楊永康，張淼芳，楊 靜，張 婷

(陜西中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院，陜西 咸陽 712000)

子癇前期是一種妊娠期特發(fā)疾病，雖然發(fā)病率不高，卻嚴重影響孕婦及胎兒的健康。母體、胎盤及胎兒等諸多因素都有可能參與子癇前期的發(fā)生，而氧化應激以及炎癥反應作為子癇前期發(fā)病的重要潛在因素近年來受到學者的廣泛關注，如何通過抑制氧化應激以及炎癥反應減少子癇前期的發(fā)生是目前研究的熱點[1-3]。柴胡皂苷A(SSA)是中藥柴胡的主要提取物，其能夠抑制氧化應激反應，抑制內(nèi)毒素(LPS)誘導的炎癥反應，降低LPS的動物毒性作用[4-6]；能夠調(diào)節(jié)機體的免疫功能，而對免疫細胞功能的調(diào)節(jié)是其潛在的機制[7-8]。本研究觀察了SSA對LPS誘導子癇前期大鼠模型的影響，旨在為子癇前期的預防治療提供更多依據(jù)。

1 實驗資料

1.1實驗動物 40只10周齡雌性SD大鼠，購買并飼養(yǎng)于西安交通大學醫(yī)學部動物中心，動物合格證號：SCXK2007-001。

1.2實驗方法 試驗方案通過陜西中醫(yī)藥大學及西安交通大學動物倫理委員會審核并批準。待雌性大鼠處于發(fā)情期時，與同處發(fā)情期健壯雄性SD大鼠1∶1配對過夜。次日檢測雌鼠陰道精子作為受孕成功的標志，記錄為受孕第1天。40只雌性大鼠中共計受孕33只，將33只受孕大鼠按完全隨機法分成空白組、LPS組和LPS+SSA組，每組11只。受孕第5天，測每只受孕鼠體質(zhì)量與血壓。自受孕第5天始，空白組尾靜脈注射2 mL生理鹽水，LPS組尾靜脈注射0.5 mg/kg LPS(購自美國Sigma公司)溶液2 mL，LPS+SSA組尾靜脈注射0.5 mg/kg LPS和20 mg/kg SSA(購自美國Sigma公司)混合溶液2 mL，均1次/d，至受孕第18天。

1.3檢測指標 ①注射結(jié)束后，使用尾套法測量各組孕鼠8:00—10:00收縮壓和舒張壓，測血壓前先將孕鼠置于38 ℃環(huán)境中，待大鼠適應環(huán)境后每只孕鼠連續(xù)監(jiān)測血壓15次，連續(xù)3次血壓值差異在6 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)內(nèi)記錄為有效血壓。②收集干預最后一天20:00—10:00每只孕鼠的總尿液，收集前將孕鼠置于獨立的代謝籠中，期間禁食。③測量每只孕鼠體質(zhì)量，之后腹腔注射10%水合氯醛3 mL/kg麻醉孕鼠，手術分離子鼠并測量每只子鼠體質(zhì)量。孕鼠體質(zhì)量變化計算公式：體質(zhì)量變化=受孕第18天體質(zhì)量-子鼠體質(zhì)量-受孕第5天體質(zhì)量。

1.4統(tǒng)計學方法 所有實驗數(shù)據(jù)使用Photoshop 5.0作圖，采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件、以單因素方差法對實驗結(jié)果進行統(tǒng)計分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1各組孕鼠血壓比較 LPS組收縮壓和舒張壓均明顯高于空白組(P均<0.05)，提示子癇前期模型建立成功；LPS+SSA組收縮壓和舒張壓均明顯低于LPS組(P均<0.05)，與空白組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。見圖1及圖2。

圖1 各組孕鼠收縮壓比較

2.2各組孕鼠尿蛋白量比較 LPS組尿蛋白量明顯高于空白組(P<0.05)，而LPS+SSA組尿蛋白量明顯低于LPS組(P<0.05)，與空白組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見圖3。

圖2 各組孕鼠舒張壓比較

圖3 各組孕鼠尿蛋白量比較

2.3各組孕鼠及子鼠體質(zhì)量比較 3組間孕鼠體質(zhì)量變化比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)，見圖4；LPS組子鼠體質(zhì)量明顯低于空白組(P<0.05)，LPS+SSA組子鼠體質(zhì)量明顯高于LPS組(P<0.05)，與空白組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見圖5。

圖4 各組孕鼠體質(zhì)量變化比較

圖5 各組子鼠體質(zhì)量比較

3 討 論

LPS誘導的子癇前期大鼠模型因為操作簡便，造模成功率高而廣泛用于子癇前期的研究。雖然炎癥并不是子癇前期發(fā)生的唯一原因，而且LPS誘導的子癇前期模型僅能夠表現(xiàn)出部分子癇前期表型，但此模型對于研究子癇前期中異常炎癥反應與炎癥信號的傳導與轉(zhuǎn)化機制具有重要意義[9-10]。本研究發(fā)現(xiàn)LPS誘導后孕鼠收縮壓、舒張壓、尿蛋白量均明顯升高，子鼠體質(zhì)量明顯降低，提示子癇前期模型建立成功。

中藥柴胡具有抗炎、止痛及清熱的藥效，廣泛用于臨床。SSA作為柴胡的主要提取物，其能夠通過抑制ERK/NF-κB信號通路，顯著下調(diào)IL-1β、IL-6和TNF-α等炎性因子的表達，抑制炎癥反應[11-13]；其還能夠調(diào)節(jié)煙酸、煙酰胺以及花生四烯酸代謝，具有明確的抑制炎癥的潛在分子基礎[14]。但SSA是否能夠通過抑制炎癥抑制子癇前期的發(fā)生目前并不清楚。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，LPS+SSA組孕鼠血壓及尿蛋白量均明顯低于LPS組，而子鼠體質(zhì)量明顯高于LPS組，且均與空白組相近； 3組間孕鼠體質(zhì)量變化比較差異均無統(tǒng)計學意義。提示LPS造模對母體無明顯影響，但顯著影響胎鼠的生長與發(fā)育，而SSA能夠抑制LPS誘導的血壓及尿蛋白升高，抑制子癇前期的發(fā)生，為將來SSA應用于臨床預防或治療子癇前期提供了理論基礎。但SSA是如何抑制LPS所誘導的子癇前期的發(fā)生尚不清楚，有待后續(xù)進一步研究。

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