陳艷輝+周訓(xùn)華+趙瑩

[摘要] 目的 探討子宮上皮細(xì)胞穩(wěn)定性細(xì)胞游離亞鐵原卟啉（FH）對(duì)宮頸癌的診斷價(jià)值。 方法 選取2014年2月～2016年12月湖南省腦科醫(yī)院接受宮頸癌篩查的女性患者303例，經(jīng)病理學(xué)診斷宮頸癌患者56例，宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅱ～Ⅲ（CINⅡ～Ⅲ）患者112例，宮頸刮片檢查健康正常健康者135例，均行子宮上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測和液基薄層細(xì)胞檢測（TCT）。將病理學(xué)診斷結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，分析上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH和TCT對(duì)宮頸癌與CINⅡ～Ⅲ檢測的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、約登指數(shù)、陽性和陰性預(yù)測值。 結(jié)果 經(jīng)上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測，宮頸癌患者與CINⅡ～Ⅲ患者的總陽性率均明顯高于正常健康者（P < 0.05），且宮頸癌患者明顯高于CINⅡ～Ⅲ患者（P < 0.05）；上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測宮頸癌患者54例，CINⅡ～Ⅲ患者97例，TCT檢測宮頸癌患者49例，CINⅡ～Ⅲ患者93例；上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、約登指數(shù)、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值均高于TCT檢測。 結(jié)論 上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH在宮頸癌高表達(dá)，檢測結(jié)果有較高的準(zhǔn)確度、靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值。

[關(guān)鍵詞] 細(xì)胞游離亞鐵原卟啉；宮頸癌；宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅱ～Ⅲ；液基薄層細(xì)胞檢測

[中圖分類號(hào)] R711.74 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2018）01（b）-0079-04

[Abstract] Objective To investigate the diagnostic value of the uterine epithelial cells stability of the cells free ferrous protoporphyrin （FH） for cervical cancer. Methods Three hundred and three female patients with cervical cancer screening in Brain Hospital of Hunan Province were selected from February 2014 to December 2016， and there were 56 cases of cervical cancer and 112 cases of cervical intraepithelial neoplasia Ⅱ-Ⅲ （CIN Ⅱ-Ⅲ） by pathological diagnosis and 135 cases of normal healthy women by cervical scraping smear test， who were detected by uterine epithelial cells stability FH test and thinprep cytologic test （TCT）. The pathological diagnosis was used as the gold standard， and the sensitivities， specificity， accuraciy， Youden indexes， positive and negative predictive values of the uterine epithelial cells stability FH and TCT for cervical cancer and CINⅡ-Ⅲ were analyzed. Results The total FH positive rate of cervical cancer patients and CIN Ⅱ-Ⅲ patients were significantly higher than that of normal healthy subjects （P < 0.05）， of which the patients with cervical cancer were significantly higher than of the CINⅡ-Ⅲ patients （P < 0.05）. There were 54 cases patients of cervical cancer and 97 patients of CIN Ⅱ-Ⅲ who were detected by uterine epithelial cells stability FH， and there were 49 patients of cervical cancer and 93 patients of CINⅡ-Ⅲ who were detected by TCT. The sensitivities， specificity， accuracies， Youden indexes， positive predictive value and negative predictive value of the uterine epithelial cells stability FH test were higher than those of the TCT. Conclusion The expressions of the uterine epithelial cells stability FH test are increased in cervical cancer， which has higher accuracies， sensitivity， specificity， positive and negative predictive values for the detection of cervical cancer.

[Key words] Cells free ferrous protoporphyrin； Cervical carcinoma； Cervical intraepithelial neoplasiaⅡ-Ⅲ； Thinprep cytologic testendprint

宮頸癌是婦科最常見的一種惡性腫瘤，宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）是宮頸癌前病變，近年來，宮頸癌與CIN的發(fā)病均有逐漸年輕化的趨勢，且宮頸癌在女性癌癥患者中死亡率較高，嚴(yán)重威脅婦女的生命安全[1-2]。宮頸液基薄層細(xì)胞檢測（Thinprep cytologic test，TCT）是目前主要的宮頸細(xì)胞學(xué)篩查方法，有較高的靈敏度與特異度，對(duì)宮頸癌及CIN有較高的檢出率，但TCT的檢測效果并沒有預(yù)期理想[3-4]。細(xì)胞游離亞鐵原卟啉（free ferrous protoporphyrin，F(xiàn)H）含量同細(xì)胞癌變程度有密切關(guān)系，其析出量越高，癌變?cè)絿?yán)重，對(duì)宮頸癌的早期篩查與診斷有重要作用[5]。為提高宮頸癌的篩查診斷，以助于疾病的及時(shí)治療，本研究對(duì)宮頸癌及CINⅡ～Ⅲ患者均行子宮上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測和TCT檢測，根據(jù)其相應(yīng)指標(biāo)對(duì)比，分析子宮上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測臨床診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年2月～2016年12月接受宮頸癌篩查的女性，納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)病理學(xué)診斷為宮頸癌、CINⅡ～Ⅲ患者及宮頸刮片檢查正常者，有性生活史；排除標(biāo)準(zhǔn)：宮頸息肉、陰道不規(guī)則出血、子宮切除、黏膜下子宮肌瘤患者，近期接受放化療患者，有急性生殖道感染者。其中，經(jīng)病理學(xué)診斷：宮頸癌患者56例，年齡36～71歲，平均（51.21±4.62）歲；CINⅡ～Ⅲ患者112例，年齡28～57歲，平均（40.61±3.54）歲；宮頸刮片檢查正常者135例，年齡26～61歲，平均（42.74±4.19）歲。本研究患者均簽署知情同意書，且通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)。

1.2 檢測方法

1.2.1 病理學(xué)檢測方法 陰道鏡下選擇宮頸鱗-柱交接部的3、6、9、12點(diǎn)處取活檢標(biāo)本，4%甲醛固定，常規(guī)脫水、浸蠟及石蠟包埋，切5 μm薄片，進(jìn)行HE染色，在光鏡下觀察組織病理學(xué)形態(tài)，并做出病理診斷。

1.2.2 子宮上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測 ①檢測試劑與材料：FH染色試劑盒購于青島東孚美倫生物科技有限公司，細(xì)胞保存液與細(xì)胞刷均購于Hologic公司；②檢測方法：將宮頸滲液采樣器從陰道緩緩插入至子宮頸部位，并按右上、右下、左下、左上、宮頸管口部位循序擦拭，獲取細(xì)胞滲液，并將其與細(xì)胞保存液混勻送檢，嚴(yán)格按照FH染色試劑盒的步驟進(jìn)行操作（順時(shí)針折斷乳白色滴管管口，將試劑滴入測試池，并用該管吸入樣本液1 mL將其滴入測試池內(nèi)，之后將橘紅色滴管旋轉(zhuǎn)折斷，將試劑滴入測試池，2 min內(nèi)對(duì)比顯色情況）。

1.2.3 TCT檢測 將TCT宮頸細(xì)胞刷置入宮頸管1 cm左右，采集宮頸脫落細(xì)胞，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有細(xì)胞保存液瓶中送檢，通過全自動(dòng)細(xì)胞制備對(duì)樣本細(xì)胞進(jìn)行混勻、過濾及轉(zhuǎn)移，貼附于玻片上，染色固定，最后于顯微鏡下進(jìn)行觀察診斷。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 子宮上皮細(xì)胞穩(wěn)定性 FH檢測結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)， 陰性：細(xì)胞不著色或微藍(lán)色；陽性：藍(lán)色（子宮上皮細(xì)胞不穩(wěn)定）；強(qiáng)陽性：深藍(lán)色或顯深藍(lán)色后即刻轉(zhuǎn)為深黃色或棕紅色（子宮上皮細(xì)胞極不穩(wěn)定），總陽性率=（陽性+強(qiáng)陽性）/總?cè)藬?shù)×100%。

1.3.2 TCT檢測結(jié)果診斷標(biāo)準(zhǔn) 細(xì)胞核大、胞漿較少、核質(zhì)較粗糙、胞漿呈多形性或細(xì)胞邊界模糊等屬于CINⅡ～Ⅲ；細(xì)胞排列松散或紊亂、核質(zhì)深染、胞漿角化明顯、細(xì)胞形狀奇怪、核膜不規(guī)則增厚等屬于宮頸癌。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，多樣本比較采用秩和檢驗(yàn)，等級(jí)分布比較采用秩和檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 子宮上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測不同研究對(duì)象的結(jié)果比較

三組研究對(duì)象等級(jí)分布、總陽性率比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；宮頸癌患者與CINⅡ～Ⅲ患者的總陽性率均明顯高于正常健康者，且宮頸癌患者明顯高于CINⅡ～Ⅲ患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 兩種檢測方法檢測結(jié)果與病理學(xué)診斷結(jié)果比較

子宮上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測宮頸癌、CINⅡ～Ⅲ的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、約登指數(shù)、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、隱形預(yù)測值均高于TCT檢測。見表2、3。

3 討論

宮頸癌是目前我國最常見的婦科惡性腫瘤，高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染是其主要危險(xiǎn)因素。高危型HPV亞型產(chǎn)生E6和E7兩種癌蛋白，其可與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白相結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控，發(fā)生癌變[6-8]。宮頸癌變的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)漸進(jìn)性過程，CIN是宮頸癌前病變，通過臨床檢測可及時(shí)發(fā)現(xiàn)，確診后進(jìn)行積極治療，可避免其進(jìn)一步發(fā)展成宮頸癌，降低宮頸癌癌變率[9-11]。

本研究檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH在宮頸癌與CINⅡ～Ⅲ患者中陽性率均顯著升高，且宮頸癌患者明顯高于CINⅡ～Ⅲ患者；此外上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、約登指數(shù)、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值均高于TCT檢測，說明上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測具有較高的臨床診斷價(jià)值，其診斷準(zhǔn)確率具有相對(duì)可靠性。TCT檢測是臨床檢測CIN和宮頸癌的主要方法之一，其操作過程中清除了黏液、血液、各種炎癥細(xì)胞等干擾，在一定程度上提高了細(xì)胞制片質(zhì)量，使其臨床檢測結(jié)果有較高的靈敏度和特異度，有利于CIN和宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)和治療，但其受細(xì)胞學(xué)醫(yī)生操作技術(shù)水平和對(duì)細(xì)胞異常形態(tài)主觀判斷等的影響，容易漏診和誤診，對(duì)CIN和宮頸癌早期診斷有一定的限制，效果不甚理想[12-15]。上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測是近年來臨床上使用的一種新型的宮頸癌診斷方法，主要是通過FH與特定物質(zhì)的氧化還原反應(yīng)使子宮上皮細(xì)胞染色，根據(jù)著色的深淺分析患者病變程度[16]。正常情況下，亞鐵血紅素通常以結(jié)合蛋白的形式參與機(jī)體各種調(diào)節(jié)活動(dòng)，但當(dāng)出現(xiàn)致癌因子時(shí)，抑癌基因p53會(huì)發(fā)生突變或缺失，導(dǎo)致對(duì)糖代謝葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的抑制作用喪失，從而使細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定性失調(diào)、能量代謝發(fā)生異常、蛋白質(zhì)構(gòu)象發(fā)生變化，最終使親脂性物質(zhì)進(jìn)入含有亞鐵原卟啉蛋白的疏水核內(nèi)，導(dǎo)致亞鐵原卟啉脫落成為FH。游離的FH極不穩(wěn)定，可從鄰近的蛋白質(zhì)、脂肪和DNA上奪取電子，使自己處于穩(wěn)定狀態(tài)，如此連鎖反應(yīng)，引起細(xì)胞膜脂質(zhì)、細(xì)胞骨架、脂蛋白、DNA等氧化損傷，細(xì)胞自身調(diào)控發(fā)生紊亂，最終導(dǎo)致組織細(xì)胞發(fā)生癌變。因此，穩(wěn)定性FH可作為宮頸癌生物標(biāo)志物，通過檢測其含量多少可對(duì)患者進(jìn)行癌變?cè)\斷[17-19]。有研究發(fā)現(xiàn)[20]，上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測在宮頸癌及CIN患者的臨床診斷中有較高的準(zhǔn)確率，其臨床診斷相對(duì)可靠，此與本研究結(jié)果相符。endprint

綜上，上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH對(duì)宮頸癌檢測有較高的準(zhǔn)確度、靈敏度、特異度，陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值，對(duì)宮頸癌的臨床診斷敏感性較高。但由于本研究樣本量較小，且樣本細(xì)胞收集及上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測操作過程受人為因素的影響，如細(xì)胞取樣偏差、操作水平參差不齊等均可影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此還需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行研究，并改善上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測方法，減少主觀因素的影響，以進(jìn)一步提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。

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（收稿日期：2017-09-28 本文編輯：任 念）endprint