位秀麗 汪靜杰 余春芳 劉志新 楊靖 徐祥 王婭 劉龍△

(1. 湖北醫(yī)藥學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)微生物教研室；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原學(xué)實驗室，湖北 十堰 442000)

醫(yī)學(xué)微生物學(xué)是研究與醫(yī)學(xué)有關(guān)微生物的生物學(xué)性狀、致病性與免疫性、檢查方法及防治措施的醫(yī)學(xué)核心課程，也是連接基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)的重要橋梁課程[1, 2]。掌握醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的基本理論及基本技能為后續(xù)的皮膚性病學(xué)、傳染病學(xué)、內(nèi)科學(xué)等臨床課程的學(xué)習(xí)奠定基礎(chǔ)[3,4]。在臨床實踐中，很多感染性疾病的診斷都需要醫(yī)學(xué)微生物學(xué)檢驗作為參考，因此醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗教學(xué)具有很強的實踐性與應(yīng)用性[5]。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)具有知識點多，容易混淆，需要醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗教學(xué)對知識點進(jìn)行鞏固，但是目前的醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗教學(xué)多年只是作為課堂理論教學(xué)的補充，學(xué)生學(xué)習(xí)興趣不高，操作機會少，且有一定的實驗室生物安全風(fēng)險。

經(jīng)過近五年的教學(xué)改革實踐，我們總結(jié)出一些明顯提高學(xué)生學(xué)習(xí)興趣與科學(xué)素養(yǎng)的教學(xué)方法。此方法在提升實驗教學(xué)效果的同時，提升了學(xué)生的臨床檢驗操作能力和綜合分析問題的能力，以加強學(xué)生適應(yīng)未來工作崗位的競爭力?，F(xiàn)將醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗教學(xué)中進(jìn)行的教學(xué)改革實踐具體方式方法詳述如下：

1 以創(chuàng)新性為導(dǎo)向，以提升學(xué)生參與度為目的，優(yōu)化醫(yī)學(xué)微生物實驗教學(xué)內(nèi)容

從學(xué)生自身角度，開發(fā)學(xué)生興趣，提高學(xué)生動手能力，提高學(xué)生創(chuàng)新探索精神，把學(xué)到的微生物學(xué)操作應(yīng)用于專業(yè)學(xué)習(xí)和平時實踐生活之中。在平時的實驗教學(xué)中，學(xué)生使用的試劑、培養(yǎng)基、平板等均由實驗人員準(zhǔn)備，特別是驗證性實驗部分，實驗操作時學(xué)生使用準(zhǔn)備的材料按照實驗步驟按部就班，學(xué)生普遍興趣不高，少部分學(xué)生并不會嚴(yán)格操作，致使實驗結(jié)果不明確，更會打消后期實驗的積極性。這就提示我們，在前期的實驗準(zhǔn)備時，讓學(xué)生參與其中，利用學(xué)生相關(guān)的實驗材料，以此激發(fā)學(xué)生操作的興趣，提高動手能力。

例如，在細(xì)菌的人工培育實驗中，前期制作培養(yǎng)平板時，積極引導(dǎo)學(xué)生配置無菌固體平板，然后鼓勵學(xué)生培養(yǎng)生活環(huán)境中的微生物，實驗教師提供鑷子、剪刀、吸管、棉簽、無菌水等，比如引導(dǎo)學(xué)生去采集空氣、下水道、實驗臺面、皮膚表面等部位的微生物，培養(yǎng)16小時后觀察培養(yǎng)基上生長的菌落種類和形態(tài)，大部分學(xué)生都會積極的參與到環(huán)境微生物的搜集中去，培養(yǎng)過夜后學(xué)生都會來積極觀察自己平板中的菌落形態(tài)和數(shù)量，實驗教師再給予指導(dǎo)分類，讓學(xué)生切身感受到微生物在自然界無處不在。這樣將大大提高學(xué)生的自主學(xué)習(xí)能力和動手能力，有利于培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新和探索精神，有利于學(xué)生將這些知識運用于以后的專業(yè)學(xué)習(xí)和實踐中去。

在革蘭染色實驗中，，實驗室老師前期實驗準(zhǔn)備已提供了大腸桿菌與葡萄球菌樣本，學(xué)生按部就班進(jìn)行涂片染色觀察；同時實驗教師鼓勵學(xué)生采集自己口腔的微生物進(jìn)行染色觀察，同學(xué)們都會積極進(jìn)行染色，然后通過油鏡觀察鑒定染色結(jié)果，同時教師鼓勵學(xué)生進(jìn)行繪圖或拍照后，課后聯(lián)網(wǎng)查找數(shù)據(jù)庫資料，鑒定口腔微生物的種類并進(jìn)行小組討論，第二次實驗課學(xué)生還會將查詢結(jié)果反饋老師。與學(xué)生自身密切相關(guān)的知識會充分激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，能達(dá)到更好的教學(xué)效果。

2 改善醫(yī)學(xué)微生物實驗操作、設(shè)計環(huán)節(jié)以高度融合貫穿臨床實際案例

由于生物安全因素及實驗條件場所的限制，一些高致病性微生物不能用于實驗教學(xué)。因此對于學(xué)生而言，要掌握這些微生物的檢查方法，需借助臨床影像資料、圖片演示、舉一反三等方法讓學(xué)生動態(tài)的分析微生物所致疾病與檢查方法之間的關(guān)系，將微生物特性作為基礎(chǔ)理論的核心，輔以合理的實驗設(shè)置，在理解和深化微生物防治理論知識的同時，掌握致病微生物的檢驗方法[6,7]。做到與臨床結(jié)合但又不偏重于臨床，緊密聯(lián)系理論課知識，掌握微生物檢查的基本技術(shù)。這樣便有助于學(xué)生理解比較抽象且不常見的微生物內(nèi)容，以此提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，從而提升微生物理論和實驗教學(xué)效果。

結(jié)核分枝桿菌作為一種高傳染性的病原菌，每年至少造成300萬人死亡，給人類帶來巨大傷害[8]，故結(jié)核分枝桿菌的準(zhǔn)確鑒定對其防治具有重要意義。由于結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁中的脂質(zhì)含量較一般細(xì)菌豐富，因此對理化因素有著超強的抵抗力，且一般革蘭染色不易著色[9]，實驗室檢驗需采集帶菌者的痰標(biāo)本進(jìn)行抗酸染色。由于較強的傳染性，實驗教學(xué)時可以設(shè)置示教講解內(nèi)容，播放臨床結(jié)核病人影像資料、結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)及培養(yǎng)物觀察，以結(jié)核分枝桿菌的生物學(xué)特點拓展到分離培養(yǎng)和鑒定方法。然后準(zhǔn)備滅菌致死的結(jié)核分枝桿菌讓學(xué)生進(jìn)行抗酸染色操作。這樣，將基礎(chǔ)理論和臨床知識遷移到在實驗教學(xué)中，加強知識間的內(nèi)在聯(lián)系，不僅復(fù)習(xí)鞏固了前面學(xué)過的臨床癥狀，還循序漸進(jìn)滲透了檢驗和防治方法，利于學(xué)生強化所學(xué)內(nèi)容，讓學(xué)生順利的理解并且掌握新的知識。

3 以提升探索性與設(shè)計性為目的的醫(yī)學(xué)微生物實驗教學(xué)內(nèi)容改革

長期以來，出于學(xué)生人身安全考慮，本科醫(yī)學(xué)微生物實驗教學(xué)中必須杜絕和避免化學(xué)灼傷、動物咬傷、儀器設(shè)備損壞、實驗室生物安全等事件的發(fā)生，但同時要聯(lián)系微生物理論課內(nèi)容開展實驗教學(xué)，能夠選擇的實驗內(nèi)容受到諸多限制，大多數(shù)實驗以驗證性操作實驗為主，包括：藥敏實驗、肥達(dá)反應(yīng)實驗、生化反應(yīng)、化膿性球菌鑒定等，且由于課堂時間限制，部分實驗學(xué)生僅能觀察染色標(biāo)本、識別培養(yǎng)結(jié)果，此過程中學(xué)生缺乏參與的積極性，并不能掌握實驗原理與步驟；或者參與操作的積極性不高，實驗操作不夠嚴(yán)謹(jǐn)，不能觀察到明顯的實驗結(jié)果，導(dǎo)致失去后期參與實驗的熱情。

通過增加探索性實驗或部分設(shè)計性實驗來改變目前的現(xiàn)狀，比如開展“臨床條件致病菌的人工培養(yǎng)”、“吞噬細(xì)胞吞噬功能的檢測”等探索性實驗，和“鮮奶中微生物的檢測”類的設(shè)計性實驗。讓學(xué)生思考設(shè)計實驗、全程參與實驗的每一步驟、觀察實驗現(xiàn)象、分析實驗結(jié)果，最后實驗教師總結(jié)，解答學(xué)生疑問。這樣可以大大帶動學(xué)生的實驗積極性，提高學(xué)生興趣，鼓勵學(xué)生自主思考和發(fā)現(xiàn)生活中和臨床上的相關(guān)微生物檢測問題，培養(yǎng)學(xué)生的自主學(xué)習(xí)能力，為后期臨床微生物的鑒別奠定堅實的基礎(chǔ)。

4 通過多樣化教學(xué)形式促進(jìn)學(xué)生樹立無菌操作的基本素養(yǎng)

根據(jù)科學(xué)原則，每名醫(yī)護(hù)人員都必須遵守?zé)o菌技術(shù)操作規(guī)程，以保證患者的安全[10]。無菌技術(shù)也是醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗中要求學(xué)生重點掌握的一項技術(shù)。學(xué)生應(yīng)在思想上中加以重視，實驗教師應(yīng)在實驗教學(xué)中特別強調(diào)。可播放視頻和圖片舉例加深學(xué)生的印象，如醫(yī)院手術(shù)室醫(yī)療器具、器械必須嚴(yán)格消毒，手術(shù)室醫(yī)生、護(hù)士必須嚴(yán)格進(jìn)行身體清洗消毒，手術(shù)過程必須嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，且病人術(shù)后應(yīng)防止微生物引起傷口感染，以確?；颊唔樌祻?fù)；醫(yī)療用人工肝、腎透析等操作等都需要嚴(yán)格消毒管道、密封袋等，換取接口均需無菌操作。無菌技術(shù)操作正確與否直接關(guān)系到患者的安危，教師應(yīng)積極引導(dǎo)學(xué)生樹立無菌觀念、增強無菌意識、充分認(rèn)識無菌操作的重要性。

在消毒與滅菌教學(xué)環(huán)節(jié)，教師需準(zhǔn)備多媒體課件和臨床影像資料，用以加強學(xué)生對感染病例的直觀認(rèn)識，且需提前做無菌操作的預(yù)實驗并準(zhǔn)備非無菌操作的實驗結(jié)果，在實驗課上進(jìn)行對比教學(xué)并展示給學(xué)生，加深學(xué)生對無菌概念的理解，并分步示教不規(guī)范操作污染后的結(jié)果，詳細(xì)講解逐一糾正學(xué)生不正確的操作，引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行規(guī)范化操作。例如，細(xì)菌的人工培養(yǎng)環(huán)節(jié)，引導(dǎo)學(xué)生配置細(xì)菌培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)pH后采用高壓滅菌鍋進(jìn)行滅菌，學(xué)生在采集空氣、下水道、實驗臺面、皮膚表面等處微生物進(jìn)行劃線培養(yǎng)，實驗教師示范操作后，學(xué)生都能做到實驗臺面、手部消毒，然后劃線規(guī)范操作。這樣不但激發(fā)了學(xué)生上實驗課的興趣，還養(yǎng)成了良好的無菌操作習(xí)慣，增強了學(xué)生責(zé)任意識，也為后期專業(yè)理論知識和實驗內(nèi)容打下堅實基礎(chǔ)。同時鼓勵學(xué)生強化訓(xùn)練，將無菌操作意識運用于后期臨床與科研生涯。

微生物實驗教學(xué)改革是一項長期而復(fù)雜的系統(tǒng)工程，需要學(xué)校、實驗室技術(shù)人員、教師和學(xué)生共同努力。本文所探討的醫(yī)學(xué)微生物實驗教學(xué)方式，是基于兩大方面著手的：一方面是考慮學(xué)生的學(xué)習(xí)規(guī)律，以學(xué)生為主體的進(jìn)行設(shè)計實驗環(huán)節(jié)，盡可能讓學(xué)生參與每個環(huán)節(jié)，做到“做中學(xué)”；另一方面為實驗教學(xué)內(nèi)容的優(yōu)化選擇，主要是選擇創(chuàng)新、探索性的教學(xué)內(nèi)容，刺激帶動學(xué)生的興趣，達(dá)到“學(xué)中做”目的；同時這兩方面相輔相成。通過以上醫(yī)學(xué)微生物實驗教學(xué)內(nèi)容的改革和創(chuàng)新，增加探索性實驗和設(shè)計性實驗, 提高學(xué)生參與醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗的熱情，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，積極調(diào)動學(xué)生在實驗課中的主觀能動性，提高醫(yī)學(xué)生的科研素養(yǎng)和創(chuàng)新探索精神，；通過實驗教學(xué)方法的創(chuàng)新，使學(xué)生掌握實驗技術(shù)和要點，加深學(xué)生對醫(yī)學(xué)微生物與臨床疾病的認(rèn)識，提高學(xué)生對問題的理解分析能力，提高學(xué)生臨床實踐能力和臨床檢驗操作能力，為其將來參加臨床工作和科研實踐奠定堅實的基礎(chǔ)，以提升學(xué)生適應(yīng)未來工作崗位的競爭力。

上述實驗教學(xué)方法取到了較好的效果，但仍然存在一定的不足。在實驗教學(xué)實施過程中，個別學(xué)生仍表現(xiàn)出參與熱情不高或不會主動參與，同時創(chuàng)新的實驗內(nèi)容仍然不夠。在今后的實驗教學(xué)模式探索過程中，需進(jìn)一步優(yōu)化實驗設(shè)計和相關(guān)實驗項目，并結(jié)合實驗教學(xué)過程中學(xué)生反饋建議，完善和改進(jìn)教學(xué)方法，如：增加實驗防護(hù)設(shè)施、加入動物實驗內(nèi)容、增加實驗經(jīng)費的投入，最大程度地讓學(xué)生參與并掌握醫(yī)學(xué)微生物檢驗技術(shù)，以追求更好的實驗教學(xué)效果。

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