劉朝紅 鄒顏矯 陳琳 袁成良（通訊作者）

（四川省德陽市人民醫(yī)院 四川 德陽 618000）

腦脊液常規(guī)檢驗是基礎檢驗學的常規(guī)檢測項目，對于診斷和鑒別神經(jīng)系統(tǒng)感染性、出血性疾病以及明確惡性腫瘤的診斷等具有重要臨床意義[1]。胸腹水白細胞計數(shù)和分類對于臨床醫(yī)師鑒別診斷漏出液及滲出液、化膿性炎癥積液、結(jié)核性積液、病毒感染、系統(tǒng)性紅斑狼瘡的多發(fā)性漿膜炎等具有重要意義[2]。目前胸腹水、腦脊液標本因其特殊性，細胞學檢查的自動化程度還很低[3]。傳統(tǒng)有核細胞計數(shù)法是用改良牛鮑氏計數(shù)板耗時費力且不精密度較大、受人為主觀因素影響較多[4]。近年來，隨著醫(yī)療儀器的發(fā)展，血液細胞分析儀和尿沉渣分析儀也具備了進行體液細胞檢測的功能，這為漿膜腔積液、腦脊液有核細胞計數(shù)創(chuàng)造了有利條件[5]。本文就通過對本院的XN-1000全自動血細胞分析儀、UF-1000i尿沉渣分析儀與人工計數(shù)的有核細胞計數(shù)及分類做對比性分析研究，評價其在胸腹水、腦脊液有核細胞計數(shù)和分類檢測中的優(yōu)缺點及可行性。

1.材料與方法

1.1 材料

1.1.1一般資料 連續(xù)收集本院2016年門診和住院患者送檢標本478例，其中腹水212例，胸水160例，腦脊液106。采集標本均以 EDTA.K2抗凝劑抗凝，所有標本采集后均嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第四版）腦脊液、胸腹水留取操作指南[6]要求立即送檢，1 h內(nèi)完成儀器法和鏡檢法細胞計數(shù)與分類。

1.1.2儀器與試劑 Sysmex XN-1000全自動血液分析儀及原裝配套試劑、質(zhì)控品(日本sysmex公司)；Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀及原裝配套試劑、質(zhì)控品(日本sysmex公司)；BX43顯微鏡(日本Olympus公司)；標準Neubauer細胞計數(shù)板。及1%的冰醋酸。

1.2 方法

據(jù)白細胞濃度將478份標本分成高、中、低3個濃度組，低濃度細胞水平為(1～100)×106/L；中濃度細胞水平為(101～500)×106/L；高濃度細胞水平為大于501×106/L。改良牛鮑計數(shù)板計數(shù)法(手工法)和Sysmex XN-1000全自動血液分析儀法和Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀法(儀器法)都要在采集標本后1h內(nèi)完成檢測，每份標本檢測2次，結(jié)果取平均值。

1.2.1人工顯微鏡法 標本充分混勻后，同時加100μL標本和1%的冰醋酸200μL于潔凈試管中，充分混勻，靜置15分鐘后沖池，由2名資深技師采用雙盲法，嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》中的體液細胞計數(shù)指南用光學顯微鏡進行計數(shù)，每份標本檢測結(jié)果取兩次的平均值，白細胞數(shù)過多者需以生理鹽水稀釋后檢測。對于腦脊液有核細胞計數(shù)結(jié)果大于15×106/L以及胸腹水有核細胞計數(shù)結(jié)果大于50×106/L的標本，應用離心沉淀法收集有核細胞做瑞氏染色并進行細胞分類。

1.2.2 XN-1000分析儀檢測 標本檢測前要做儀器校準實驗和室內(nèi)質(zhì)控，符合要求后才能進行標本有核細胞計數(shù)。標本充分混勻后在XN-1000血液分析儀的體液模式下進行檢測。

1.2.3 UF1000i分析儀檢測 分析前須檢查儀器性能并進行室內(nèi)質(zhì)控，符合要求后才能進行標本有核細胞計數(shù)。取標本混勻后，按照UF 1000i尿沉渣分析儀操作說明，在手動模式下進行檢測。

1.3 統(tǒng)計學處理

應用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料以±s表示，對上述三種方法所得數(shù)據(jù)進行配對t檢驗和線性相關回歸分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

2.1 如表1結(jié)果顯示，各相關系數(shù)均大于0.8。均具有較好的相關性。同時可以看出，XN-1000血細胞分析儀的相關系數(shù)r比UF-1000i尿沉渣分析儀的相關系數(shù)r更高，相關性更好。

表1 手工法和儀器法計數(shù)胸腹水白細胞的線性相關回歸分析研究結(jié)果

2.2 Sysmex XN-1000血細胞分析儀與手工法細胞分類結(jié)果相比，三組標本有核細胞多個核百分比結(jié)果兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義（P值均大于0.05）。見表2。

表2 手工法和XN-1000儀器有核細胞百分比結(jié)果比較

綜上所述，使用UF-1000i尿沉渣分析儀和XN-1000全自動血液分析儀檢測腦脊液和胸腹水中有核細胞數(shù)均具有可行性；而XN-1000的相關性優(yōu)于UF-1000i，且XN-1000尚可用于用于有核細胞分類，所以XN-1000的臨床應用價值更大！

3.討論

腦脊液正常狀態(tài)下各成分的含量相對穩(wěn)定，當中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生器質(zhì)性病變時，由于脈絡叢上皮細胞通透性發(fā)生改變，可使腦脊液成分發(fā)生變化。所以通過腦脊液常規(guī)成分分析在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷中意義顯著。胸腹水則是在漿膜出現(xiàn)各種病理情況下，胸腔或腹腔內(nèi)液體異常增多積液。根據(jù)胸腹水成分及含量的不同可將積液分為滲出液和漏出液。明確積液的性質(zhì)有利于疾病的診斷和治療。傳統(tǒng)的人工顯微鏡計數(shù)方法，操作復雜、費時、準確性和重復性低、不精密度較大、影響因素較多。不利于疾病的診斷和療效觀察。

UF-1000i尿液分析儀是目前比較先進的一款自動化尿液分析儀，它使用半導體激光流式細胞計數(shù)法和核酸熒光染色技術，從而對各個粒子進行識別，能夠測量出其白細胞、紅細胞和上皮細胞及細菌霉菌等[7]，研究顯示其有核細胞計數(shù)結(jié)果與鏡檢法具有較好的相關性。但是。UF-1000i尿液分析儀不能進行細胞分類，如要分類時還需手工檢測。并且，應隨時對儀器進行必要的改進優(yōu)化[8]，以得出可靠的結(jié)果。

隨著新一代全自動血液分析儀的問世之后，光學法細胞檢測技術為胸腹水等低細胞數(shù)標本的準確計數(shù)分群另辟了一條嶄新的途徑，并漸顯其在該領域的應用價值和廣闊前景。目前，Sysmex XN-1000全自動血液分析儀采用半導體激光原理結(jié)合流式細胞和核酸熒光染色技術可實現(xiàn)對白細胞的計數(shù)和分類，而且另外設有專門體液標本檢測通道，可實現(xiàn)對胸腹水的檢測與分類[9]。研究可見，其細胞計數(shù)與手工法相關性非常好，分類結(jié)果也與手工法無明顯差異。

綜上所述，使用UF-1000i和XN-1000檢測腦脊液和胸腹水中紅、白細胞數(shù)均具有可行性。且自動化程度高、干擾因素少、準確性高，可以替代傳統(tǒng)的手工計數(shù)板法[10]。而XN-1000不僅準確度更高，相關性更好，還可用于有核細胞分類。所以臨床應用價值更大，更值得推廣！但是改良牛鮑計數(shù)板計數(shù)法是傳統(tǒng)胸腹水白細胞計數(shù)方法的金標準，而且儀器的計數(shù)與分類仍存在著一定的局限性，所以在儀器有異常報警時還需顯微鏡進行復檢，兩者有效結(jié)合可以有效提高檢驗效率及結(jié)果的準確性，更好地為患者服務。

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