韓秀蘭 才毛

（1青海省海西州食品藥品檢驗(yàn)所 青海 德令哈 817099）

（2青海省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)院 青海 西寧 810000）

六味丁香散為我省藏醫(yī)院的制劑產(chǎn)品，本品系藏族驗(yàn)方，具有清熱解毒，用于咽喉腫痛，聲音嘶啞，咳嗽。該品種為醫(yī)院制劑，目前該品種無生產(chǎn)企業(yè)注冊(cè)。截止2016年12月，收集到七家醫(yī)院生產(chǎn)的十批樣品。其檢驗(yàn)項(xiàng)目為散劑的常規(guī)項(xiàng)，為了進(jìn)一步控制制劑質(zhì)量，本文對(duì)該制的質(zhì)量控制方法進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。

1.儀器與試藥

美國(guó)Agilent1260高效液相色譜儀，Agilent1260漢字色譜工作站，美國(guó)Agilent1260紫外檢測(cè)器，甲醇為色譜純，水為新制重蒸餾水，丁香對(duì)照藥材（中國(guó)生物制品檢定所，批號(hào)：120907-201010）；甘草對(duì)照藥材（中國(guó)生物制品檢定所，批號(hào)：121001-201003）；訶子對(duì)照藥材（中國(guó)生物制品檢定所，批號(hào)：110731-200911）；丁香酚對(duì)照品（中國(guó)生物制品檢定所，批號(hào)：110831-200803），六味丁香散（七家醫(yī)院的十批樣品）。

2.方法與結(jié)果

2.1 薄層色譜[1]

木香、甘草、白花龍膽和訶子分別照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2015年版通則試驗(yàn)，《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B試驗(yàn)，《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B試驗(yàn)，《中國(guó)藥典》2015年版通則試驗(yàn)。見圖1～4。

圖1 木香的薄層色譜圖（T21℃，RH50%）

圖3 白花龍膽的薄層色譜圖（T25℃，RH38%）

圖4 訶子的薄層色譜圖（T25℃，RH38%）

2.2 顯微鑒別

取本品少許，置顯微鏡下觀察：草酸鈣簇晶眾多，大多存在于較小的薄壁細(xì)胞中，也有數(shù)個(gè)簇晶連接成行（丁香）。碳酸鈣結(jié)晶短棒狀或柱狀，直徑2～4μm（石灰華）。纖維束周圍薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維（甘草）?；ǚ哿ｎ惽蛐?，直徑27～35μm，外壁分層明顯，具3孔溝（白花龍膽）。石細(xì)胞成群，呈類圓形、長(zhǎng)卵形、長(zhǎng)方形或長(zhǎng)條形，孔溝細(xì)密而明顯（訶子）。見圖5～9。

圖5 草酸鈣簇晶（丁香）(10×40)

圖6 碳酸鈣結(jié)晶（石灰華）(10×40)

圖7 晶纖維（甘草）(10×40)

圖8 花粉粒（白花龍膽）(10×40)

圖9 石細(xì)胞 （訶子）(10×40)

2.3 含量測(cè)定

2.3.1 色譜條件 色譜柱：Agilent-C18柱（250mm×4.6mm）；柱溫：25℃；流動(dòng)相：以甲醇-水（55∶45）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。

2.3.2 線性關(guān)系測(cè)定 分別精密吸取丁香酚對(duì)照品溶液（233.24μg/ml）2、4、8、16、20μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版一部附錄Ⅵ D）測(cè)定峰面積。標(biāo)準(zhǔn)曲線y=1.0891x+17.876相關(guān)系數(shù)=1。丁香酚進(jìn)樣量在466.48～4664.8μg范圍內(nèi)與色譜峰面積呈良好線性關(guān)系。

2.3.3 回收率試驗(yàn) 采用加樣回收法，取已知含量的六味丁香散（批號(hào)：20120913，丁香酚含量為11.3966mg/g）約0.25g，平行6份，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入丁香酚對(duì)照品溶液（C=0.05643mg/ml）50ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率200W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。按上述色譜條件測(cè)定丁香酚的含量，平均回收率為98.71%，RSD為3.6%。

3.討論

丁香為方中君藥，主要含丁香酚，故以丁香酚為指標(biāo)成分進(jìn)行定量測(cè)定。本實(shí)驗(yàn)考察甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（10∶1∶0.1）、環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（12∶3∶0.5）、甲苯-乙酸乙酯（19∶10）、石油醚（60～90℃）-醋酸乙酯-苯（7∶1.5∶1.5）、環(huán)己烷-丙酮（10∶3）等展開系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（12∶3∶0.5）的效果好，故選用該展開系統(tǒng)。我們采用不同的流動(dòng)相乙腈：水（13∶87），乙腈：0.1%磷酸溶液(14∶86)，甲醇-水-磷酸（10∶90∶0.01），結(jié)果表明采用流動(dòng)相甲醇-水（55∶45）的色譜圖基線較穩(wěn)。我們采用不同的提取溶劑水，甲醇，稀乙醇，結(jié)果表明采用甲醇的色譜圖雜質(zhì)峰比較少，分離度較好。

【參考文獻(xiàn)】

[1]中華人民共和國(guó)藥典.2010年版一部，國(guó)家藥典委員會(huì)編[M].中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，4，15，57，80，173.