陳棟才，羅玫玲，李雪群

(惠州市中心血站，廣東 惠州 516003)

由于輸血過程當(dāng)中所產(chǎn)生的白細(xì)胞抗體有可能引發(fā)機(jī)體非溶血性發(fā)熱以及HLA同種異體免疫的不良反應(yīng)，所以在臨床應(yīng)用中白細(xì)胞被視為非治療成分需要進(jìn)行過濾清除[1]。臨床輸血過程中如果白細(xì)胞含量較大，則極易變成一些嗜白細(xì)胞病毒的載體，如果將該種白細(xì)胞含量較大的血液用于患者的治療過程中，將會大幅度提高此類病毒的感染率[2]。正因如此，臨床用血的白細(xì)胞濾除工作對于輸血安全以及相關(guān)治療有著重要的意義。當(dāng)前臨床中較為常見的濾白方法有洗滌法和過濾法，也就是通過洗滌或者過濾的辦法來消除血液當(dāng)中的白細(xì)胞成分[3]。本研究對比分析兩種濾白方法對于紅細(xì)胞懸浮液在濾白前后各項檢測指標(biāo)的變化情況，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料的選擇 采用隨機(jī)數(shù)字表法在惠州市中心血站選取2015年1—6月期間供臨床使用的懸浮紅細(xì)胞血液600袋，所有樣本均為采集2周以內(nèi)的新鮮血液，并且統(tǒng)一使用CPDA-1型添加劑，在進(jìn)行白細(xì)胞濾除前分別留取標(biāo)本檢測。

1.2 實驗方法 首先進(jìn)行標(biāo)本留樣，將入組的600份懸浮紅細(xì)胞血液，每份提取10 mL分別置于試管中標(biāo)本留樣；將剩余的600份懸浮紅細(xì)胞樣本進(jìn)行平均分配，分別采用洗滌法以及過濾法進(jìn)行濾白，在濾白結(jié)束后，再于每份懸浮紅細(xì)胞樣本中取10 mL分別置于試管中標(biāo)本留樣。洗滌法濾白可以通過醫(yī)院與相關(guān)血站合作，利用血站的洗滌儀器濾白；過濾法濾白的操作應(yīng)定為采血后冷藏保存6～24 h之后，在進(jìn)行過濾之前需要檢查血袋和導(dǎo)管是否出現(xiàn)破損或者斷裂的情況，實驗時，關(guān)閉排氣導(dǎo)管止流夾，搖勻抗凝劑后將血袋懸掛于4～6 ℃的低溫操作臺中開始過濾，過濾過程中需要保障血液過濾通暢，過濾器流速定為120～150滴/min，讓血液勻速流過濾網(wǎng)直至最終完成過濾。

1.2.1 洗滌法濾白的原理 將入組血樣進(jìn)行離心操作，完成離心操作之后在無菌條件下首先將血漿分出并去除白細(xì)胞，向紅細(xì)胞內(nèi)加入無菌生理鹽水混勻，再離心去除殘余的白細(xì)胞，如此反復(fù)洗滌3次以達(dá)到最終去除98%以上的血漿和90%以上的白細(xì)胞、血小板的目的，同時也去除了保存過程中產(chǎn)生的鉀、氨、乳酸等代謝產(chǎn)物，保留了70%以上紅細(xì)胞，最后加入生理鹽水懸浮即可。

1.2.2 過濾法濾白的原理 使用相關(guān)器材濾除血液當(dāng)中的白細(xì)胞，首先可以起到阻滯作用，由于濾器的過濾網(wǎng)孔徑均小于白細(xì)胞的直徑，同時又大于血液當(dāng)中的其他細(xì)胞成分，所以濾器可以起到阻滯白細(xì)胞的作用，同時不影響紅細(xì)胞、血小板和血漿蛋白等血液成分的通過。其次白細(xì)胞具有一定的黏附性，在使用濾器濾白期間，白細(xì)胞會受到細(xì)胞間的相互作用，進(jìn)而黏附于濾器的濾網(wǎng)和纖維之上。通常情況下，過濾器的濾網(wǎng)材料會選擇超細(xì)的聚酯纖維，該類材料在加工時，會形成交錯的網(wǎng)狀，這種特殊的結(jié)構(gòu)也會使纖維之間的有效孔徑對通過纖維的密度進(jìn)行更加精確的控制和改變。白細(xì)胞由于其體積較大，無法順暢通過，而血小板和紅細(xì)胞的體積較小且可塑性強(qiáng)，特別是在較為狹窄的位置，能夠變形為絲狀，這樣一來就能順利通過過濾器的濾網(wǎng)。

1.3 游離血紅蛋白的測定 血紅蛋白具有一定的過氧化物酶活性，因此可以催化過氧化氫使其分解釋放出氧氣，釋放出的氧氣可使鄰甲聯(lián)苯胺受到氧化作用而產(chǎn)生顏色變化，即從無色變化為藍(lán)紫色[4]。根據(jù)鄰甲聯(lián)苯胺的顯色情況對相關(guān)檢測指標(biāo)進(jìn)行比較，具體檢測公式：血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100，從而測出血紅蛋白含量；溶血率=游離Hb×(1-HCT)×100%÷總Hb。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 通過SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料比較采用t檢驗，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 洗滌法濾除白細(xì)胞前后各項指標(biāo)的檢測 通過洗滌法進(jìn)行懸浮紅細(xì)胞濾白后，RBC畸變率和RBC溶血率有所上升，而RBC攜氧能力有一定的下降趨勢，但是各個檢測指標(biāo)的變化幅度較小，無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)果詳見表1。

表1 懸浮紅細(xì)胞洗滌法濾白前后各項指標(biāo)檢測情況

2.2 過濾法濾除白細(xì)胞前后各項指標(biāo)的檢測 經(jīng)過過濾法進(jìn)行懸浮紅細(xì)胞濾白后，RBC攜氧能力降低，但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，RBC畸變率有所上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)果詳見表2。

表2 懸浮紅細(xì)胞過濾法濾白前后各項指標(biāo)檢測情況

3 討 論

在臨床治療中，出現(xiàn)非溶血性輸血發(fā)熱的概率約為55%～75%，其原因主要包括：輸血用的血液或者血制品本身就含有致熱源；其次，患者在多次接受輸血治療之后，自身體內(nèi)已經(jīng)產(chǎn)生了種類相同的血小板抗體或者白細(xì)胞抗體；此外，在對患者進(jìn)行輸血之后，其體內(nèi)的循環(huán)動力系統(tǒng)就會相應(yīng)發(fā)生改變，這種變化也有可能導(dǎo)致人體對病灶部位毒素的吸收，這也是誘發(fā)患者出現(xiàn)發(fā)熱癥狀的重要原因[5]。研究表明，輸血中血液白細(xì)胞成分的降低可有效控制非溶血性發(fā)熱的發(fā)生率[6]。

通過研究非溶血性發(fā)熱反應(yīng)的病理變化，發(fā)現(xiàn)非溶血性血小板發(fā)熱反應(yīng)和血小板活性物質(zhì)主要在儲存過程中產(chǎn)生，該類物質(zhì)包括組胺、脂質(zhì)、補(bǔ)充裂解成分和各種細(xì)胞因子，主要與IL-1、IL-6、TNF-α、IL-8和MCP-1相關(guān)。紅細(xì)胞和血小板制劑中的這些活性成分具有延長儲存時間的作用。研究證實，時間越長，發(fā)熱反應(yīng)的發(fā)生率越高。認(rèn)為血小板介導(dǎo)的介質(zhì)參與了HLA的非溶血性發(fā)熱反應(yīng)[7]。本研究發(fā)現(xiàn)，利用洗滌法濾除白細(xì)胞可以引發(fā)紅細(xì)胞的畸變率和溶血率升高，同時紅細(xì)胞的攜氧能力會有所減弱，但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義。由表2所示數(shù)據(jù)也可以看出采取過濾法濾除白細(xì)胞同樣也會導(dǎo)致紅細(xì)胞的畸變率和溶血率升高，紅細(xì)胞攜氧能力減弱，濾白前后的紅細(xì)胞畸變率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。過濾法濾白的原理是通過濾網(wǎng)阻隔體積較大的白細(xì)胞，讓體積較小表面光滑變形能力強(qiáng)的RBC通過從而達(dá)到濾白的目的。在此過程中紅細(xì)胞通過濾網(wǎng)時會受到機(jī)械性的擠壓產(chǎn)生變形，成為更易通過的橢圓形或梭形，這也成為紅細(xì)胞畸變率提高的主要原因[8]。

綜上所述，采用洗滌法和過濾法對血液進(jìn)行濾白，雖然過濾法會提升紅細(xì)胞的畸形率，但是不會對血液的安全性產(chǎn)生影響，由此可見，過濾法和洗滌法均為臨床上較為有效的濾白方法。在濾除白細(xì)胞時，還應(yīng)注意基礎(chǔ)和臨床研究的應(yīng)用，無論輸血工作者或者臨床醫(yī)師和研究人員應(yīng)深入研究其應(yīng)用材料，明確其適應(yīng)證，根據(jù)患者的實際情況及供血方案選擇最適宜的濾

白方法，在滿足臨床治療需要的同時，最大限度地保證輸血的安全。應(yīng)通過研究評定各濾白方法的優(yōu)點以及適應(yīng)情況，提高濾除白細(xì)胞輸血技術(shù)，在未來臨床實踐中為患者提供更好的服務(wù)。

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