來院體檢、未發(fā)現(xiàn)明確腫瘤疾患的正常人群52例作為健康對(duì)照組，其中男27例，女25例；中位年齡55(21～80)歲。

1.2研究方法 采集入選對(duì)象清晨空腹靜脈血2 mL，血液標(biāo)本EDTA抗凝，制備樣本。樣本白細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)在(4.0～10.0)×109L-1，若>10.0×109L-1的樣本用PBS稀釋，若 <4.0×109L-1的樣本分離單個(gè)核細(xì)胞，溶血標(biāo)本不能用。血液樣本均在采集后6 h內(nèi)處理。采用Beckman CoulterEPICS XL型流式細(xì)胞儀測(cè)定CD4+、CD8+水平并計(jì)算CD4+/CD8+值。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析。計(jì)量資料符合正態(tài)分布以均值±標(biāo)準(zhǔn)差描述，行t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布以中位數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，比較采用方差分析和q檢驗(yàn); 對(duì)預(yù)后因素行多因素COX分析；計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)(%)進(jìn)行描述，行卡方檢驗(yàn)； 檢驗(yàn)水準(zhǔn)定為α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1NHL組與健康對(duì)照組T淋巴細(xì)胞亞群含量比較 NHL組患者CD4+水平顯著低于健康對(duì)照組，CD8+水平顯著高于健康對(duì)照組，CD4+/CD8+顯著低于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。見表1。

表1 NHL組與健康對(duì)照組T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果

2.2不同分期NHL患者T淋巴細(xì)胞亞群含量比較Ⅲ/Ⅳ期NHL患者CD4+顯著低于Ⅰ/Ⅱ期NHL患者，CD8+顯著高于Ⅰ/Ⅱ期NHL患者，CD4+/CD8+顯著低于Ⅰ/Ⅱ期NHL患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。見表2。

表2 不同分期NHL患者T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果

2.3初治NHL緩解者化療前后T淋巴細(xì)胞亞群含量比較 化療后CD4+較化療前明顯升高，CD8+明顯降低，CD4+/CD8+明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。見表3。

表3 初治NHL緩解者化療前后T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果

2.4初治NHL未緩解者化療前后T淋巴細(xì)胞亞群含量比較 化療后CD4+較化療前有所降低，CD8+有所升高，CD4+/CD8+有所降低，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表4。

表4 初治NHL未緩解者化療前后T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果

3 討 論

腫瘤的發(fā)生/發(fā)展與機(jī)體的免疫狀況密切相關(guān)，在機(jī)體抗腫瘤免疫效應(yīng)中，細(xì)胞免疫起著重要的作用[4]。T淋巴細(xì)胞是最重要的細(xì)胞免疫細(xì)胞，它通過功能各異的T淋巴細(xì)胞亞群來發(fā)揮腫瘤免疫及監(jiān)視作用，T細(xì)胞各亞群比例是反映細(xì)胞免疫功能的重要標(biāo)志[5-6]。其中CD4+細(xì)胞是主要的細(xì)胞免疫應(yīng)答細(xì)胞，CD8+細(xì)胞具有殺傷靶細(xì)胞的功能，同時(shí)CD8+細(xì)胞對(duì)CD4+細(xì)胞又具有調(diào)節(jié)、抑制作用，CD4+/CD8+比值反映機(jī)體的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)，CD4+/CD8+保持動(dòng)態(tài)平衡是維持機(jī)體免疫力的關(guān)鍵因素。

血液腫瘤患者多伴有外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化，在血液腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中，腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生免疫抑制因子來抑制淋巴細(xì)胞分化增殖，CD4+淋巴細(xì)胞表面抗原減少，CD8+細(xì)胞反應(yīng)性增多，CD4+/CD8+比值下降[7-8]，機(jī)體免疫功能出現(xiàn)紊亂。非霍奇金淋巴瘤作為最常見及高發(fā)的血液腫瘤之一，體內(nèi)存在細(xì)胞免疫功能受損[9]。為進(jìn)一步明確NHL患者免疫功能情況，筆者研究通過流式細(xì)胞儀(FCM)測(cè)定外周血T淋巴細(xì)胞亞群來了解患者疾病狀態(tài)，從而指導(dǎo)診療。

Yang等[10]對(duì)B細(xì)胞淋巴瘤患者進(jìn)行淋巴組織細(xì)胞分析,結(jié)果顯示在調(diào)節(jié)性T細(xì)胞升高的腫瘤組織中CD4+/CD8+的比值下降。本研究結(jié)果證實(shí)初診NHL患者外周血CD4+細(xì)胞及CD4+/CD8+比值較正常健康人群顯著降低，CD8+細(xì)胞較健康人群顯著升高。本研究結(jié)果亦顯示，Ⅲ/Ⅳ期NHL患者外周血CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+比值較Ⅰ/Ⅱ期NHL患者顯著降低，CD8+細(xì)胞顯著升高。從研究結(jié)果可以看出，與健康人群相比，NHL患者確實(shí)存在免疫紊亂，且與臨床分期、疾病進(jìn)展密切相關(guān)，T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)為臨床提供了一項(xiàng)簡(jiǎn)易可行的病情評(píng)估免疫學(xué)指標(biāo)。本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)多個(gè)研究結(jié)果一致[10-12]。

Ansell等[13]早期研究中已證明彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤中, T淋巴細(xì)胞中活化的CD4+細(xì)胞含量越高則預(yù)后越好。本次研究結(jié)果顯示，NHL患者治療緩解者外周血CD4+細(xì)胞，CD4+/CD8+比值較化療前顯著升高，CD8+細(xì)胞較化療前顯著降低；治療未緩解者外周血CD4+細(xì)胞，CD4+/CD8+比值較化療前有所下降，CD8+細(xì)胞較化療前相比有所上升，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與樣本量較少有關(guān)。本研究結(jié)果說明治療前NHL患者細(xì)胞免疫功能多處于受抑制狀態(tài)，治療有效的NHL患者體內(nèi)細(xì)胞免疫功能有所恢復(fù)。而化療后未緩解的患者的細(xì)胞免疫功能仍處于受抑狀態(tài)。T淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定有助于評(píng)估病情及判斷預(yù)后。Diederichsen等[14]研究指出CD4+/CD8+比值可作為判斷腫瘤預(yù)后的相關(guān)指標(biāo)，本研究結(jié)果與之一致。

綜上所述，NHL患者體內(nèi)存在細(xì)胞免疫紊亂，通過檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞亞群有助于了解患者的免疫狀況，可實(shí)現(xiàn)疾病評(píng)估及協(xié)助判斷預(yù)后。T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)方法簡(jiǎn)單易行，為臨床及時(shí)了解NHL患者病情變化提供了一項(xiàng)有效的參考手段。

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